百合多糖提取及成分研究

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1、百合多糖提取及成分研究摘要:采用水提醇沉法提取百合(Bu1bus1i11i)中的多糖成分,Sevage法除蛋白质,凝胶色谱法进行多糖纯化,制备3—甲基一1—苯基一2—毗11坐咻酮(PMP)衍生物进行高效液相色谱分析。结果表明,百合多糖由鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖、木糖、半乳糖5种单糖组成,其含量分别为4・82%、12.79%、47・02%、13・01%、22・36%。关键词:百合(Bu1bus1i1ii);多糖;提取;成分分析中图分类号:R284.2文献标识码:A文章编号:0439-8114(2012)15-3298-02ExtractionandCom

2、positionAnalysisofPolysaccharidesinBu1bus1i1iiZHANGGuo—qiang,YANGZheng—ping(Schoo1ofBiotechnologyandFood,AnyangInstituteofTechno1ogy,Anyang455000,Henan,China)Abstract:Polysaccharidewasextractedandiso1atedfromBulbus1i1iibywaterextracting—alcoholprecipitatingmethodandpurifiedbySev

3、agemethodandge1permeationchromatography・ThecomponentsofthepolysaccharidewereidentifiedandquantifiedbyHPLCofthePMPderivatives・Theresu1tsshowedthatthemainmonosaccharidescontainedinB.liliipolysaccharidewererhamnose,arabinose,glucose,xyloseandgalactose,withcontentof4.82%,12.79%,47.0

4、2%,13・01%and22.36%,respective1y・Keywords:Bulbus1i1ii;polysaccharide;extraction;componentanalysis百合(Buibuslilii)是百合科百合属多年生草本球根植物[1],其味甘、微苦,具有补益心肺、调理脾胃、清热止痰之功效,对体虚肺弱、慢性支气管炎、S3肺气肿、肺结核及神经衰弱、失眠、高血压、胃溃疡等有一定疗效[2],是传统的药食同源植物。现代医学研究发现百合多糖具有较为广泛的药理作用,包括抗氧化、抗肿瘤、降血糖与免疫调节等[3—5]。本研究对百合多糖的提取工艺

5、及主要成分进行初步分析,以期为百合的综合利用提供一定的理论参考。1材料与方法1・1材料与仪器百合购于河南省安阳市药材批发市场;乙醇、丙酮、三氟乙酸、3—甲基一1一苯基一2—毗哇咻酮(PMP)、氢氧化钠、无水醋酸肝、氯仿等试剂为分析纯;标准单糖鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、葡萄糖、半乳糖为色谱纯。仪器包括安捷伦1260高效液相色谱仪(配有紫外及蒸发光检测器,C18柱)、电子分析天平、ALPHAL一2真空冷冻干燥机、真空干燥箱、RE52-3旋转蒸发器、TDZ5-WS低速离心机、电子恒温水浴锅、CS101-1C型干燥箱、BAZ-100自动分步收集器、DHL-A电脑

6、恒流泵等。1・2试验方法1.2.1百合多糖的提取①百合多糖粗品的制备。称百合样品5.000g,粉碎后加入10倍体积的蒸馆水,调节溶液pH至11,沸水浴提取2h,重复4次,过滤合并滤液,于60匸真空浓缩至约50mL,以体积分数95%的乙醇溶液沉淀,过滤,滤渣加5倍体积的丙酮一石油瞇混合液(体积比1:1),于60°C水浴浸提1h,过滤,得沉淀,60°C真空干燥1h,再于105£干燥箱中烘干,即得灰白色的百合多糖粗品。②脱蛋白多糖的制备。取多糖粗品,加蒸馆水充分溶解,用Sevage法脱蛋白,离心,取上清液对流水透析48h,再对蒸馆水透析24h,无水乙醇沉淀,

7、抽滤得沉淀,真空冷冻干燥,即得脱蛋白多糖。③多糖精品的制备。取适量脱蛋白的多糖,加蒸馄水充分溶解,上SephadexG-75凝胶色谱柱,用蒸馆水洗脱,4.5mL/管自动分步收集,苯酚一硫酸法检测,合并主峰收集管液,60£真空浓缩,冷冻干燥得精制的百合多糖。1.2.2多糖成分的分析①多糖水解。称取10mg精制的百合多糖样品于安咅瓦瓶中,加入2mL2mo1/L的三氟乙酸[6],封管后置于120£干燥箱中水解,2h后取出冷却,离心后取上清液,真空浓缩至干,得单糖样品置于干燥箱中备用。②单糖的衍生化。称取鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、葡萄糖、半乳糖标准品各10mg,

8、分别加入单糖2倍物质的量的PMP,调pH至11,充分振荡溶解,于60°C水浴反应30min,取

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