公共卫生从业人员健康检查

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1、备案号:中华人民共和国国家标准GB/Txxxx——xxxx公共场所从业人员预防性健康检查—沙门菌、志贺菌检验Preventivehealthexaminationofpublicplacesrelatedemployees—MicrobiologicalexaminationofSalmonella&Shigella（征求意见稿）（本稿完成日期：2011年10月17日）XXXX・XX・XX发布1.1.1.1XXXX・XX・XXXXX发布目次前言II1范围12规范性引用文件13定义、术语和缩略语14原理25设备和

2、材料26培养慕和试剂27检验程序38操作步骤4附录A（规范性附录）沙门菌、志贺菌荧光PCR检测体系及注意事项7附录B（规范性附录）标本混合方案（Pooling混合）8根据《公共场所卫牛管理条例》、《中华人民共和国传染病防治法》、《中华人民共和国食品女全法》等相关的法律法规制定本标准。本标准的附录A和附录B为规范性附录。本标准由卫生部环境卫生标准专业委员会提出。本标准由中华人民共和国卫牛部批准。本标准起草单位：深圳市疾病预防控制中心、广州市疾病预防控制中心、中国疾病预防控制中心传染病预防控制所、河南省疾病预防控制

3、中心、浙江省疾病预防控制中心、广西壮族口治区疾病预防控制中心、上海市疾病预防控制中心、深圳市主科源技术有限公司等。本标准主要起草人：程锦泉、庖庆华、石晓路、王鸣、阚飙、夏胜利、张政、王鸣柳、陈嫩、吴新伟、窦文祥等。本标准系首次发布的国家推荐标准。公共场所从业人员预防性健康检查一沙门菌、志贺菌检验Preventivehealthexaminationofpublicplacesrelatedemployees—MicrobiologicalexaminationofSalmonella&Shigella1范围本标

4、准规定了肛拭子粪便标本中沙门菌和志贺菌的检验方法。本标准适用于公共场所从业人员预防性從康检查项目中，公共场所从业人员肛拭子粪便标本的沙门菌和志贺菌检验。其它相关行业从业人员，如从事食品牛产和加工（食品牛产）人员、食品流通和餐饮服务（食品经营）人员，饮用水主产、经营人员，医疗卫牛用品生产、经营人员以及化妆品生产人员等。预防性健康检查项目中，从业人员肛拭子粪便标木的沙门菌和志贺菌检验可参照木标准执行。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注H期的引用文件，仅注H期的版本适用于本文件。凡是不注H期

5、的引用文件，GB4789.4-2010GB/T4789.28-2003GB/T20944.1-2007WS280-2008WS287-2008WS/T230-2002其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。食阳安全国家标准食品微生物学检验沙门菌检验食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂纺织品抗菌性能的评价第1部分：琼脂平川L扩散法伤寒和副伤寒诊断标准细菌性和阿米巴性痢疾诊断标准临床诊断中聚合酶链反应（PCR）技术的应用3定义、术语和缩略语下列定义、术语和缩略语适用于木标准。3.1定义和术语3.1.1从业人

6、员健康检查指对公共场所从业人员，从事食品生产和加工（食品生产）人员、食品流通和餐饮服务（食品经营）人员，饮用水主产、经营人员，医疗卫牛用品主产、经营人员以及化妆品生产人员等。按国家有关卫牛法律、法规规定所进行的从业前、从业期间的预防性健康检查。3.1.2实时荧光PCRReal-timePCR实时荧光聚合酶链反应3.1.3Ct值Cyclethreshold每个反应管内的荧光信号达到设定的阈值时，所经历的循环数。3.2缩略语3.21UNG酶UracilDNAglycosylase尿嗨睫DNA糖基酶3.2.2Taq酶

7、TaqDNApolymeraseTaqDNA聚合酶3.2.3FAM6-carboxyfluorescein6-竣基荧光素3.2.4HEXHexachlorofluorescein六氯-6-甲基荧光素4原理4.1筛査试验依据核酸体外扩增基本原理，针对沙门菌和志贺菌特异靶基因序列设计引物、荧光标记探针，在PCR反应过程中，当荧光信号达到并超过所设定的阈值(Threshold-value)时，利用荧光信号强度与PCR产物量的正相关关系，即可对PCR结果进行分析和判定。对标本的模板DNA进行实时荧光PCR扩增，根据其C

8、t值及扩增曲线进行标本结果报告，当PCR结果呈阴性时可直接报告阴性结果；当PCR结果星阳性时，进一步对阳性标本做确诊实验。从而实现对从业人员健廉检查肛拭子粪便标本中的沙门菌和志贺菌的快速筛查。4.2确诊试验PCR结果筛查试验为阳性时，参照WS280-2008和WS287-2008标准进行细菌培养和鉴定，包括牛化和血淸学鉴定，当鉴定结果为阳性时报告阳性，当鉴定结果为阴性时报告阴性。5设备