第二节常用分析方法

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1、第二节常用分析方法化学分析(chemicalanalysis)仪器分析(instrumentanalysis)1化学分析(chemicalanalysis)化学分析是以物质的化学反应为基础的分析。化学分析历史悠久,是分析化学的基础,又称为经典分析。   化学分析是绝对定量分析,根据样品的量、反应产物的量或所消耗试剂的量及反应的化学计量关系,通过计算得出待测组分的量。化学分析法通常用于测定相对含量在1%以上的常量组分,准确度高(一般情况下相对误差为0.1%-0.2%),所用天平、滴定管等仪器设备简单,是解决常量分析问题的

2、有效手段。由于科学的发展,它在向自动化、智能化、一体化、在线化的方向发展,可以与各种仪器分析紧密结合。化学分析根据其操作方法的不同分为:滴定分析(titrimetry)也叫容量分析(volumetry)重量分析(gravimetry)2仪器分析(instrumentanalysis)仪器分析是相对定量分析,根据标准工作曲线,计算获得结果。仪器分析是指采用仪器设备,通过测量物质的物理或物理化学性质的参数获取物质的化学组成、成分含量及化学结构等信息的一类分析方法。仪器分析的分析对象是半微量(0.01-0.1g)、微量(0.

3、1-10mg)、超微量(<0.1mg)组分的分析,灵敏度高。仪器分析除了可用于定性和定量分析外,还可用于结构、价态等分析。3仪器分析特点灵敏度高,检出限低。适合于半微量、微量和超微量成分的测定。选择性好,可以通过改变测定条件,使共存组分在测定时不产生干扰。操作简便,分析速度快,易实现自动化。4质谱分析电化学分析色谱分析联用技术仪器分析光谱分析5联用技术质谱法可以进行有效的定性分析,但对复杂有机化合物的分析就显得无能为力;而色谱法对有机化合物是一种有效的分离分析方法,特别适合于进行有机化合物的定量分析,但定性分析则比较困

4、难。因此,这两者的有效结合必将为化学家及生物化学家提供一个进行复杂有机化合物高效的定性、定量分析工具。象这种将两种或两种以上方法结合起来的技术称之为联用技术。代谢组学是通过考察生物体受到刺激或扰动后其代谢产物的变化来研究生物体系代谢途径的一种技术。这项技术要求能对限定条件下特定生物样本中的所有代谢组分进行定性和定量分析。在代谢组学的分析方法的选择上,色谱质谱联用方法(GC/MS和LC/MS)应用较广。6光谱分析根据物质的光谱来鉴别物质的化学组成和相对含量的方法叫光谱分析。其优点是灵敏,快速。根据光谱产生的方式可分为发射

5、光谱分析与吸收光谱分析;根据被测成分的形态可分为原子光谱分析与分子光谱分析。根据波长区域不同可分为红外光谱、可见光谱和紫外光谱;7紫外-可见分光光度法紫外--可见分光光度法,是根据物质分子对波长为200-760nm范围电磁波的吸收特性所建立起来的一种定性、定量的分析方法。波长长(频率小)的光线能量小,波长短(频率大)的光线能量大。仪器类型:单波长单光束直读式分光光度计,单波长双光束自动记录式分光光度计,双波长双光束分光光度计。用于各种物质中微量、超微量和常量的无机和有机物质的定量分析。8红外线分仪器属于不分光式红外仪器

6、,其工作原理是基于某些气体对红外线的选择性吸收基本工作原理:用一定频率的红外线聚焦照射被分析的试样,如果分子中某个基团的振动频率与照射红外线相同就会产生共振,这个基团就吸收一定频率的红外线,把分子吸收的红外线的情况用仪器记录下来,便能得到全面反映试样成份特征的光谱,从而推测化合物的类型和结构。9紫外可见分光光度计10分子荧光光谱分析(molecularfluorescenceanalysis)利用某些物质分子受光照射时所发生的荧光的特性和强度,进行物质的定性分析或定量分析的方法。产生荧光的条件是:1.待测物质的分子必须

7、具有能吸收激发光的结构,通常是共轭双键结构,共轭双键是以C=C-C=C为基本单位。2.稀溶液(C≤0.05)溶液的荧光强度还受到溶剂、温度、pH值的影响。还会因荧光物质和其他溶质分子的相互作用使荧光强度而降低,这种现象称为荧光猝灭。11荧光特性1.荧光的减退荧光物质经紫外线长时间照射及空气的氧化作用,会使荧光逐渐减退.2.试剂的浓度有些试剂能吸收紫外线,有颜色的试剂还有吸收荧光的作用,因此分析时所加试剂的量不可太多。123.pH的影响荧光反应受溶液酸碱度的影响,故荧光分析需在适合的酸碱度溶液中进行。最适当的酸碱度必须由

8、实验来确定。所用酸的种类也影响荧光的强度,例如,奎宁在硫酸溶液中的荧光较在盐酸中的要强些。4.溶剂许多有机物及金属的有机络合物,在乙醇溶液中的荧光比在水溶液中强。乙醇、甘油、丙酮、氯仿及苯都是常用的溶剂。荧光分析应设法避免使用有机试剂,因在有机溶剂中大多有荧光,避免的办法是加水稀释。13荧光分光光度计14红外光谱(infrared

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