2020版高考生物复习第1讲无菌操作技术教学案苏教版(选修1)

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1、第1讲 无菌操作技术[考纲展示] 1.微生物的分离和培养 2.某种微生物数量的测定 3.培养基对微生物的选择作用考点一

2、微生物的分离和培养1.相关技能、技术和方法(1)无菌操作的技能——灭菌①分类:实验室常用高温处理达到灭菌效果,包括干热灭菌和湿热灭菌。②作用:微生物分离和培养的基础。③关键:防止外来杂菌的入侵。(2)配制培养基①培养基概念:为人工培养微生物而制备的适合微生物生长、繁殖或积累代谢产物的营养物质。②分类:按化学性质的不同分为天然培养基和合成培养基。(3)接种微生物①接种:指在无菌条件下将微生物接入培养基的操作过程。②接种方法和常用工具(连线)接种方法    常

3、用工具Ⅰ.涂布平板接种  a.接种针Ⅱ.穿刺接种 b.接种环Ⅲ.斜面接种c.玻璃涂布器Ⅳ.平板划线接种答案:Ⅰ-c Ⅱ-a Ⅲ-b Ⅳ-b2.大肠杆菌的接种与分离培养(1)配制牛肉膏蛋白胨培养基其操作步骤:配制培养基→调节pH→分装→包扎→灭菌→搁置斜面。(2)斜面接种和培养大肠杆菌①主要目的:菌种转移、扩大培养和保存纯净菌种等。②主要步骤:准备接种→接种环灭菌→试管口灭菌→挑取少许菌种→划线接种→在37_℃恒温箱中培养大肠杆菌24h→将增殖的菌种放置在冰箱的冷藏室中(4℃)保存。(3)平板划线分离和培养大肠杆菌①平板的作用:培养、分离细菌等微生物。②平板划线法是指用带有微

4、生物的接种环在平板培养基表面通过分区划线而纯化分离微生物的一种方法。[思考回答]1.微生物接种的核心是什么?提示:防止杂菌污染,保证培养物的纯度。2.如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图,请分析接种的具体方法。(1)获得图A和图B效果的接种方法分别是什么?提示:图A效果是稀释涂布平板法,图B效果是平板划线法。(2)某同学在用A方法纯化土壤中的细菌时,发现培养基上的菌落连成一片,最可能的原因是什么?为了防止杂菌污染,有同学建议加入抗生素,你觉得可以吗?并说明理由。提示:菌液浓度过高(土壤溶液稀释不够)。不可以,因为抗生素不但杀灭杂菌,而且也可以杀灭大肠杆菌

5、,因此在培养基上不可以加入抗生素。1.选择无菌技术的原则(1)考虑无菌技术的效果:灭菌的效果比消毒要好。(2)考虑操作对象的承受能力:活体生物材料、操作者的手等只能采用消毒,而不能灭菌。2.微生物的培养基(1)培养基的成分营养要素来源功能碳源无机碳源CO2、NaHCO3、CaCO3等含碳无机物a.构成细胞物质和一些代谢产物b.既是碳源又是能源(有机碳源)有机碳源糖类、脂质、蛋白质、有机酸、石油、花生粉饼等氮源无机氮源无机氮:NH3、铵盐、硝酸盐、N2等合成蛋白质、核酸及含氮的代谢产物有机氮源牛肉膏、蛋白胨、核酸、尿素、氨基酸生长因子维生素、氨基酸、碱基a.酶和核酸的组成成分

6、b.参与代谢过程中的酶促反应水培养基、大气、代谢产物不仅是良好的溶剂,还是结构物质无机盐培养基、大气细胞内的组成成分,生理调节物质;某些化能自养型细菌的能源;酶的激活剂(2)根据理化性质对培养基的分类种类特点应用物理性质液体培养基不加凝固剂工业生产固体培养基加凝固剂微生物的分离、鉴定、活菌计数、保藏化学成分天然培养基含化学成分不明的天然物质工业生产合成培养基培养基成分明确或用一定化学物质配制分类、鉴定(3)根据功能可分为选择培养基和鉴别培养基类型实例选择培养基培养基中加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌培养基中加入高浓度的食盐用于分离得到金黄色葡萄球菌以尿素作为唯一氮源的培养基用

7、于分离分解尿素的细菌不添加氮源的培养基用于分离固氮微生物石油是唯一碳源时,可以抑制不能利用石油的微生物的生长,使能够利用石油的微生物生存,达到分离能消除石油污染的微生物的目的培养基放在高温环境中培养只能得到耐高温的微生物鉴别培养基伊红—美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌(菌落呈黑色)◎考法1 考查无菌技术和培养基成分及分类[解题指导]关于培养基的理解1.(2019·江西赣中南五校第一次联考)下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方,请根据表格和所学知识回答下列相关问题。成分蛋白胨乳糖蔗糖K2HPO4指示剂琼脂含量(g)10.05.05.02.00.212.0将上述物质溶解

8、后,用蒸馏水定容到1000mL(1)从生态系统的成分上看,大肠杆菌属于__________。(2)若根据用途划分,该培养基属于__________(填“选择”或“鉴别”)培养基。若要用上述培养基来筛选出土壤中的尿素分解菌,培养基的营养成分必需怎样更改?________________,并用__________作为指示剂。(3)在微生物培养的过程中,为防止杂菌污染,需要对培养基和培养皿进行__________;操作者的双手需要进行清洗和__________。(4)图1和图2是培养某细菌的结果图,其对应的接种方法分别是

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