西医综合考研——生化辅导课件

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1、DNA蛋白质复制转录反（逆）转录翻译RNA复制遗传中心法则第三部分基因信息的传递DNA复制要点一、DNA半保留复制二、DNA复制的酶学三、复制基本过程（端粒酶）四、DNA损伤（突变）及其修复五、逆转录及逆转录酶一、DNA复制的含义：DNA分子为模板合成新的DNA分子的过程，称为DNA复制。二、复制的方式——半保留复制指经复制后，子代DNA分子中一条链完整来自亲代DNA，而另一条链则完全重新合成，且与母链碱基互补。DNA的半保留复制DNA复制的酶学一、酶——DNA聚合酶（简称DNA-pol，全称依赖DNA的DNA聚合酶，DNA-de

2、pendentDNApolymerase,DDDP）主要特点：（1）催化53的合成方向（2）具核酸外切酶活性（3）底物——dNTP大肠杆菌DNA聚合酶35外切53外切酶活性酶活性功能种类DNA-polI校读、修复、填补缺口（催化延长约20个核苷酸）DNA-polII不详DNA-polIII复制真核生物DNA聚合酶酶活性53聚合酶活性35外切酶活性构成亚基数44425分子大小（kd）>25036-38163-300170256细胞内定位核核线粒体核核功能随从链修

3、复复制领头链校读、修复制（无其它复制复、填补DNA-pol时）DNA聚合酶通过其35核酸外切酶的作用发挥较正功能二、引物——寡聚核苷酸（RNA片段）三、模板——解开成单链的DNA母链为模板四、其它酶类和蛋白质因子解螺旋酶（即DnaB蛋白或Rep蛋白）——解开DNA双链。DnaA——辨认复制起始点。DnaC——协助解螺旋酶，使其在起始点上结合并打开双链。DNA拓扑异构酶——理顺DNA链，即通过切断、旋转和再连结作用，把正超螺旋变为负螺旋。单链结合蛋白（SSB）——稳定解开的单链DNADNA连接酶——催化复制中两条不连续的链片段

4、间的磷酸二酯键形成。解旋、解链作用DNA复制的基本过程起始延长终止5553335领头链随从链解链方向不连续复制复制叉冈奇片段连续复制起始点（Ori）复制叉与双向复制引发体的形成3、引物的生成起始复制方向（5`3`）（不）连续复制冈崎片段领头链随从链延长终止引物水解补缺连接端粒酶含义：它有蛋白质和RNA两部分组成，是一种特殊的反转录酶。它以自身的RNA为模板，在随从链模板DNA的3´-OH末端延长DNA，再以这种延长的DNA为引物，继续合成随从链，直至一定长度。端粒酶（真核生物）1、突变（基因突变）的含义——指DNA

5、分子（基因）上碱基的改变。2、分类：错配（点突变）——DNA分子上1个碱基的变异缺失——一个或一段核苷酸链片段的丢失插入——原来没有的1个碱基或一段核苷酸链插入分子重排（重组）——DNA分子内发生较大片段的交换。移位的DNA片段在新位点上可颠倒方向反置（倒位），也可以发生在染色体之间。DNA损伤（突变）与修复3、引发突变的因素（1）物理因素：紫外线和辐射——紫外线常发生嘧啶二聚体，致复制和转录受阻。（2）化学因素：化学诱变剂——5-溴尿嘧啶（5-BU）、羟胺类（NH2OH）、亚硝酸盐、烷化剂（氮芥类）等胸腺嘧啶嘧啶二聚体光修复酶4

6、、DNA损伤的修复：（1）光修复——通过光修复酶催化，使嘧啶二聚体解聚，但需要光照射（2）切除修复——特异核酸内切酶、DNA-polI和连接酶共同完成重组修复（3）重组修复——（4）SOS修复——细胞处危急状态的一种修复。此时可诱导一种可催化DNA合成的特殊酶，其对碱基识辨能力差，易出错。尽管如此，还是可以提高细胞存活率。逆转录作用——指以RNA为模板合成DNA的过程。逆转录酶——三种酶活性（1）RNA为模板催化DNA合成（2）水解杂化双链上RNA（3）DNA为模板催化DNA合成逆（反）转录作用和逆（反）转录酶起始点多点单点速度慢

7、（原核的1/10）快引物大小短（约10个核苷酸）长（约数十个核苷酸）冈奇片段少（约100~200个）多（约1000~2000个）酶DNA聚合酶-DNA聚合酶III端粒酶有无真核生物原核生物真核与原核生物复制的主要区别转录以DNA为模板合成RNA的过程,称为转录。要点1、RNA的不对称转录（转录的模板、酶及基本过程）2、RNA转录后的加工修饰3、核酶RNA聚合酶一、RNA聚合酶（全称依赖DNA的RNA聚合酶，DNA-dependentRNApolymerase,DDRP;亦称转录酶）特点：1、催化53的合成方向2、底物为NT

8、P3、摸板DNA4、不需要引物5、产物是RNA大肠杆菌RNA聚合酶组分及功能二、原核生物RNA聚合酶2——核心酶全酶亚基分子量功能36512决定哪些基因被转录150618与转录全过程有关（催化）‘155613结合DNA模板（开链）