关于鉴定抗根结线虫研究方法的综述

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1、关于鉴定抗根结线虫研究方法的综述摘要：根结线虫是世界上对植物破坏最大的病原体之一，鉴定和筛选抗根结线虫的植株具有重要意义。本文概述接种源的获取方法及其对接种线虫的影响和鉴定方式，鉴定方式包括•一般接种、高持续接种和组织培养基内接种。关键词：根结线虫;接种;组织培养Reviewonthewayofselectingplantstoresistingroot-knotnematodesQiaoFeng,WangJingmin,LiJinghuaAbstract:Root-knotnematodes(RKN)we

2、reoneofthepathogensdamagedtoplantsmostlyintheworld.ItwasimportanttoselecttheplantsresistingRKN.ThearticlemainlytalkedaboutthewaysofgettingRKNandhowtothewayseffectedtheinoculation,howtoselectingtheresistanceplants,includingthegeneralinoculation,thehighanddu

3、rableinoculation,theinoculationintheplantmedium.Keywords:root-knotnematodes;inoculation;tissueculture根结线虫(Meloidog)化spp.)能够侵染热带和温带植物的根系，是世界上对植物破坏最大的病原体Z—叭目前，药剂防治效果都不是很理想，而且一些高毒有效的杀线剂已被禁止使用。生产屮可以通过栽培持续高抗的品种，以达到防治RKN的目的。因此，需要一种简便、快速的抗性品种的鉴定筛选方法，尤其是木本植物。本文介绍接

4、种源的获取方式及其对抗性筛选的影响和最常用的鉴定方式，如一般接种、高持续接种、杆插和组培获得幼苗后接种、组织培养基内接种，以及适用于木本植物的发根农杆菌介导的组织培养接种，并指出抗线虫植株鉴定筛选的趋势是向快速、简便的分子标记方向发展。1接种源的获取方法及其对接种RKN的影响一般RKN的接种源分为卵块、卵、二龄幼虫(Second-stagejuveniles,J2),由于卵块的收集需要一定长的时间，而且每个卵块屮卵的数量不一致，不能够形成一定的接种标准，其次，接种时，由于是卵块，不能够较均匀的分散在植物根系

5、的周围，最后，其他病原体和根腐病菌可通过卵块侵染植物，引起病害。J?从获得到接种的时间必须要短，以防止血死亡,侵染能力下降，另外还要保证J2比较适宜的生活条件，防止J2死亡或侵染率下降。相对而言，卵的获得较方便快速，可以通过NaClO溶液冲洗的方法⑵获得，同时，卵的表面被消毒,不会携带任何病原体，接种时，可以制定一定浓度的悬浮液，做到接种量上的统一，并且可以均匀的侵染植物根系。接种源不同的获取方法对RKN的侵染都有一定的影响。根据Hussey1973的报道，用离心⑶或机械粉碎获得卵的方法对其孵化和侵染都有一

6、定的破坏作用，如卵的孵化率降低和卵的数量减少，在潮湿环境中，孵化的RKN侵染率更低。用1.05%NaClO溶液冲洗白获得卵的方法对其孵化和侵染影响都比较小，表明用1.05%NaClO溶液冲洗收集到的卵作为接种源最为合适。2鉴定方式的研究2.1—般的接种方法在鉴定筛选抗性植株屮，常用含有一定数量的J2悬浮液进行接种叫通过控制每株植株所用b悬浮液体积控制RKN的接种量。具体操作为用移液枪在距离植物茎1cm左右处，注射到2cm深的小洞中，到7d后或30d左右观察植株根系的变化，即根结的数量、根结指数,或到30d左

7、右测定每克根中卵、J?或雌虫数量(线虫的数量可以通过酸性品红染色的方法进行计数)，从而确定植株的抗性级别。木本植物中，常用根结指数的分级标准[41:0=0%;1=1%-10%；2=11%-30%；3=31%-70%；4=71%-90%；5>90%。该方法简便、快速，接种量虽然是标准统一，但是在筛选抗性植株中不容易区分高抗的植株。2.2高持续接种该接种方法能够弥补一般接种方法无法明显区分高抗植株的缺陷，可以连续大量的对筛选植株进行接种，获得的抗性植株较准确。具体操作⑸：在接种前，培育大量感病的番茄苗,当番茄长

8、到5叶龄时，接500J2；两个月后，一部分去掉接种番茄的上部，把它的根和土壤整体移到需要鉴定植株的营养钵内，一段时间后，测定根结数等指标；另一部分，也去掉上部，从开始到测定抗性指标期间，每隔一段时间测定土壤中和帑茄根内的线虫和卵的数量,从而确定各个时期的接种量。3.3离体抗性鉴定及其改进2.3.1离体抗性鉴定由于木本植物的生根时间较长，如果用常规的繁殖方式，如绿枝打•插、硬枝打•插，一年中只能做2-3次，这些都严