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时间:2019-10-31
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1、染色液的配制一、吕氏(Loeffler)碱性美蓝染液 A液:美蓝(methyleneblue)0.6g 95%酒精30ml B液:KOH0.01g 蒸馏水100ml 分别配制A液和B液,配好后混合即可。 二、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液 A液:碱性复红(basicfuchsin)0.3g 95%酒精10ml B液:石炭酸5.0g 蒸馏水95ml 将碱性复红在研钵中研磨后,逐渐加入95%酒精,继续研磨使其溶解,配成A液。 将石炭酸溶解于水中,配成B液。 混合A液及B液即成。通常可将此混合液稀释5—10倍使用,稀释液
2、易变质失效,一次不宜多配。 三、革兰氏(Gram)染色液 1.草酸铵结晶紫染液 A液:结晶紫(crystalviolet)2g 95%酒精20ml B液:草酸铵(ammoniumoxalate)0.8g 蒸馏水80ml 混合A、B二液,静置48小时后使用。 2.卢戈氏(Lugol)碘液 碘片1.0g 碘化钾2.0g 蒸馏水300ml 先将碘化钾溶解在少量水中,再将碘片溶解在碘化钾溶液中,待碘全溶后,加足水分即成。 3.95%的酒精溶液。 4.番红复染液 番红(safranineO)2.5g 95%酒精100ml
3、 取上述配好的番红酒精溶液10ml与80ml蒸馏水混匀即成。 四、芽孢染色液 1.孔雀绿染液 孔雀绿(malachitegreen)5g 蒸馏水100ml 2.番红水溶液 番红0.5g 蒸馏水100ml 3.苯酚品红溶液 碱性品红11g 无水酒精100ml 制法取上述溶液10ml与100ml5%的苯酚溶液混合,过滤备用。 4.黑色素(nigrosin)溶液 水溶性黑色素10g 蒸馏水100ml 称取10g黑色素溶于100ml蒸馏水中,置沸水浴中30分钟后,滤纸过滤 二次,补加水到100ml,加0.5ml甲醛,备用
4、。 五、荚膜染色液 1.黑色素水溶液 黑色素5g 蒸馏水100ml 福尔马林(40%甲醛)0.5ml 将黑色素在蒸馏水中煮沸5分钟,然后加入福尔马林作防腐剂。 2.番红染液 与革兰氏染液中番红复染液相同。 六、鞭毛染色液 A液:单宁酸5g FeCl31.5g 蒸馏水100ml 福尔马林(15%)2.0ml NaOH(1%)1.0ml 配好后,当日使用,次日效果差,第三日则不宜使用。 B液:AgNO32g 蒸馏水100ml 待AgNO3溶解后,取出10ml备用,向其余的90mlAgNO3中滴入浓NH4ON,使之
5、成为很浓厚的悬浮液,再继续滴加NH4OH,直到新形成的沉淀又重新刚刚溶解为止。再将备用的10mlAgNO3慢慢滴入,则出现薄雾,但轻轻摇动后,薄雾状沉淀又消失,再滴入AgNO3,直到摇动后仍呈现轻微而稳定的薄雾状沉淀为止。如所呈雾不重,此染剂可使用一周,如雾重,则银盐沉淀出,不宜使用。 七、富尔根氏核染色液 1.席夫氏(Schiff)试剂 将1g碱性复红加入200ml煮沸的蒸馏水中,振荡5分钟,冷至50℃左右过滤,再加入1mol/LHC120ml,摇匀。待冷至25℃时,加Na2S2O5(偏重亚硫酸钠)3g,摇匀后装在棕色瓶中,用黑纸包好,
6、放置暗处过夜,此时试剂应为淡黄色(如为粉红色则不能用),再加中性活性炭过滤,滤液振荡1分钟后,再过滤,将此滤液置冷暗处备用(注意:过滤需在避光条件下进行)。 在整个操作过程中所用的一切器皿都需十分洁净、干燥,以消除还原性物质。 2.Schandium固定液 A液:饱和升汞水溶液 50ml升汞水溶液加95%酒精25ml混合即得。 B液:冰醋酸 取A液9毫升+B液1毫升,混匀后加热至60℃。 3.亚硫酸水溶液 10%偏重亚硫酸钠水溶液5ml,1mol/LHCl5ml,加蒸馏水100ml混合即得。 八、Bouin氏固定液 苦味酸饱
7、和水溶液75ml 福尔马林(40%甲醛)25ml 冰醋酸5ml 1g苦味酸可制成75ml饱和水溶液。 先将苦味酸溶解成水溶液,然后再加入福尔马林和冰醋酸摇匀即成。 九、乳酸石炭酸棉蓝染色液 石炭酸10g 乳酸(比重1.21)10ml 甘油20ml 蒸馏水10ml 棉蓝(cottolue)0.02g 将石炭酸加在蒸馏水中加热溶解,然后加入乳酸和甘油,最后加入棉蓝,使其溶解即成。 十、瑞氏(Wright)染色液 瑞氏染料粉末0.3g 甘油3ml 甲醇97ml 将染料粉末置于干燥的乳
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