四类微生物的分离、培养及鉴定

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1、四类微生物的分离、培养及鉴定环境与牛物工程学院坏科0701班摘要:本实验介绍了细菌、放线菌、每菌、酵母菌常用培养基的配制方法,并阐述了其分离和培养过程。观察和比较分离出来的细菌以及放线菌、酵母菌及霉菌的菌落特征,通过染色法对各类细菌进行鉴定。将从土壤屮分离出的儿种不同微生物,分别接种于不同培养基上,于35°C培养24h、48h后,观察记录其牛长情况。该研究对混合感染时不同培养基的组合与使丿IJ,病原微生物的准确分离与鉴定,以及临床细菌口常检验工作均有一定的指导意义。关键词:微主物,菌落,分离,培养,鉴定Abstract:Thisexperi

2、mentisintroduced,mould,bacteria,actinomycescommon1ypreparationmethodsofmediumyeast,andexpoundsitsseparationandtrainingprocess・Observeandcomparetheisolatedbacteriaandactinomyccs,yeastandmouldcolonyfeature,dyeingmethodforallkindsofbacteriabyidentification.Isolatedfromthesoil

3、microorganisms,severaldifferentrespectivelyindifferentmedia,vaccinationsin35ch,48htrainingandobservedafteritsgrowthrecord・Thestudyofmixedinfectionwiththecombinationofdifferentmedia,pathogenicmicroorganismsaccurateandseparating,andclinicalbacteriadai1yinspectionworkhascerta

4、indirectivesignificance.Keywords:Microbes,Bacteria,Isolation,Cuiture,Tdentification引言为了深入了解常用选择性培养基对不同微牛物的抑制或筛选能力,为了充分利用各培养基的特殊作川,从而给院内感染监测及临床微生物检验工作者选择利川各培养基及其组合时提供有益参考,我们把从土壤屮分离出的儿种微生物分別接种于常用培养棊上,对比研究了它们的不同生长特点。1仪器与试剂1・1仪器:天平、高压蒸汽灭菌锅、移液管、试管、烧杯、量筒、锥形瓶、培养皿、pH试纸、棉花、纱布、牛皮纸、线

5、绳、报纸,革兰氏染色液,载玻片,显微镜、盖玻片、吸水纸,接种针。1.2试剂:牛肉膏、蛋白月东、葡萄糖、可溶性淀粉、琼脂、黄豆芽、NaCKKNO3、K2HIO、MgS0»>FeSO】、KH2PO4、MgS04*7H20sNaOH溶液(lmol/L),革兰氏染色液,菌源(选定采土地点后,铲去表涂层2〜3cm,取3〜10cm深层土壤10g,酵母菌分离采用而曲),肉膏蛋白腺培养基、马丁氏培养基、高氏合成一号培养基、豆芽汁匍萄糖培养基,无菌水,无菌培养皿、无菌移液管、玻璃涂棒、1%重饼酸钾等。大肠杆菌、枯草芽砲杆菌、金黄色葡萄球菌。2实验方法2.1肉

6、骨蛋H腺培养基的配制(1)称量及溶化:分别称取蛋白腺和NaCl的所需量,置于烧杯中,加入所需水量的2/3左右的蒸绸水;用玻璃棒挑収牛肉膏置于另一小烧杯中,进行称量。然后加入少量蒸绸水于小烧杯中,加热融化,倒入上述烧杯中。(2)定容:将溶液倒入量筒中,补充水量至所需体积。(3)加琼脂:将所需暈的琼脂先放到三也瓶屮,再将定容后的培养基倒入三如瓶屮。(4)调pH:待溶液冷至室温时,用Imol/LNaOH溶液调pH至7.2~7.4。(5)分装、加塞、包扎。(6)高压蒸汽灭菌20分钟。待培养基冷却至60°C左右时,倒入已灭菌的培养皿中,等到培养基完全

7、凝固后,放入冰箱中保存。2.2高氏一号培养基的配制(1)称量及溶化:先称量对溶性淀粉,置于一小烧杯中,加入少量冷水,将淀粉调成糊状,加热,使淀粉完全融化。再分别称量KNO:,、NaCl.K2HPOt>MgSO.,依次逐一加入水中溶解。(2)定容:将溶液倒入量筒屮,补充水量至所需体积。(3)加琼脂:将所需量的琼脂先放到三和瓶屮,再将定容后的培养皐倒入三介瓶中。(4)调pH:待溶液冷至室温时,用Imol/lLNaOH溶液调pH至7.2〜7.4。(5)分装、加塞、包扎。(6)高压熬汽灭菌20分钟。待培养基冷却至60°C左右时,倒入已火菌的培养」I

8、IL屮,等到培养基完全凝固后,放入冰箱中保存。2.3马丁氏培养基的配制(1)称量:称取培养基各成分的所需量。(2)溶化:在烧杯屮加入约2/3所需水量,然后依次逐一加入并溶化培养基

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