(法医学优秀论文)过敏性休克和猝死的法医病理学诊断研究

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1、过皱性休克和猝死的法医病理学诊断研究摘要流行病学调查资料表明，随着工业化的发展，过敏性疾病的发病率明显增高，并正在快速增长，已经成为21lit纪严重影响人类健康的全球性疾病。因过敏反应而致的过敏性休克或猝死在临床医学及法医学鉴定屮也较为常见，据文献报道，国际上平均每年1000o000住院病人中发生致命性的过敏性休克有154例，在美国过敏性反应的死亡率高达3%。而且在法医学鉴定中因其他原因猝死者也常常被怀疑为过敏性休克死亡。因此过敏性休克猝死在法医学鉴定中占有很重耍的地位，据本教研室资料统计近年来涉及过敏性猝死的法医学鉴定占医疗纠纷法医学鉴定的10%左右。虽然过皱性疾病一

2、直是临床医学研究的热点，国内外学者就其发病机制、临床诊断和临床治疗做了大量研究。但在法医学实践中，过敏性猝死尸检时仅见猝死的一般征象而无特界性的病理形态学改变，法医学鉴定时要诊断过敏性休克死亡必须在排除口然性疾病、中毒及其它暴力性死亡原因的基础上，结合接触过敏原史、临床突发休克等症状才可诊断，因此给法医学鉴定带来很人困难。寻找一种客观、准确的过敏反应的诊断指标和方法便成为临床医学和法医学鉴定领域亟待解决的问题。因此，本研究利用豚鼠和小鼠制备过敏性猝死的动物模型，采用酶联免疫吸附试验、放射免疫法和免疫组化ABC法分别测主死后不同时间过敏性猝死豚鼠血清I妒、P物质含量及其在

3、肺组织内的免疫表达；采用原位杂交的方法检测小鼠过敏性休克后不同时间咽喉、肺、胃组织类胰蛋白酶II瓜NA、ECPmI矶A及P物质的表达。同时对115例免疫正常人血清和15例因过敏性休克死亡者采用荧光酶联免疫法（FE认）和免疫组织化学染色方法，分别测定血清类朕蛋门酶的含量和观察类朕蛋白酶、SP在相关组织中的免疫表达，以探讨SP与过皱性休克的关系及类胰蛋白酶、IgE、SP在过敏性休克死亡法医学诊断中的应用价值。第一部分过敏性休克豚鼠、小鼠体内IgE、类胰蛋白酶和SP的变化目的测定豚鼠过嫩性休克后血清I£E的含量和在帅组织中的免疫表达，并观察在死后不同时间血清I班含量的变化规律

4、；观察小鼠致敏前和过敏性休克后咽喉、肺和胃肠组织类胰蛋口酶mRNA和ECPmI州A的免疫表达：测定过敏性休克豚鼠血清P物质的含量并观察其在咽喉、肺和胃肠组织的免疫表达。方法分别采用多人混合血清和卵口蛋白（OVA）制备豚鼠和小鼠过敏性休克动物模型：采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定过敏性休克猝死的豚鼠血清IgE的含屋及在死后Oh、12h、24h、48h的变化规律，采用免疫组织化学方法观察I班在肺组织屮的表达；采用原位杂交的方法检测小鼠过敏性休克30min、lh、6h、24h咽喉、肺和胃组织类胰蛋门酶mIECPmIIIIA的表达；采用放射免疫法和免疫组化AEC法分别测定

5、和观察过敏性休克死亡豚鼠血清P物质的含量和在咽喉、肺及胃肠道组织中的免疫组化染袁同学哂医科人学博上学位论文色。结果（1）对照组豚鼠血清I庐V1U/m1,而且在死后12、24、48h血清IgE含量变化没有明显差异。过嫩性猝死豚鼠血清I班含量在死亡0、12、24、48h分别为13・25±4・32U/ml、15.87±4.66U/m1.12.31+3.13U/ml、14.61±5.46U/m1,与对照组相比其差异具有显著性意义（尸＜0・001）,过敏性猝死豚鼠死后0、12、24、48社血.清1gE含量相比无明显变化（各组Z间比较尸＞0.05）。实验组豚鼠肺小血管壁、血管周围和

6、肺泡壁可见I西棕黄色染色，对照组豚鼠相应组织染色阴性。采用BI・2000病理图像分析系统对帅组织I西免疫组化染色进行分析，与对照组相比，过敏性休克猝死各组豚鼠肺组织IgE平均密度显著增高（P＜0•001）,实验各组豚鼠肺组织IgE平均分布密度无显著性差异（尸＞0.05）。（2）过皱性休克猝死豚鼠血浆P物质浓度为131・01士18・93p〃p1,对照组血浆P物质浓度为87.70±7.60p〃“1,与对照组相比，猝死组血浆P物质浓度显著升高（P<0・01）。过敏性猝死豚鼠咽喉、肺、胃、结肠粘膜P物质免疫组化染色均呈阳性或强阳性，而对照组豚鼠相应组织屮的免疫组化染色呈阴性或弱

7、阳性（尸V0.01）。（3）致敏后小鼠咽喉、肺、胃组织类胰蛋白酶ml斟A、ECPmRNA平均光密度均高于正常对照组。各组织类胰蛋白酶mI矶A在致敏后30,达到高峰，随后逐渐下降，24h后仍高于正常水平。咽喉ECPm对妊于致敏后30，开始升高，并保持较高水平；肺纽织ECPmIIIIA在致敏后6h达到高峰；胃组织则在致敏后24h后达咼峰。结论4°C下冷藏，在死后48h内血清I醇含量无明显变化，血清I旺含量升高可以作为过敏性猝死法医学鉴定的客观依据。SP作为一种能够被神经系统和免疫系统共同识別的信号物质，参与了过敏性休克的发生和发展。类胰蛋白酶