血液分析仪应用(夜大)

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1、血液分析仪应用(夜大)血液分析仪及临床应用天津医科大学检验系李秀第一章血液分析仪的检测原理血液分析仪(hematologyanalyzer,HA),是目前临床血液一般检查最常用的检测仪器。20世纪40年代后期，美国人库尔特(W.H.Coulter)发明并申请了粒子计数技术的设计专利；至50年代初期，电子血细胞计数仪开始应用于临床，开创了血液分析仪的新纪元。第一节电阻抗法检测原理目前，各类血液分析仪主要能完成两大功能①细胞计数功能。②细胞分类功能。血液分析仪检测原理大致分为两类：电阻抗法和光散射法。一、电阻抗法(elect

2、ricalimpedance)血液分析仪检测原理根据血细胞相对非导电的性质，悬浮在电解质溶液中的血细胞颗粒,在通过计数小孔时可引起电阻的变化为基础，对血细胞进行计数和体积测定,又称库尔特原理(Coulterprinciple)二、仪器组成①脉冲信号发生器②放大器③甄别器④阈值调节器⑤整形系统⑥计数系统⑦自动控制保护系统，⑧打印系统三、白细胞计数和分类计数原理根据电阻抗的原理，不同体积的口细胞通过小孔时产生的脉冲大小有明显的差异，依据这些脉冲的大小，可对白细胞进行分群。仪器可将体积为35〜450fL的血细胞，分为256个通

3、道（channel）,每个通道为1.64fl,根据细胞大小分别置于不同的通道中，从而显示出白细胞体积分布直方图。1第一群（35〜90fl）是小细胞区，主要分布的是淋巴细胞；第二群（90〜160fl）是单个核细胞区，也称作中间细胞，主要包括单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞，核左移的各阶段幼稚细胞或白血病时口血病细胞。第三群（160fl以上）是大细胞区，主耍是嗜屮性粒细胞四、红细胞检测原理（1）红细胞计数和血细胞比容测定止常时，血液红细胞与口细胞的比例约为500:1〜750:1,因此，白细胞因素可忽略不计。血细胞比容，通

4、常用红细胞平均体积（MCV）与红细胞数相乘得到。（2）血红蛋口测定ICSH推荐使用氤化高铁法，HiCN最大吸收峰在540nm（3）红细胞其他参数的检测：经计算得到。红细胞平均体积（MCV）、平均血红蛋白量（MCH）、红细胞平均血红蛋白浓度（MCHC）（4）红细胞体积分布宽度（redbloodcellvolumedistributionwidth,RDW）,则是由血液分析仪测量细胞体积后获得的，是反映外周血红细胞休积异质性的参数，即反映红细胞大小不等的客观指标。五、血小板检测原理血小板（platelet,PLT）随红细胞一

5、起在一个系统中进行检测，当各种细胞引起电阻变化，产生的脉冲经数字化后，根据不同的阈值，计算机分别给出血小板和红细胞数目。血小板分别储存于64个通道内，直方图范围在2~28fl之间。第二节光散射法检测原理一、光散射法白细胞检测原理1•激光与细胞化学法（SCC型）：应用激光散射和过氧化物酶染色技术进行口细胞计数及分类1）过氧化物酶检测通道2）嗜碱性粒细胞/分叶核检测通道X轴为吸光率（酶反映的强弱），Y轴为光散射（细胞大小）两个结合信号定位在细胞图上。2•容量、电导、光散射(volume,conductivity,scatte

6、r,VCS)法：VCS技术是使血细胞在未经任何处理，保持着与体内形态完全相同的状态下得出检测结果。测量产生的三种信号，在X、Y、Z三维空间对接近口然状态的细胞进行分析，结果更精确。23-DVCS检测技术：①应用电阻抗原理测量细胞体积(volume,V)技术。②应用电导性技术，利用不同细胞对高频电流传导的差异测量细胞的大小、内部结构；③应用光散射(scatters)技术，使细胞发生散射的特性，通过收集中间角度光散射信号，测量细胞表面结构，胞浆中颗粒的性状和核的形态等。3.电阻抗与射频法①嗜酸性粒细胞检测系统①嗜碱性粒细胞检

7、测系统②5种白细胞分类检测系统③幼稚细胞检测系统脉冲高低代表细胞大小(DC),为横坐标，核及颗粒的密度(RF),为纵坐标，根据两个信号一个细胞可定位于二维的细胞散射图上。3.多角度偏振光散身寸(multi-anglepolarizedscatterseparationofwhitecell,MAPSS)法：一定体积的全血标本，用鞘流液按适当比例稀释后，白细胞内部结构近似于自然状态通过激光束时，可从4个角测定散射光的密度：①0。：前角光散射（1。〜3。）可粗略测定细胞大小。②10。:狭角光散射（7。~11°）,可测定细胞内

8、部结构相对特征。③90。:垂直光散射（70°-110°）,测定细胞核分叶情况。④90。:消偏振光散射（70°-110°）将嗜酸性粒细胞与其他细胞中区分出来二、光散射法红细胞检测原理激光束以低角度前向光散射和高角度散射两个测量系统同时测量1个红细胞。低角度（2。~3°）光散射转换能量大小，可测量单个红细胞体积，高角度（