脾虚证诊断的参考标准及王建华教授的相关材料

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1、脾虚证诊断准则脾虚主症：1、舌质淡，或胖嫩，或有齿印，苔口润2、脉缓弱或细弱，或虚大3、食欲减退或善食而瘦4、肢体怠倦或神疲5、食后饱胀，或腹胀不适6、大便不正常（便澹，先便后澹，或时便时澹次症：消瘦或虚胖，面色淡黄，唇淡，气短，口淡不渴，喜热饮，口泛清水；阮闷暧气，恶心呕吐；腹痛绵绵，或喜按喜温，或得食痛减，或遇劳则发；肠鸣水泻,或完谷不化；排便无力，浮肿，胃下垂等具有三个以上主症（其中必须包括舌象），或一个主症加舌象和两个以上次症，可诊断为脾虚证。实验教案自行设计性实验实验名称：唾液淀粉酶活性与脾虚证的关系研究课程内容：自行设计实验实验时数：3学时

2、授课人：谭宇蕙授课对象：06级药学实验目的：1、探讨随机唾液淀粉酶活性与脾虚证的关系2、掌握淀粉酶活性测定的方法；3、熟悉数据处理方法，了解运用生化技术开展中医学研究的一些基本要求、科研思路、设计和分析方法。学生通过本实验，结合阅读材料，体会我校王建华教授领导的研究团队发现脾虚证与唾液淀粉酶关系过程屮的创新思维，学习其刻苦求真的科研精神。提供的实验条件：1、提供唾液淀粉酶活性测定所需的仪器、试剂和生化检测方法；2、捉供脾虚证诊断的参考标准（由脾胃研究所捉供）3、王建华教授关于发现脾虚证与唾液淀粉酶活性关系过程的口传材料。实施步骤：1、实验条件的准备及教

3、师预试“唾液淀粉酶活性测定”；2、课前布置学生查阅相关资料；3、课前布置学生进行脾虚证的诊断，选出10人组成诊断小组，根据脾胃研究所提供的脾虚证诊断参考标准，由诊断小组对全班每个学牛进行诊断，分成脾虚组和非脾虚组两大组；向老师提交分组名单。4、学生设计实验方案并于4月12日而交实验方案报告；5、上课时教师先结合学生的实验方案，讲解实验目的、学生设计实验方案的存在问题和注意事项；注意：空腹唾液淀粉酶活性改为随机（酸刺激前）唾液淀粉酶活性及酸刺激后唾液淀粉酶活性6、学生进行实验7、学生阅读课后学习资料（王建华教授门传材料）；8、学生汇集全班数据，每人一份，

4、总结实验结呆，分析探讨唾液淀粉酶活性与脾虚证的关系，以小论文形式提交研究报告。9、批改学生的研究报告，在下次实验课进行总结评述，把学生的研究报告结果分析与王建华教授研究组的成果进行比较分析。唾液淀粉酶活性与脾虚证的关系研究前言：（研究背景、研究口的、研究思路）目的一思路•…设计实验验证•…预期结果拟解决问题--查文献（了解相应问题的背景，找出解决问题的思路，设计和应的实验验证）-一结果处理（数据统计分析）-一得出结论（该结果能够说明（解决）什么问题，能否进一步提岀更有意义的问题）该实验的目的在于探索哑液淀粉酶活性与脾虚症的关系。中医学上，脾开窍于口，主

5、运化（消化吸收），所以可推测脾与口腔或者说与唾液淀粉酶应该启密切的关系，但以往的研究表明：通常情况下，脾虚病人唾液淀粉腮活性并没有明显的降低，这与中医学的理论有冲突，所以进一步设计出在“负荷”条件下的验证比鮫。预期的结果：在“负荷”条件下，脾虚患者唾液淀粉酶活性降低表征，应该有更为明显的体现。技术路线:确定脾虚症诊断标准分组■JI正常对照组脾虚症组唾液淀粉酶活性I唾液淀響活性V▼负荷前负荷后Xblxb2负荷前负荷后实验方法:1、分组：提前一节课让班长在做实验前按照提供的'脾虚症诊断标准'筛选!1110-20位脾虚同学，作为脾虚组；在上课时现场找4位正常

6、同学/每小班，作为正常对照组。2、唾液采集：筛选出的所有同学每人分别采集酸刺激前后的唾液（约2ml/管），做好标记。3、唾液处理:收集的唾液3000rpm离心15min；取上清100ul,加入30mlpH6.7的蒸馆水中（100ml锥形瓶）,摇匀备用。4、按照下表实验:试管空白标准刺激（前）刺激（后）1#2#1#2#水2ml2ml1.9ml1.7ml1.9ml1.7ml稀释唾液0.1ml0.3ml0」ml0.3ml摇匀，37度水浴5min把淀粉试剂瓶拿到水浴锅里一起水浴0.25%淀粉2ml2ml2ml2ml2ml摇匀，37度水浴15min,从恒温水浴箱

7、10%硫酸1.0ml1.0ml1.0ml1.0ml1.0ml1.0ml碘液1.5ml1.5ml1.5ml1.5ml1.5ml1.5m]最后每管加蒸馆1水至50ml摇匀630nm测定OD5、计算:[(OD标・OD测)/OD标]X5X(l/0.1)X(3070.1(0.3))=酶的活性单位单位定义：lml唾液在37度15min水解1ml淀粉作为1单位。6、结杲及其统计分析：附：小样本平均差界的显著性检验——t检验t检验是用于小样本（样本容量小于30）时，两个平均值差异程度的检验方法。它是用t分布理论来推断差异发生的概率，从而判定两个平均数的差异是否显著。其

8、一般步骤如下:第一步，建立虚无假设凤：111=112,即先假定两个总休平均数之间没有显著差异。