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《SN∕T 5130-2019 疣粒稻鉴定方法》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、犐犆犛62.020.01犅16中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖/犜5130—2019疣粒稻鉴定方法犐犱犲狀狋犻犳犻犮犪狋犻狅狀狅犳犗狉狔狕犪犵狉犪狀狌犾犪狋犪犖犲犲狊犲狋犃狉狀.犲狓犎狅狅犽.犳.20190903发布20200301实施中华人民共和国海关总署发布犛犖/犜5130—2019前言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口。本标准起草单位:中国检验检疫科学研究院,中华人民共和国合肥海关,中华人民共和国重庆海关。本标准主要起草人:宋云、徐晗、宗凯、许瑾、孙涛、陈乃中。Ⅰ犛犖/犜5130—2019疣粒稻鉴定方法
2、1范围本标准规定了疣粒稻种质资源的检验鉴定方法。本标准适用于疣粒稻和其遗传材料的检测鉴定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T14072林木种质资源保存原则与方法SN/T1193基因检验实验室技术要求3术语、定义和缩略语3.1术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1.1小穗狊狆犻犽犲犾犲狋小穗是一个穗状花序,含1至多数小花,花生于颖状苞片内,成熟后又称谷粒。小花花被退化为鳞片状、刚毛状、鳞
3、被状。小穗再排成穗状、指状、总状或圆锥状花序。3.1.2稃犺狌狊犽又称谷壳,麸糠。小穗的一部分,由排列整齐、具有乳头状突起的表皮细胞,又分为:内稃,外稃。3.1.3叶舌犾犻犵狌犾犲叶片与叶鞘交界处内侧的膜状突起。禾本科植物水稻等具有叶舌。它可使叶片向外倾斜伸出,有利于接受阳光,同时由于它的生长部位,能防止昆虫、病菌、雨水等进入叶鞘筒内。叶舌是叶鞘的延长,其大小、形状和毛茸的有无,可作分类依据之一。禾本科的叶舌,常见的有撕裂状叶舌、二深裂叶舌、短叶舌、具睫毛叶舌和长叶舌等。3.1.4磷酸丙糖异构酶犜狉犻狅狊犲狆犺狅狊狆犺犪狋犲犻狊狅犿犲狉犪狊犲,犜犘犐磷酸丙糖异构酶是糖酵解过程中催
4、化二羟丙酮磷酸与3磷酸甘油醛之间可逆反应的一种异构酶,其催化功能高度保守,其基因分子结构在生物的长期进化中未发生大的改变,在水稻中是单拷贝、直系同源基因,可作为生物遗传分化和分子进化研究中的重要指标。3.2缩略语下列缩略语适用于本文件。1犛犖/犜5130—2019CTAB:cetyltrithylammoniumbromide,十六烷基三甲基溴化铵。PCR:polymerasechainreaction,聚合酶链式反应。DNA:deoxyribonuleicacid,脱氧核糖核酸。dNTP:deoxyribonucleosidetriphosphate,脱氧核苷酸三磷酸。Taq
5、酶:栖热水生菌DNA聚合酶。4疣粒稻基本信息学名:OryzagranulataNeesetArn.exHook.f.分类地位:植物界(Plantae),被子植物门(Angiospermae),单子叶植物纲(Monocotyledoneae),禾本科(Gramineae),稻属(犗狉狔狕犪)。稻属内有20余种(参见附录A)。5方法原理疣粒稻可能以植株、谷粒、核酸等形式出入境。对于植株、谷粒样品,可通过显微镜观察疑似物种的植株、小穗、外稃,根据形态特征(见附录A、附录B)进行初步鉴定;对于核酸等无形态特征的样品,根据疣粒稻的TPI基因序列特异位点设计引物开展PCR检测,进行准确鉴定。
6、6仪器设备和试剂6.1仪器和设备液氮罐、纯水机、电子天平、水浴锅、高压灭菌器、高温干燥箱、离心机、电泳仪、PCR仪、电泳槽、显微镜、扫描电镜、凝胶成像系统、高通量研磨机、涡旋震荡器、可调移液器(1000μL,200μL,100μL,20μL,10μL,2.5μL)、可调移液器枪头、离心管。6.2试剂PCR反应常用试剂、电泳试剂和核酸分子量标准等,均为分析纯或生化纯(另有规定的除外),水按照GB/T6682规定的执行。7鉴定方法7.1形态鉴定7.1.1稻属植株形态特征一年生或多年生草本。秆直立,丛生。7.1.1.1叶叶鞘无毛;叶舌长膜质或具叶耳;叶片线形扁平,宽大。7.1.1.2花
7、顶生圆锥花序疏松开展,常下垂。2犛犖/犜5130—20197.1.1.3小穗小穗含一两性小花,其下附有2枚退化外稃,两侧甚压扁;颖退化,仅在小穗柄顶端呈二半月形之痕迹;孕性外秤硬纸质,具小疣点或细毛,有5脉,顶端有长芒或尖头;内稃与外稃同质,有3脉,侧脉接近边缘而为外稃之2边脉所紧握;鳞被2;雄蕊6枚;柱头2,帚刷状,自小穗两侧伸出。7.1.2疣粒稻形态特征(参见附录犃和附录犅)多年生草本。有时具短根状茎。秆高30-70厘米,压扁,具5-9节。7.1.2.1叶叶鞘无毛,长5-8厘
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