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时间:2019-10-24
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1、浅谈肺结核早期诊断的检验【摘要】目的:探讨肺结核早期诊断的检验方法。方法:回顾性分析本院收治的56例肺结核患者以及54例非肺结核患者。结果:56例结核病患者和54例非结核病患者的痰和血清及23例胸腔积液患者的胸水均接受3种方法的检测,三种方法结核患者检出率差别有统计学意义,PCR检测阳性检出率明显高于其他两种方法的检出率(P【关键词】肺结核;早期诊断;检验方法肺结核主要通过呼吸道传播,因此,尽早确诊肺结核病、控制传染源成为预防肺结核病的重要途径。为提高对结核病的早期诊断率,笔者选取我院患者为研究对象,开展对照研究
2、。对患者的痰、胸水、血清实施涂片结核菌检查、聚合酶链反应(PolyeraseChainReactionPCR)以及皮肤结核菌素纯蛋白衍化物(PPD)试验,现将结果报道如下:1对象与方法1.1研究对象选取2009年1月一2010年12月期间,对我院收治的56例肺结核患者以及54例非肺结核患者为研究对象,男60例,女50例,年龄16〜79岁,平均41.74±3.44岁。所有肺结核患者根据临床诊断,包括体征、病史、临床表现、胸部X线细菌学检查和抗结核治疗有效而确诊,部分患者接受CT、胸膜活检、纤支镜检查而确诊,非结核经
3、病理学检查。患者病情分类见表1。1.2研究方法采用对照研究法,对我院收治的56例肺结核患者的痰、胸水、血清进行多种方法检验,包括涂片结核菌检查、聚合酶链反应(PolyeraseChainReactionPCR)和及皮肤结核菌素纯蛋白衍化物(PPD)试验,并选取问时期的非结核患者作为对照组,比较检验结果,以确定不同检验方法在诊断上的应用意义。采用MicrosoftExcel建立数据库,运用SPSS13.0统计软件进行统计分析。1.3检验方法标本取痰标本为患者晨起深呼吸后,由肺部深处咳出的分泌物。同时送涂片和PCR检
4、测。①涂片法:采用WHO推荐的国际通用螺旋盖痰瓶收集痰标本。痰涂片标本及时送检,用改良齐一尼氏法进行抗酸染色,并用湿徽镜检查,阳性标准为:观察100个视野,发现3〜9条者。②PCR诊断:由军事医学科学院放射医学研究所提供的引物及PCR诊断试刺盒进行检验。NDA标本取痰(0・5mL)加IN的NaoH离心5min,溶液(5uL),37°C温度下放置40min后,转速lOOOOrpmo将上清丢弃,并用生理盐水洗至中性备用。取:L.OmL胸水和血清,离心、沉淀后加入50uL裂解液沸水浴lOmin,离心5min,转速100
5、00rpmo取5uL上清液。作为TB-DNA模板。然后取15uLo反应液加入0.2uL的Taq酶,混匀后加入石蜡油20uL封顶,再加入5uL,标本DNA液,离心后扩增,分别设置为900C(30s)、55°C(30s)、720C(60s),共循环35次,取10〜3pmLPCR扩增液直接上样于2%琼脂糖凝胶进行电泳,阳性标准为:在紫外线下观察有160bp的橙黄色荧光带。③皮肤PPD试验:卫生部上海生物制品研究所北京华怡生物技术公司提供的PPD液,于左前臂内侧皮内注射(0・ImL),阳性标准为:72h观察局部肿结直径大
6、于5〜lOmmo2结果56例结核病患者和54例非结核病患者的痰和血清及23例胸腔积液患者的胸水均接受上述3种方法的检测,①痰标本与血清标本PCR检测结果结果详见表2与表3。结核胸膜炎胸腔积液23例患者的胸水接受PCR检测,其阳性率为89.96%(20/23),3例呈阴性,之后经胸膜活检以及抗结核治疗吸收而证实;②痰和胸水涂片作抗酸杆菌检查,结果详见表4。③PPD皮试结果,结核病组的阳性率为32.14%(18/56),非结核病组阳性率为20.37%(11/54)o三种方法结核患者检出率差别有统计学意义,PCR检测阳
7、性检出率明显高于其他两种方法的检出率(P
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