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时间:2019-10-30
《海南砂仁中黄酮的提取及抗氧化研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、砂仁中黄酮提取及其抗氧化性研究主要仪器:TU-1810紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限公司);KQ-500E型超声清洗器(昆山市超声仪器有限公司);DJZ型粉碎机。?型电子天平,电热鼓风干燥机,烘箱。超声??机,漏斗主要试剂:芦丁化学对照品(中国药品生物制品检定所,分析纯);无水乙醇(天津市德恩化学试剂有限公司,分析纯);硝酸铝(分析纯);亚硝酸钠(分析纯);氢氧化钠(分析纯);蒸馏水;甲醇。黄酮提取:处理:将砂仁去壳后仁、皮、整个分别用粉碎机粉碎,分别研磨称取2g左右,分别加25ml甲醇用超声??机搅拌1h。过滤,保存滤液,及得到三种提取液。1)标准溶液配制在电子天平准确
2、称取16.51mg芦丁用甲醇定容25mL的容量瓶中,得到浓度为0.6604mg/mL的芦丁溶液。2)5%NaNO2溶液配制:用电子天平称取5.00gNaNO2于小烧杯中移至100mL容量瓶中,定容。3)10%Al(NO3)3的溶液配制:用电子天平称取10.00gAl(NO3)3于小烧杯中移至100mL容量瓶中,定容。4)NaOH溶液配制:用电子天平称取21.51gNaOH于烧杯中移至500mL容量瓶中,定容。6,测定波长的选择:取芦丁标准溶液0.5mL,置于25mL容量瓶中,加甲醇6ml,再加5%亚硝酸钠1ml,震荡放置6min,加10%硝酸铝1mi.摇匀,再放置6min,加氢氧化
3、钠10ml,用甲醇定容至刻度,10min后,加5%亚硝酸钠,10%硝酸铝和氢氧化钠的甲醇溶液为空白组,用1cm比色皿在190—600波长内扫描,确定最大吸收波长。47,标准曲线的绘制准确移取0.00、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00mL的0.6604mg/mL芦丁标准溶液。分别置于25mL的容量瓶中,各加入甲醇溶液6mL。然后依次加入1mL5%的NaNO2溶液,6min后加入1mL10%的Al(NO3)3溶液,6min后加入10mlNaOH溶液,10min后用甲醇溶液定容于25ml。10min后,以相应空白溶剂为空白组已确定波长下,测定每个标准样的吸光度值(A)。浓
4、度/(mg/mL)吸光度/A以芦丁标准系列溶液的浓度为横坐标,以对应的吸光度值为纵坐标,绘制出标准曲线图,如下图。称取1ml仁=皮的滤液用蒸馏水定容于200ml容量瓶中,按“黄2“处理测吸光度,按标准曲线算浓度。黄酮提取率公式为:黄酮提取率=总黄酮浓度mg/ml乘以稀释倍数乘以0.001乘以芦丁分子质量(664.56)除以砂仁皮+仁样品质量。抗氧化性研究3)配置试剂4DPPH溶液(2×10-4mol/L):准确称取0.0079g(0.0020)DPPH用无水乙醇溶解并用无水乙醇定容于100mL(25ml)容量瓶中,再移入棕色试剂瓶中避光保存。4)实验步骤①提取液配制②测出Ai:样品
5、溶液2mL和DPPH溶液(2×10-4mol/L)2mL,室温反应30min后,在已测最大波长处的吸光度;测出Ae:无水乙醇2mL和DPPH溶液(2×10-4mol/L)2mL,室温反应30min后,在测?波长处的吸光度;测出Aj:样品溶液2mL和无水乙醇2mL,反应30min后,在?nm波长处的吸光度。多测几组。5)数据处理及结果计算测出Ai、Ae、Aj以及DPPH清除率的计算结果如下表6表6中吸光度Ai、Ae、Aj以及清除率的计算结果浓度吸光度Ae吸光度Ai吸光度AjDPPH清除率4以黄酮浓度/(ug/mL)为横轴,DPPH清除率%为纵轴作的曲线如下图8图8黄酮浓度与DPPH清
6、除率的关系由上图可以看出:随着黄酮浓度的增加,DPPH的清除率越来越强。4
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