2018版高中生物第2章细胞工程2.2动物细胞工程2.2.2动物细胞融合与单克鹿体学案新人教版选修

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1、2.2.2　动物细胞融合与单克隆抗体1．掌握动物细胞融合技术及应用。(重点)2．简述单克隆抗体的制备。(重、难点)动物细胞融合1．概念：动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。2．原理：细胞膜的流动性。3．诱导融合的三种方法(1)物理法：例如电激等。(2)化学法：例如聚乙二醇。(3)生物法：例如灭活的病毒。4．过程：不同DNA的两个细胞细胞膜融合―→细胞核融合→有丝分裂→两个完整的杂交细胞。5．意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。探讨：动物细胞融合与植物原生质体融合所依据的原理是什么？提示：细胞膜的流动性。探讨：动物细胞完成

2、融合的标志是什么？提示：动物细胞融合时，先是细胞膜发生融合，然后是细胞核的融合。当两个细胞核融合后形成具有单核的杂交细胞，则标志着动物细胞融合的完成。探讨：比较动物细胞融合与植物体细胞杂交所用的促融方法的异同。提示：二者都可以采用离心、振动、电激等物理方法，或者使用化学试剂聚乙二醇进行促融，除上述方法外，动物细胞融合还可以采用灭活的病毒进行促融。1．操作步骤细胞准备↓细胞融合：加促融因子于待融合的细胞之中，诱导融合↓杂种细胞选择：利用选择性培养基等，使亲本细胞死亡，而让杂种细胞存活↓杂种细胞克隆：对选出的杂种细胞进行克隆，经过培养，就能获得所需要的细胞2．过程分析细胞融合

3、的过程包括细胞膜融合、细胞质融合和细胞核融合，其中细胞膜融合是细胞融合的先导，在细胞膜融合中体现出细胞膜具有一定的流动性。1．动物细胞融合和植物原生质体融合相比较，特殊性表现在(　　)A．融合的原因　　　　　B．融合的优点C．融合的诱导手段D．融合的过程【解析】　动物细胞融合和植物原生质体融合都是为了将不同物种的优良性状集于一体，过程都是先膜融合再质融合，最后核融合，即融合的过程相同；动物细胞融合可以用灭活的病毒诱导，而植物原生质体融合不能用灭活的病毒诱导。【答案】　C2．如图所示为细胞融合技术的一些过程：(1)从A、B细胞到C细胞的过程中，必须用________处理。(

4、2)若A、B细胞为植物细胞，那么这样的细胞已经用酶降解脱掉了________，这种酶可能是________酶，由此生成的A和B细胞称为________。(3)若A细胞为骨髓瘤细胞，B细胞为B淋巴细胞，那么D细胞称为________细胞，由D细胞连续分裂产生大量细胞的过程称为________过程。这种细胞既能无限繁殖，又能产生________。(4)若A为人细胞，B为鼠细胞，并分别用红、绿荧光染料标记细胞膜上的蛋白质，在形成C细胞时，细胞一半发红色荧光，一半发绿色荧光。到D细胞阶段，两种颜色的荧光均匀分布，请解释原因____________________________。

5、【解析】　此题是对植物体细胞杂交、动物细胞融合以及细胞膜的特性比较全面的考查。植物细胞有细胞壁，阻碍植物体细胞的杂交。因此，植物体细胞杂交的第一步是去掉细胞壁，分离出有活力的原生质体。细胞壁成分主要为纤维素和果胶，所以要用纤维素酶和果胶酶分解植物细胞的细胞壁。第二步就是让不同植物体细胞的原生质体融合，融合必须通过一定的技术手段进行人工诱导。单克隆抗体制备过程需得到化学性质单一、特异性强的抗体。科学家发现，在动物发生免疫过程中，每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体，要想获得大量的单一抗体，必须用单个B淋巴细胞进行克隆，形成细胞群。但在体外培养条件下，一个B淋巴细胞不可能无限

6、增殖，这就需要B淋巴细胞与骨髓瘤细胞在灭活的仙台病毒或聚乙二醇的诱导下融合，再筛选出杂交瘤细胞。由于杂交瘤细胞继承了双亲细胞的遗传物质，既能分泌特异性抗体，又能大量繁殖。最后考查了细胞膜的结构特点：具有一定的流动性。【答案】　(1)诱导剂　(2)细胞壁　纤维素酶和果胶　原生质体　(3)杂交瘤　克隆　特异性抗体　(4)细胞膜上的蛋白质是可以运动的单克隆抗体1．传统抗体的制备(1)方法(2)缺点：产量低、纯度低、特异性差。2．单克隆抗体的制备(2)解决思路：将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合为杂交瘤细胞。(3)制备过程：制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原蛋

7、白，然后从小鼠脾脏细胞内获得相应的B淋巴细胞获得杂交瘤细胞克隆化培养和抗体检测　将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖　提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠腹水中提取(4)单克隆抗体的特点：特异性强、灵敏度高，并可大量制备。探讨：仔细观察教材P53图224，探讨下列问题：(1)制备单克隆抗体过程中的几种细胞有何特点？提示：①免疫的B淋巴细胞：能产生单一抗体，但不能无限增殖。②骨髓瘤细胞：能无限增殖，不能产生抗体。③杂交瘤细胞：既能产生特定的抗体，又能在组织培养条件下进行无限增殖。(2)单克隆抗体制备过程中有两次筛选，其目的