叶绿体实验论文

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1、青菜、羊蹄叶绿体的提取和希尔反应对比性研究冷大亮（华东师范大学生命科学学院，上海闵行200241）摘要:关键词：前吕：青菜羊蹄叶绿体希尔反应差速离心1材料与方法：1.1材料：青菜、羊蹄叶1.2方法：1.2.1叶绿体的提取分别取5g新鲜青菜叶片和羊蹄叶片，剪碎（除去粗人的叶脉），加入l（）ml预冷的提取介质和少许石英砂，在冰浴中迅速研磨成浆，补加5ml提取介质，将匀浆过滤，收集10ml匀浆为离心管中。室温下800mip离心3min,离心后取上清在室温下2000rmp离心8min,弃上清。在离心管中，用6ml提取介质悬浮沉淀，制成沉淀悬液，即为叶绿体提取液，置冰浴中备川。取2ml叶绿休

2、提取液于一预冷的试管屮，加入10ml捉取介质，得稀释后的叶绿体悬液。1.2.2叶绿体希尔反应活性的测定取5支试管，分别编号1、2、3、4、5,然后按下表所示加入各试剂盒进疔预处理：管号提取介质（ml）叶绿休稀释液（ml）预处理2,6-DCIP12.522.52.5（青菜）1滴32.52.5（青菜）沸水浴5niin1滴42.52.5（青菜）l%TritonX-1005滴作用5min1滴52.52.5（H选材料）1滴当第2、3、4、5管中加入2,6■二氯靛酚后立即摇匀，倒入相应的比色杯中，迅速测定620nm处的OD值，此时代表作用时间为0时的OD值。然后将比色杯迸于日光灯卜照光，每隔3

3、min快速测下OD值，连续进行光照和读数，直至OD值变化接近稳定为止。1.2.3叶绿体大小的测定运用显微测微尺分别测虽:青菜和简蒿的叶绿体的大小。2结果与分析：2.1叶绿体希尔反应活性的测定0D值Omin3min6min9min12min15min21.9471.4780.9230.8220.8140.81932.172.0962.0942.0862.0622.04641.7521.6841.6481.6161.5911.571叶绿体希尔反应活性变化2.5-3号管25号管1.54弓管1■———一0.501112号管•1Omin3min6min9min12min15min51.682

4、1.6681.6591.6571.641.6352.2叶绿体人小的测左测量次数青菜羊蹄长度(um)宽度(um)长度(um)宽度(um)16.33.527.02.537.53.84&03.356.03.5平均值4讨论参考文献:管号提取介质（ml）叶绿体稀释液（ml）预处理2,6-DCIP12.522.52.5（青菜）1滴32.52.5（青菜）沸水浴5min1滴42.52.5（青菜）l%TritonX-1005滴作用5minI滴52.52.5（羊蹄）1滴巴天酸模长刺酸模长叶酸模齿果酸模刺酸模单瘤酸模单瘤酸模（原变种）短齿单瘤酸模钝叶酸模黑龙江酸模戟叶酸模毛脉酸模尼泊尔酸模尼泊尔酸模(原

5、变种)牛耳酸模披针叶酸模疏花酸模水牛•酸模酸模酸模属天山酸模网果酸模乌克工酸模狭叶酸模小果酸模小酸模羊蹄永宁酸模窄叶酸模直根酸模中亚酸模皱叶酸模紫茎酸模羊蹄RadixRumicisJaponici別名牛舌头、土大黄、野大黄。來源为蓼科植物羊蹄RumexjaponicusHoutt.的根。植物形态多年生草本，高可达lm0茎直立。基生叶长椭圆形，长10〜25cm,宽4〜10cm,基部心形，边缘具波状皱折，叶柄长；茎生叶较小，基部楔形，托叶勒筒状，膜质。花序为狭长的圆锥状：花两性，花被片6,2轮，果时内轮花被片增人，卵状心形，边缘冇不整齐的齿，全部主有瘤状突起；雄蕊6；柱头3。瘦果宽卵形

6、，具3棱，黑褐色，有光泽。花期4〜5月，果期5〜6月。化学成分含人黄素(emodin)、大黄酚(chrysophanol)>大黄索卩醯(physcio-n)、酸模索(nepodin)>舔质等。【化学成份】羊蹄叶含榊皮貳(qrercitrin)[1]0【药理作用】羊蹄叶煎剂在试管内对炭疽植杆菌、白喉杆菌冇明显抑制作用，对金黄色葡萄球菌、乙型链球菌、人肠杆菌、伤寒杆菌和痢疾杆菌等也侑一•定抗菌作用［1］。尼泊羊蹄叶的水和乙醇提取物能対抗组胺対离体豚鼠圆肠，乙酰胆•碱及氯化氨甲酰胆•碱对离体蛙腹直肌的兴奋作用。以狗血压为指标，尼泊尔羊蹄叶的水提取物能对抗组胺和拟胆碱药及缓激肽对血压的影响

7、，而乙醇提取物仅能对抗组胺和拟胆碱药对血压的影响，表明两者有抗组胺和抗碱作用。此外水提取物能使离体兔心收缩力减弱，心率减慢，冠脉血流最减少⑵。时间0D值Omin3min6min9min12min15min21.9471.4780.9230.8220.8140.81932.172.0962.0942.0862.0622.04641.7521.6841.6481.6161.5911.57151.6821.6681.6591.6571.641.635□I•绿体希尔反应活性变