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时间:2018-10-13
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1、血液分析仪及其临床应用hematologyanalyzerandclinicalapplication血液分析仪及其临床应用检测原理检测参数细胞直方图方法学评价临床应用血液分析仪使用中应注意的问题血液分析仪COULTER:细胞分析仪库尔特基金会提供的相片1第一台细胞计数仪瓶瓶罐罐+管道+电极+示波器血液分析仪发明者库尔特先生35岁的美国人库尔特发明了粒子计数技术;50年代初期,血细胞计数仪开始应用于临床。科技为人类健康服务,热心社会公益事业。库尔特先生1913-1998库尔特与李俊的差别:社会价值观的差别日照香炉生紫烟,疑似熊猫在烧香。06年毒王“熊猫烧香”
2、电脑病毒。病毒原始制作者25岁的网络天才李俊。正确社会价值观:敬业、爱心、责任感一、血液分析仪检测原理血液分析仪检测原理大致分为两类:①电阻抗法(库尔特原理)②光散射法(其中电阻抗法是血液分析仪的设计基础)血液分析仪主要能完成两大功能:①细胞计数功能②细胞分类功能检测原理主要内容1电阻抗法原理(库尔特原理)库尔特原理与原理图仪器的主要组成白细胞检测原理红细胞检测原理血小板检测原理血红蛋白检测原理2VCS法原理(一)电阻抗法原理(库尔特原理)1、库尔特原理库尔特原理是利用电阻抗法测量细胞的数量和体积。其内容为:血细胞是电的不良导体,当一个细胞通过计数小孔时,会
3、导致小孔两端电阻的变化,将其转化成脉冲,感应器通过检测脉冲的数量及大小,从而计算出通过小孔的细胞数量及体积。2、库尔特原理图细胞计数池中,小孔内外两个电极和稀释液构成一个电流回路,在负压作用下,细胞通过小孔,电极能感应到一个瞬间的电阻变化,并将其转换成脉冲,脉冲的数量代表细胞数量,脉冲大小反映细胞体积大小。脉冲检测器3、电阻抗法仪器的主要组成电阻抗法仪器的主要组成包括:信号发生器(脉冲检测器)放大器(微伏放大为伏级的脉冲信号)阈值调节(计数不同细胞有不同阈值)甄别器(除去假脉冲信号)整形器(波形调整为标准一致的平顶波)计数系统(不同脉冲区分出不同细胞并计数)
4、4、白细胞检测原理根据电阻抗的原理,不同体积白细胞(35-450)fL产生脉冲大小的明显差异而区分相应的三群细胞:35—90f1160fl以上90~160f15、电阻抗法红细胞检测原理电阻抗法检测红细胞要注意白细胞增高干扰:稀释血液中含有白细胞,当血液进入红细胞检测通道时,红细胞检测的各项参数中均含有白细胞因素。正常时,血液红细胞与白细胞的比例约为500:1~750:l,因此,白细胞因素可忽略不计。当病理情况下,如白血病时,白细胞数明显增高,同时又伴有贫血时,使所得红细胞参数可产生明显误差。6、红细胞其他参数的检测MCVD.HCTMCHMCHCE.RDW7、
5、血红蛋白测定原理有关溶血剂1、ICSH推荐的HICN法:最大吸收峰在540nm。血红蛋白衍生物是HICH-HB,试剂反应时间长,5分钟,不适合全自动仪器。另外,氰化血红蛋白(CN-HB):试剂成分氰化钾(剧毒)。2、非氰化溶血剂(如SDS-HB):SDS-HB与HICH-HB吸收光谱相似。8、血小板检测原理根据电阻抗法,血小板随红细胞在一个系统中进行检测,在红细胞/血小板计数池中计数2fl~30fl的颗粒。有些仪器专门设置了增加血小板准确性的技术,如鞘流技术、浮动界标、拟合曲线等。PLT拟合曲线仪器进行血小板计数时,计数2fl一30fl大小的血小板颗粒数量,
6、再拟合出一条0fl一70fl的曲线,将小部分小血小板及大血小板包含进去,但拟合曲线的给出是有条件的,条件不满足时仪器不能给出拟合曲线。血小板拟合曲线的条件1.血小板计数>20X109/L2.直方图呈现对数正态分布3.直方图的峰值在2一15fl范围4.PDW<20%(二)光散射法血液分析仪检测原理光散射法组合应用电学、光学、细胞化学多项技术检测血液细胞,可得出较准确的细胞计数和分类计数的结果。这些测试原理的改进主要体现在对白细胞分类部分的改进,即电阻抗法的白细胞三分群发展为多项技术对白细胞五分类。1、光散射法测试原理改进的四种类型激光与细胞化学法容量、电导、光
7、散射(VCS)法电阻抗与射频法多角度偏振光散射法2、VCS法原理应用电阻抗原理测量细胞体积(Volume,V)技术。应用电导性(ConductivityC)技术。检测的原理是:根据细胞壁能产生高频电流的性能,采用高频电磁探针,测量细胞内部结构,即以细胞核和细胞质的比例、细胞内颗粒的大小和密度,来辨别体积相同、但性质不同的两个细胞群体,如淋巴细胞和嗜碱性粒细胞。2、VCS法原理应用光散射(Lightscatter,S)技术。原理是:来自激光源的单色光直接扫描进入计数敏感区的每一个细胞,根据细胞产生不同角度的散射光(10°一70°),可提供细胞形态、核结构等光散
8、射信息,并能鉴别细胞颗粒的构型和质量,光散射可区别粒
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