蟾酥对青霉、曲霉、根霉生长抑制作用探究

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1、蟾酥对青霉.曲霉.根霉生长抑制作用探究【摘要】；用不同浓度的蟾酥药液，采用圆形滤纸法就其对青霉、曲霉、根霉的生长是否有抑制作用进行研究。结果表明：蟾酥对青霉、曲霉、根霉的生长没有抑制作用。毕业论文【关键词】；蟾酥青霉；曲霉；根霉；抑菌圈毕业论文蟾酥对致病菌是否有抑制作用仍在不断的探索当中,现在已证明蟾酥对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、伤寒杆菌及痢疾杆菌有抑制作用。但对青霉、曲霉、根霉等真菌是否有同样的抑制作用仍未见报道。本实验通过圆形滤纸片法研究蟾酥对青霉、曲霉、根霉三种真菌生长是否具有抑制作用,目的是为进一步的深入研究提供依据。毕业论文;1;材料与方法毕业论文:1.1;材料毕业论文蟾酥的制

2、备；蟾蛉购置于牡丹江地区。洗净其体表后，运用竹刺挤浆法挤净蟾蛛耳后腺的白色液体，涂于洁净的玻璃板上,待阴干后将其刮下研成细粉状置于洁净的玻璃瓶内，放在干燥、阴凉处保存，备用。毕业论文；1.1.2;蟾酥的主要成分；蟾酥的成分很复杂，包含两大类物质，一类是生物原氨基，这类物质一部分由邻苯二酚衍生物组成，一部分由眄I唏系碱类组成，如S■軽色胺、蟾酥特尼定、蟾酥流堇等组成。另一类物质是蟾毒配基B和蟾酥毒素。毕业论文种；本实验选用的种为根霉、曲霉、青霉，属于真菌，由牡丹江师范学院生物系微生物实验室提供。毕业论文;1.1.4;马铃薯培养基(PDA)的制备(自然pH值)；马铃薯培养基的配方：马铃薯(去

3、皮);200g,蔗糖20g,水1000ml。毕业论文1.1.5;主要仪器;高压灭菌锅，食用菌接种器EiC(SS-2801)，恒温培养箱(JT75-2)，电子天平(BP2110)o毕业论文:1.2;实验方法毕业论文；1.2.1;蟾酥药液的制备；用电子天平分别称取120mg和200mg的蟾酥药粉加10ml的蒸惚水，分别配成12mg/ml和20mg/ml的不同浓度的蟾酥药液，封好，备用。毕业论文；1.2.2;灭越将备用的锥形瓶、移液管、拖菌耙、培养皿、蒸憎水、直径1cm圆形滤纸片封好，放在高压锅内灭菌温度121°C,时间30mino毕业论文

4、=

5、；1.2.3;菌悬液的制备；取活化的青霉、曲霉、

6、根霉在食用菌接种器上的酒精灯火焰旁，用灼烧冷却后的接种环在试管m2内挑取少量菌苔，并迅速放入试管中，分三个试管分别放入,不断的摇动，封好。达克宁稀释液也依此法制备。毕业论；1.2.4;涂菌和放滤纸片在无菌的条件下，将已融化并冷却至459左右的马铃薯培养基倒入无菌的培养皿中，待凝固后，再用无菌的移液管分别吸取不同的霉菌稀释液0.2ml滴m2m2入装有培养基的培养皿中，然后用玻璃耙子将菌平推于培养皿的培养基上，再将剪好的园形滤纸片侵入12mg/ml和20mg/ml的蟾酥药液和达克宁药液的稀释液中，待滤纸片浸润后，立即拿出,每个培养皿中放三个滤纸片，滤纸片在培养基上呈三角形放置，然后将培养皿用

7、灭菌的纸包好，倒置于恒温的培养箱中，温度309,时间24ho同理，以达克宁药物作为对照的也照此方法处理。24h后观察其效果。毕业论文;2;结果毕业论文通过观察四次实验的结果可以看岀，当蟾酥的药液浓度为12mg/ml时,蟾酥对青霉、曲霉、根霉三种真菌的抑制作用并不明显，几乎对其生长没有抑制作用，因此又将蟾酥药液的浓度提高到20mg/ml,进一步进行验证实验，结果表明：当浓度为20mg/ml时，对三种真菌的生长仍没有明显的抑制作用。通过四次反复的验证都没有发现蟾酥对三种真菌有抑制作用。毕业论文;3;讨论毕业论文；真菌的细胞壁的主要成分为壳多糖，它是N-乙酰糖分子以p-1.4糖甘键连接而成的多

8、聚糖，由此推测，蟾酥与真菌细胞壁可能不发生作用，不能破坏真菌细胞的细胞壁，由于细胞壁的保护，其他的成分也就无法进入细胞发生反应，真菌由此保护了自己的正常生长。毕业论文;蟾酥不能透过细胞壁进入细胞膜，在蟾酥的成分中含有另一类物质，蟾毒配基B和蟾酥毒素，这类物质是胆固醇的类似物，属于肽类毒素，而肽类毒素的基本上是双组分结构，即一个效应链（A链），另一个结合链（B链），只有A链具有毒性，B链的作用是与膜上的受体结合使A链进入细胞内部，单一的A链和B链都没有活性。蟾酥的这一成分要想发挥作用就必须先实现B链与膜上受体的结合，蟾酥对细菌的破坏作用就是因为蟾酥破坏细菌的细胞壁后，肽类毒素的B链可以和细

9、胞膜的主要成分磷脂结合，使细菌的细胞膜受到破坏而破裂，加速了细菌的死亡。但对于真菌来说，蟾酥不能破坏真菌的细胞壁，有了细胞壁的阻隔，蟾酥的肽类毒素的成分也就失去了破坏作用。毕业论文;蟾酥对真菌的抑菌效果低，作用不明显可能是上述两个方面的结果导致的，也可能存在着其他的原因，有待于进一步研究证实。毕业论文