2020版高考生物总复习第34讲无菌操作技术实践教案苏教版

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1、第34讲　无菌操作技术实践最新考纲全国卷考情1.微生物的分离和培养2.培养基对微生物的选择作用3.某种微生物数量的测定4.微生物在其他方面的应用2018·全国卷Ⅰ（37）、2018·全国卷Ⅱ（37）、2018·全国卷Ⅲ（37）、2017·全国卷Ⅰ（37）、2016·全国卷Ⅰ（39）、2016·全国卷Ⅲ（39）考点一　微生物的培养和应用1.培养基（1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。（2）营养组成：一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。此外，还需要满足微生物生长对pH、氧气以及

2、特殊营养物质的要求。（3）种类①按照物理性质可分为液体培养基、固体培养基、半固体培养基。②按照成分的来源可分为天然培养基和合成培养基。③按照功能用途可分为选择培养基、鉴别培养基等。2.无菌技术（1）含义：在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。（2）常用方法3.大肠杆菌的纯化培养（1）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基→→→→（2）纯化大肠杆菌的方法①纯化培养原理：想方设法在培养基上得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的菌落，即可获得较纯的菌种。②纯化大肠杆菌的关键步骤：接种。③常用的微生物接种方法有两种a.平板划线

3、法：是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。如图所示：b.稀释涂布平板法：是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。（3）菌种的保存方法①对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法。②对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法。点悟：（1）用稀释涂布平板法统计样品中菌落的数目往往比实际数目“低”。这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。而显微计数法由于不能区分死菌与活菌，故所得数值可能

4、比实际值“偏高”。（2）平板划线法只适用于微生物的提纯，不适用于微生物的计数，并且在最后一次划线的末端处的菌种最纯。下图中图1为“倒平板”相关操作，图2为微生物接种方法。请思考：（1）请用文字和箭头写出图1中正确的倒平板操作流程。提示　C→B→A→D（2）图示B为何需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？为何需进行D操作？提示　B操作是通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。D操作是平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培

5、养基，造成污染。（3）图2中E、F依次利用何种方法进行接种？其接种工具依次是什么？其接种后效果图解应如图中a还是b？提示　平板划线法　稀释涂布平板法　接种环　涂布器　E—a、F—b　微生物实验室培养及无菌操作技术1.（2018·全国卷Ⅱ，37）[生物——选修1：生物技术实践]在生产、生活和科研实践中，经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。回答下列问题：（1）在实验室中，玻璃和金属材质的实验器具　　　　（填“可以”或“不可以”）放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。（2）牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法，与煮沸消

6、毒法相比，这两种方法的优点是____________________________________。（3）密闭空间内的空气可采用紫外线照射消毒，其原因是紫外线能　　　　。在照射前，适量喷洒　　　　，可强化消毒效果。（4）水厂供应的自来水通常是经过　　　　（填“氯气”“乙醇”或“高锰酸钾”）消毒的。（5）某同学在使用高压蒸汽灭菌锅时，若压力达到设定要求，而锅内并没有达到相应温度，最可能的原因是　　　　。解析　（1）在实验室中，能耐高温的、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿和金属材质的实验器具等可以放入干热灭菌箱中进

7、行干热灭菌。（2）巴氏消毒法或高温瞬时消毒法与煮沸消毒法相比，其优点表现为在达到消毒目的的同时，营养物质损失较少。（3）紫外线照射能消毒的原因是其能够破坏微生物细胞中的DNA分子。在利用紫外线照射前，适量喷洒石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液，可强化消毒效果。（4）自来水通常采用氯气消毒。（5）采用高压蒸汽灭菌时，若压力达到设定要求，而温度未达到相应要求，最可能的原因是没有排尽高压蒸汽灭菌锅内的冷空气。答案　（1）可以　（2）在达到消毒目的的同时，营养物质损失较少　（3）破坏DNA结构　消毒液　（4）氯气　（5）未将锅

8、内冷空气排尽2.（2019·东北师大附中调研）大肠杆菌是遗传学和微生物学中经典的模式生物。科研人员要对大肠杆菌进行研究，首先要纯化大肠杆菌，请结合所学知识，回答下列问题：（1）纯化大肠杆菌首先需要制备　　　　培养基。在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑　　　　、温度等条件。（2）可以估算出样品中大肠杆菌密度的接种培养方法是　　，估算值一般比实际值偏　　　　（填“大”或“小”