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《鱼类微核在水质污染中的监测研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、编号学士学位论文鱼类微核在水质污染中的监测研学生姓名:_学号:系部:专业:生物科学年级:2010-03班指导教师:完成日期:年5月12日中文摘要本文利用鱼体外周围细胞微核技术,监测污水养鱼鱼体中的污染情况,测定不同浓度重金属(铜)溶液对血的外周血红细胞的细胞微核千分率(MCN%。)的影响。结果表明,铜比对照组(水)在96和120小时时微核率降低,差异显著(p〈0・05)。甘草加铜组比铜组微核率在96和120小时降低比较明显,差异极显著(p〈0・01)o车前草加铜组比铜组在96和120小时微核率降低,差异极显著
2、(p〈0.05)。说明:甘草和车前草具有一定的解毒作用,保护作用。关键词:鲫鱼;外周血细胞;红细胞微核;核异常;水污染屮文摘要1目录II引言11材料与方法21.1实验动物21・2实验试剂与方法21.2.1实验试剂21.2.2实验仪器21・3实验方法21.3.1重金属污染21.3.2鲫鱼血标本的釆集和制备21.3.3镜检和阅片32结果与分析32.1污染对鲫鱼红细胞形态的影响32.2鲫鱼外周血红细胞微核率的统计43讨论74结论7参考文献8致谢9引言外源化合物进入高等动物体后,通过血液参与机体循环输送到靶器官,可与
3、血液中的细胞,功能蛋片等发生作用。因此,血液指标被广泛地用來评价鱼类的健康状况,营养状况及对环境的适应能力,是良好的生理,病理和毒理学指标n役鱼类外周血细胞变化(如数量,形态,遗传特性等)是机体在环境胁迫下敏感的特征性指标。微核的形成体现了环境的污染状况,常常以微核出现的频率计算污染指数,测定环境的污染状况3)。微核是曲染色体,染色单体的无着丝粒断片或纺锤体损伤后造成滞后染色体在细胞分裂中未包被于主核中形成,往往是细胞经辐射或化学药物的作用而产生的,微核的形成是细胞受遗传毒物作用后的-•种遗传学终点。鲫鱼是一
4、种底栖鱼类,对污染的水环境比较敏感,鱼吸收了水中致突变物之后,其外周血红细胞微核率明显升高,口J以用鱼类红细胞微核率指示水环境污染情况,评价水体致突变性污染。我们从2014年的4月8号到14号连续五次对四组实验组的鲫鱼进行微核试验,木研究选择相对无污染的清水(对照组)和污染较严重铜,铜+甘草,铜+车前草实验组,选择鲫鱼为研究对象,比较四组实验组鲫鱼外周血细胞数量,红细胞微核和核异常等指标的变化,旨在探索低浓度污染条件下鱼类外周血细胞形态及数量的变化规律和趋势,为鱼类血液学和遗传毒理学研究以及水污染的生物监测提
5、供参考依据。因此,采用微核试验技术在环境污染中的应用方法⑸,对不同浓度重金属(铜)溶液对细胞产生微核的情况进行评估,以此來估计重金属在水污染中的危害。鱼吸收了水中致突变物之后,其外周血红细胞微核率明显升高,可以用鱼的红细胞微核率指示水污染状况,评价水体致突变性污染⑹。因此,对水污染进行迅速而有效的监测一一直是人们关注的热点。然而,化学监测都是带着已确定的指标进行的,这样就很难发现新的环境诱变物;同时,仅用污染物的浓度值來反映污染与危害程度也是不全面的,因为某些污染物在环境中含量极微并不等于毒性极微,反而亦然。
6、而微核实验就克服了这一弊端微核测定法是在染色体分析方法的基础上建立和日益受到重视的细胞遗传学测定法,采用微核试验对水污染进行监测是理化检测和其他生物监测的一个重要补充,可以根据微核率的高低來判断被监测水质的污染程度。1材料与方法1.1实验动物鲫鱼,购于喀什环疆农贸市场,室温驯养在实验室,用小型氧气泵给其供氧,一般是体长15〜20cm左右的活色,平均体长(15.2±1.3)cm,平均体重(124.3±29.4)g;1・2实验试剂与方法1.2.1实验试剂香柏油,二甲苯,磷酸盐缓冲液(17.8g磷酸氧二钠加和15.
7、6g磷酸氢钠各加1000ml水按18:7的比例进行混合,配0.2M),75%乙醇,甲醇,蒸憾水,车前草,甘草。吉姆萨染液(称取吉姆萨粉0.5g,甘油33ml,甲醇33ml,先将吉姆萨粉研细,再逐滴加入廿油,继续研磨,最后加入甲醇,在56°C放置24h后即可使用)。1.2.2实验仪器鱼缸,氧气泵,解剖器,解剖盘,量筒,PH试纸,天秤,显微镜,载玻片,盖玻片。1.3实验方法1.3.1重金属污染准备四个水槽,选取健康,新鲜冃大小均一的活鲫鱼80尾,分四组进行饲养,每组20尾,分别标为1,2,3,4号连续处理48h,
8、72h,96h,120h,168h分别测定鲫鱼外周血红细胞微核率;根据《屮华人民共和国渔业水质标准》规定,渔业水质标准中Ci?W0.01mg/L,因此本实验选用的Ci?浓度设为0.02mg/Lo将鲫鱼随机分为四组,每组20条,置于30L的塑料泡沫箱屮饲养,一组为清水对照;实验组中一组按比例添加CuSOj使Cf浓度为0.02mg/L;另一组同样按比例添加CuSO4使C屮浓度为0.02mg/L,同时添加