基础医学实验技术

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1、基础医学实验技术基本操作技术溶液的配制缓冲溶液天津医学高等专科学校基础医学部生物化学教研室吕学儒基本操作技术溶液的配制缓冲溶液P39P40P8**实验一基本操作技术实验目的掌握玻璃仪器的清洗；学会正确使用吸量管、微量移液器、酒精计、粗天平的使用。玻璃仪器烧杯、试管、量杯、量筒、刻度吸量管、滴管等。**实验一基本操作技术一、玻璃仪器的洗涤与清洁（一）新购玻璃仪器的清洗清水冲沾洗衣粉刷清水冲蒸馏水洗（二）使用过的玻璃仪器清洗1.一般玻璃仪器清水冲沾洗衣粉刷清水冲蒸馏水洗2.容量仪器清水冲铬酸洗液浸泡清水冲蒸馏水洗3.比色杯清水冲盐

2、酸洗液浸泡清水冲蒸馏水洗**二、刻度吸量管的使用量取10ml以下的任意体积时用。刻度标记有两种：上为零刻度，下为总量刻度；上为总量刻度，下为零刻度的。放液后，将吸量管尖在容器内壁上垂直停留15秒即可。实验一基本操作技术**近年来为了便于准确快速地选取吸量管，国际标准化组织统一规定：在刻度吸量管的上方印上各种彩色环，以利辨别，其容积标志如下表：标准容量（ml）0.10.20.250.512510色标红黑白红黄黑红橘红环数单单双双单单单单实验一基本操作技术**实验一基本操作技术吸量管的使用选择执管取液调准刻度放液洗涤**三、微量移

3、液器的使用1.调体积选取钮至所需数值。2.套上吸嘴，旋紧。3.垂直持握微量移液器外壳，按下大拇指至取液按钮。4.将微量移液器吸嘴插入溶液，徐徐松开大拇指，使其复原。5.排放时，重新将大拇指按下，比取液时高一档以排空。注：移液过程中应控制速度，力度。如需移取另一样品，按吸嘴排放钮，更换吸嘴。实验一基本操作技术**四、酒精表的使用选择酒精表的测试范围在70%～80%v/v。在没有其他量器的条件下，将酒精以适量蒸馏水稀释，用酒精表检测浓度，当刻度指向75时即为消毒酒精。实验一基本操作技术**五、托盘天平的使用1．调零点2.称量称量时

4、，左放物，右放码。实验一基本操作技术**3.称量完毕砝码放回砝码盒中，游码移至刻度“0”处，天平的两个托盘重叠后，放在天平的一侧，使天平休止，以保护天平的刀口。实验一基本操作技术**实验目的熟悉三种浓度溶液配制；学习配制常用医用溶液一、仪器与试剂（一）仪器托盘天平、量筒（100ml、）、100ml烧杯、刻度吸管（10ml、5ml）、容量瓶（50ml）酒精计、玻璃棒、药匙、毛刷。（二）试剂95%乙醇、NaCl固体、新洁尔灭、TD。实验二溶液的配制**实验二溶液的配制1.75%酒精的配制：①用95%（ml/ml)酒精配制75%的酒

5、精50mL。②用酒精表测75%的酒精度2.配制0.1%新洁尔灭溶液50ml3.配制生理盐水50ml。4.制备1%TD消毒液10ml。溶液的配制与稀释**1.缓冲原理：NaH2PO4—Na2HPO4H2PO42-是抗碱成分HPO42-是抗酸成分在溶液加少量的碱时，OH-与H2PO42-电离产生的H+生成H2O，使溶液的PH值不发生明显变化。在溶液加少量的酸时，H+与HPO42-结合生成H2PO42-，溶液的PH值也不发生明显变化。所以，缓冲溶液具有抗酸、抗碱的作用。实验三缓冲溶液**实验三缓冲溶液2.配制缓冲溶液用刻度吸管取浓度

6、为0.2MNa2HPO45.0毫升，浓度为0.2MNaH2PO410.0毫升，混匀后用pH试纸测定其pH值。用刻度吸管取浓度为0.2MNa2HPO410.0毫升，浓度为0.2MNaH2PO45.0毫升，混匀后用pH试纸测定其pH值。问题：两种比例不同的缓冲溶液pH值为何不同？**3.缓冲溶液的抗酸、抗碱作用将制好的两种缓冲溶液各分成两份，分别加入少量盐酸及少量氢氧化钠溶液，用pH试纸测定其pH值。多加一些盐酸及氢氧化钠溶液后又有何变化，用pH试纸测定其pH值。实验三缓冲溶液**知识拓展酒精又叫乙醇，是最常用的皮肤消毒剂，75％

7、的酒精用于灭菌消毒；50％的酒精用于防褥疮；20％～50％的酒精擦浴用于高热病人的物理降温。不同浓度的酒精都是由高浓度(95％)酒精用蒸馏水稀释而成的。酒精之所以能消毒是因为酒精能够吸收细菌蛋白的水分，使其脱水变性凝固，从而达到杀灭细菌的目的。如果使用高浓度酒精，对细菌蛋白脱水过于迅速，使细菌表面蛋白质首先变性凝固，形成了一层坚固的包膜，酒精反而不能很好地渗入细菌内部，以致影响其杀菌能力。75％的酒精与细菌的渗透压相近，可以在细菌表面蛋白未变性前逐渐不断地向菌体内部渗入，使细菌所有蛋白脱水、变性凝固，最终杀死细菌，酒精浓度低于

8、75％时，由于渗透性降低，也会影响杀菌能力。**实验报告1.名称2.目的3.材料4.方法5.结果6.分析**ThankYou!天津医学高等专科学校基础医学部生物化学教研室吕学儒