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1、菊花、金银花浸膏提取工艺探究［摘要］目的对菊花、金银花浸膏的提取工艺进行研究。方法采用正交试验法进行优选，以收率和绿原酸含量作为评价指标。结果最佳工艺为：微沸提取2次，第1次加9倍水，第2次加7倍水，每次2h,醇沉浓度为63%O结论优选得到的工艺稳定可靠。［关键词］菊花、金银花浸膏；提取工艺；正交设计［中图分类号］R284.2［文献标识码］A［文章编号］1673-7210(2012)12(c)-0132-02菊花为菊科植物菊(ChrysanthemummorifoliumRamat.)的干燥头状花序。金银花为忍冬科植物忍冬(Lonicer
2、ajaponicaThunb.)的干燥花蕾或带初开的花［1］。菊花和金银花皆为国家批准的既是食品又是药品的物品，皆含有具有抗菌、抗病毒作用的绿原酸，两者均有清热解毒的功效［2］,在我国传统食品如龟苓膏、凉茶中常常组合使用。据文献报道，绿原酸具有多种生物活性，绿原酸可调节淋巴细胞分泌肿瘤坏死因子(TNF-a)和干扰素(INF-a),发挥免疫调节作用［3］,绿原酸具有抗菌、抗病毒、抗氧化的作用［4-5］,对多种疾病的预防和治疗具有作用，应用前景较好［6］。菊花、金银花为本公司开发的新产品菊花龟苓膏中的主要组成成分，现对菊花金银花浸膏的提取工艺
3、进行研究，参考相关文献，采用正交试验法［7-8］,为菊花龟苓膏的生产提供科学依据。1仪器与试剂1.1仪器Agilent1200高效液相色谱仪，DAD检测器，自动进样器。1.2试药绿原酸对照品(批号：110756-200110,中国药品生物制品检定所提供)，流动相用甲醇为色谱纯，水为纯化水，其他试剂均为分析纯。菊花、金银花均经我公司食品质量部鉴定，菊花为菊科植物菊(ChrysanthemummorifoliumRamat.)的干燥头状花序；金银花为忍冬科植物忍冬(LonicerajaponicaThunb.)的干燥花蕾或带初开的花。2方法与
4、结果2.1菊花金银花浸膏制备方法采用传统水提法，水提法是提取绿原酸较好的方法［9］。本实验采用3因素3水平正交实验设计，因素A提取时间分别为1、1.5、2h；因素B提取次数分别为1、2、3次；因素C醇沉浓度分别为63%、70%、75%O取同批菊花金银花药材9份，每份50g,按表1设计进行试验，第1次加药材量9倍水，第2次加药材量7倍水，第3次加药材量7倍水,合并提取液，过滤，浓缩至相对密度为1.05,醇沉，取上清液过滤，上清液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.25,备用。2.2绿原酸含量测定方法[10]2.2.1绿原酸标准储备液（2.00mg
5、/mL）称取绿原酸标准品0.02g（精确至0.0001g）置于10.0mL容量瓶中，加流动相溶解并定容至刻度，混匀（此标准储备液在4。（2冰箱中，可保存5d）o2.2.2绿原酸标准使用液（200Ug/mL）准确量取1.00mL绿原酸标准储备液于10.0niL容量瓶中，用流动相稀释至刻度，混匀（此标准使用液在冰箱中，可保存5d）o2.2.3试样处理称取2g菊花金银花浸膏（精确到0.001g）于25.0H1L容量瓶中，加入20mL70%甲醇，超声提取30min,用70%甲醇定容至刻度，混匀，过0.45um滤膜，滤液供色谱分析。2.2.4标准曲
6、线的制备分别吸取绿原酸标准使用液，用流动相在容量瓶中稀释成浓度分别为2.0、10.0、20.0、40.0.80.0ug/mL的标准系列。2.2.5液相色谱条件色谱条件:DiamonsilC18色谱柱（5um,4.0mmX250mm）；流动相：乙騰-0.5%乙酸溶液（10：90）；流速：1.0mL/min；检测波长：327nm；柱温：30°C；进样量：10uLo2.2.6色谱分析取标准溶液和试样溶液注入色谱柱中，以保留时间定性，以试样峰面积与标准比较定量。2.3正交试验2.3.1因素与水平选择提取时间(A)、提取次数(B).醇沉浓度(C)3
7、个因素，设计3个水平，选用L9(34)正交表。因素水平见表lo2.3.2结果分析见表2〜4。从表2可见，在实验水平范围内，收率较佳的工艺为A3B3C2,绿原酸含量较佳的工艺为A3B2Clo表3、4的方差分析结果表明，A、B、C因素对收率的影响都不显著；A因素对绿原酸含量的影响较大(P<0.05),B、C因素对绿原酸含量的影响不显著。综合分析结果，主要考虑绿原酸含量，确定此方法的提取工艺为微沸提取2次，第1次加9倍水，第2次加7倍水，每次2h,醇沉浓度为63%。2.4最佳工艺验证按照上述优化工艺，平行提取3份，分别测定收率和绿原酸的含量，收
8、率分别为9.45%、9.65%、9.53%,平均收率为9.54%；绿原酸含量分别为10.33%、9.89%.11.92%,平均含量为10.71%o结果表明，筛选出来的工艺稳定可行。3讨论3.1
