HPLC+色谱柱选择与方法应用

《HPLC+色谱柱选择与方法应用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、HPLC色谱柱选择与方法开发概要固定相选择性色谱柱选择性的实际应用方法开发工具概要固定相选择性色谱柱选择性的实际应用方法开发工具选择性因素分离度Rs=(1/4)(a-1)N[k/1+k]a=选择性N=柱效k=容量因子选择性是最重要的因素!选择性因素通过改变以下一点或几点来改善选择性:温度流动相固定相pH温度通常缩短保留时间注意:柱温限制分析物温度限制流动相总则:选择在分析物pKa+/-2pH的缓冲液100%水相条件能改善极性保留(使用可在100%水相条件下使用的色谱柱)等度vs.梯度水相稳定性几乎没有变化色谱柱稳定固定相选择性疏水性极性选

2、择性芳香选择性疏水性固定相的保留强度通常用丁基苯的k值（容量因子）测量疏水性考虑:键合相特性(C18,C8,Phenyl,等)表面积(m2/g)键合相密度(umol/m2)疏水性C18phasesC8phase300ÅC18phase疏水性传统的色谱法使用C18好处:亚甲基选择性最佳的疏水选择性疏水性传统的色谱法使用C18缺点:较长的保留时间可能不保留极性化合物极性选择性下面两者之间的相互作用:固定相的极性基团分析物的极性官能团极性选择性提高极性选择性极性端基封尾基团极性镶嵌基团苯基固定相极性选择性色谱柱:Luna™5mC18(2)YMC

3、-Pack™ProC18Synergi™4mPolar-RP(醚连接的苯基柱)150x4.6mm流动相:75:25甲醇:水流速:1mL/min组分:1.Estrone2.Estradiol极性选择性Luna™C18(2)Synergi™Polar-RP™YMC-Pack™ProC181+21+212芳香选择性苯基基团利用芳香环的作用使用甲醇可增大选择性较少疏水保留通常C3+苯基基团芳香选择性色谱柱:Luna™5mC18(2)150x4.6mmLuna™5mPhenyl-Hexyl150x4.6mmSynergi™4mmPolar

4、-RP150x4.6mm流动相:50:50乙腈:20mM磷酸钾pH2.5流速:1.0mL/min组分:酸性的,芳香化合物1.Indoprofen2.Ethylparaben3.Naproxen4.Diflunisal5.Indomethacin6.Ibuprofen芳香选择性C18(2)Phenyl-HexylPolar-RPpH对选择性的影响pH1–12稳定性pH对选择性的影响pH对选择性的影响pH对选择性的影响固定相选择性C18相苯基相概要固定相选择性色谱柱选择性的实际应用方法开发工具Synergi™Hydro-RP极高的疏水性保留极性

5、端基封尾，100%水相稳定改善极性选择性Synergi™Hydro-RPSynergiHydro-RPVS.LunaC18(2)Luna™C18(2)已证实的可靠的C18色谱柱极低硅醇活性重现性高Synergi™Max-RP疏水性与C18相似–但这是C12比多数C18高25%的游离硅醇覆盖率碱性化合物获得更尖锐峰形Synergi™Max-RP中性pH下的碱性药物另一新的产品(Gemini™C18)Gemini™C18Luna™C8(2)&C5降低疏水保留缩短运行时间Luna™Phenyl-Hexyl疏水&芳香选择性低LC/MS流失可再生的&

6、pH稳定的苯基相Synergi™Fusion-RP改善极性选择性,同时减少运行时间极低LC/MS流失100%水相稳定Synergi™Fusion-RPmin02468101214mAU0100200300400500VWD1A,Wavelength=210nm(S:HPCHEM1DATASW1003TEST0034.D)min02468101214mAU050100150200250300350VWD1A,Wavelength=210nm(S:HPCHEM1DATASW1003FUSI0046.D)运行条件流动相:75:

7、2520mM磷酸钾pH2.5:乙腈流速:1.5ml/min柱温:室温检测:210nm样品:1.马来酸2.氯苯那敏3.曲普利啶4.苯海拉明SynergiFusion-RP480Å典型的C18极性保留时间更长疏水保留时间更短Synergi™Polar-RP极性&芳香保留100%水相稳定改善极性选择性Luna™SCX含胺和聚胺化合物咳嗽和感冒药物吗啡和滥用药物核苷，多肽和多肽图概要固定相选择性色谱柱选择性的实际应用方法开发工具方法开发工具疏水性级别固定相描述&色谱柱特点吸附剂特性&应用方法开发工具方法开发工具技术支持队伍问题解答指南Advanz

8、a讨论会产品讨论会方法开发讨论会总结固定相选择性考虑固定相和化合物的疏水性、极性和芳香性色谱柱选择性的实际应用方法开发工具谢谢TrademarksXterra®isaregist