无菌制剂成品密封系统完好性验证-药智论坛

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1、无菌制剂成品密封系统完好性验证——微生物侵入试验黑龙江省食品药品监督管理局药品安全监管处谭宏宇如果想要下载更多的资源请百度一下药智论坛主要内容定义和目的适用范围试验方法结果评价贮存稳定性恶劣条件下的成品密封性验证生产中的在线检漏如果想要下载更多的资源请百度一下药智论坛一、概述微生物侵入试验是对最终灭菌容器的密封件系统完好性的挑战性试验。目的是考察并确认容器密封系统的完好性。如果想要下载更多的资源请百度一下药智论坛二、适用范围本验证适用于无菌制剂生产中使用的输液瓶、西林瓶等需用多组件完成密封的容器完好性测试。如果想要下载更多的资

2、源请百度一下药智论坛三、试验方法在验证试验中，取输液瓶或西林瓶，灌入培养基，在正常生产线上压塞、压盖灭菌。此后，将容器密封面浸入高浓度运动性菌液中，取出、培养并检查是否有微生物侵入。如果想要下载更多的资源请百度一下药智论坛（一）试验样品的制备1.在生产线上取足够量的容器，灌装SCDM/2（大豆胰蛋白胨肉汤）培养基，使用自动压塞和压盖设备将容器密封；2.将灌装后的容器经最长灭菌程序灭菌。121℃、30′；如果想要下载更多的资源请百度一下药智论坛3.取出、放冷，将每一试样倒转，使培养基与瓶口充分接触，在30～35℃下倒置培养14天;

3、4.选50个试样小心去除铝盖,注意不要破坏其密封口。将去铝盖时不慎损坏窗口密封性的所有试样剔除。按上述3中要求培养样品。在培养期内，当试验中发现任何带盖试样长菌时,则试验无效,须弃去全部试样，重新从头开始试验。如果想要下载更多的资源请百度一下药智论坛（二）确认培养基促菌生长能力—营养性试验1.接种所有试样培养14天均不长菌时，随机取20个带盖试样每个试样内接种0.1ml的铜绿假单胞菌（Pseudomonasaeruginosa）ATCC9027,菌液浓度10～100CFU/0.1ml。试验菌选择原则：（1）所选菌种的体积大小，越

4、小越好。（2）运动能力强。（3）适宜的培养基。如果想要下载更多的资源请百度一下药智论坛2.培养在30～35℃下培养7天，或培养至所有试样都呈阳性结果。如果想要下载更多的资源请百度一下药智论坛3.判定若7天内，所有接种铜绿假单胞菌的试样中，微生物生长良好，则容器内培养基的促菌生长能力可判为合格。使用革兰染色和紫外灯下肉汤呈蓝绿色荧光的性质，来鉴定并确认试样容器内生长的菌为接入的铜绿假单胞菌。如果想要下载更多的资源请百度一下药智论坛（三）挑战菌悬浮液的制备1.从铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)ATCC902

5、7的新鲜斜面上取一整环培养物，分别接入含lOml无菌培养基的试管中，在30～35℃下培养16～18h。2.将每管的培养物分别转入含1000ml相同培养基(SCDM／2)的容器内，于30～35℃下培养22～24h。在培养结束时，能明显见容器内培养基出现浑浊。3.培养结束后的菌悬液即可用来作容器／密封系统完好性试验。如果想要下载更多的资源请百度一下药智论坛（四）微生物侵入试验操作步骤本试验须在生物安全柜内或其他不影响生产环境的地方进行。1.将新鲜的铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)ATCC9027的菌悬液倒入

6、合适的盆中，用金属丝架固定试样容器，使试倒置在菌悬液中。2.将50个经最长灭菌程序灭菌的试样倒置，并浸入菌悬液中。该组试样为A组。试样容器内的无菌培养基应充分接触封口内表面，样品的颈部及封口的外表面应完全浸泡在菌悬液中，见图4－54。如果想要下载更多的资源请百度一下药智论坛3.同时将25个去铝盖的试样容器倒置入菌悬液中，该组试样为B组。如果想要下载更多的资源请百度一下药智论坛4.实验开始时取一份菌悬液，平板计数每毫升所含的活菌数。按2.3.1确认试验用微生物是铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)。5.将A

7、组和B组试样容器在菌悬液中持续浸泡约4h。6.浸泡结束时，再用平板计数菌悬液的浓度。如果想要下载更多的资源请百度一下药智论坛7.从菌悬液中取出试样，擦干试样容器外残余的菌悬液，然后用含0.5％过乙酸的70％异丙醇消毒容器外表面。8.取装满培养基有铝盖和去铝盖的样品各两个，作阳性对照。阳性对照用样品制备方法同试样，但不经菌悬液浸泡，其外表用含0.5％过乙酸的70％异丙醇消毒。此后，接种入10～I00CFU铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)ATCC9027，按步骤2进行培养基的营养试验。如果想要下载更多的资源

8、请百度一下药智论坛9.将消毒后的容器放在塑料袋中，置30～35℃培养7天。操作中应特别注意不要损坏B组无铝盖试样胶塞的密封性。10.挑战试验用菌悬液经灭菌后丢弃。如果想要下载更多的资源请百度一下药智论坛11.将挑战试验用的试样培养7天，观察检查试样容器内培养基中