露花微繁技术体系研究

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1、露花微繁技术体系研究摘要：以温室中生长的露花(MesembryanthemumcordifoliumL.f.)幼嫩茎段为外植体，利用正交试验等方法研究了露花微繁技术体系。结果表明，用70%〜75%乙醇浸泡30s、0.1%升汞浸泡6min对外植体消毒灭菌就能达到理想的效果；对于无顶芽茎段，丛生芽增殖最适培养基是MS+NAA0.05mg/L+6-BA0.9〜1.5mg/L+GA30.3mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L；而对于有顶芽茎段要达到相同增殖预期，则在其他成分不变的前提下，需要6-BA浓度达到1.5mg/Lo因此，无顶芽茎段更适合作为丛生芽增殖的培养材料;生根最适培养基是

2、1/2MS+IBA0.2mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L关键词:露花(MesembryanthemumcordifoliumL.f.)；组织培养；微繁技术；丛生芽增殖中图分类号：S649.1+2文献标识码：A文章编号：0439-8114(2016)14-3657-05D0I：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.14.029Abstract:Usingthetenderstemgrowingingreenhouseasexplants,orthogonaltestwasappliedtostudythemicropropagationtech

3、niquesystemofMesembryanthemumcordifoliumL.f.・Theresultsshowedthatdippingin70%to75%alcoholfor30sand0.1%mercuricchloridefor6minwou1dhadideasterilizationeffect・Fortenderstemwithoutterminalbudasexplants,theoptimalmediumforclumpbudproliferationwasMS+0.05mg/LNAA+0.9to1.5mg/L6-BA+0.3mg/LGA3+30g/Lsug

4、ar+7g/Lagar；whilefortenderstemwithterminalbud,the6~BAconcentrationshouldbe1.5mg/L.Therefore,tenderstemwithoutterminalbudwasmoresuitableexplantsforclumpbudproliferation.Theoptimalmediumforrootingwas1/2MS+0.2mg/LIBA+30g/Lsugar+7g/Lagar.Keywords:MesembryanthemumcordifoliumL.f.；tissueculture；micr

5、opropagationtechnique；clumpbudproliferation露花(MesembryanthemumcordifoliumLf・)又名/心叶日中花、露草、花蔓草、牡丹吊兰、樱花吊兰、太阳玫瑰等[1,2],为番杏科(Aizoaceae)日中花属(MesembryanthemumL.)多年生常绿草本植物，原产于非洲南部，现在国内多地都有栽培，通常栽培供观赏，是去除甲醛效果较好的常见居室观赏植物之一[3]；近些年也作为蔬菜食用[1,4,5],俗称田七菜、食用穿心莲；同时作为兼性CAM植物常被用于生理研究[6-8]o生产上常采用分株、抒插、播种等方法繁殖［1,2,

6、9］；国内自匡安秀等［10］首次报道露花通过幼茎、叶片诱导愈伤组织分化出根与芽进行离体培养以来，陈香波等［11］、王小红等［12］也对露花的组织培养及植株再生技术进行了探讨，都为露花的组培快繁奠定了基础。本试验以露花幼嫩茎段为外植体，在消毒方案筛选与初代培养、丛生芽增殖、试管内生根苗炼苗移栽等方面进行了探索，初步确立了露花微繁技术体系，不仅为其快速生产找到了新的途径，也为其生理生化研究带来了便利1材料与方法1.1材料供试材料露花来自河南农业职业学院科技园日光温室；2012年10月下旬，剪取生长旺盛的露花幼嫩茎段，迅速带回实验室1.2方法1.2.1外植体消毒与初代培养在实验室将露花

7、幼嫩茎段去叶留茎，流水缓慢冲洗lh,去离子水漂洗3次后带入无菌操作室，在超净工作台上用70%〜75%乙醇浸泡30s,迅速用去离子水漂洗2次，将水沥干；再用0.1%升汞（每升加1滴吐温80）分别浸泡6、8、10、12min,去离子水漂洗4次，最后用无菌滤纸吸干残留水分。在无菌条件下将消毒灭菌后的材料剪成1.5cm左右长的茎段，接种在琼脂含量为7g/L（下同）的固体MS培养基［13］上培养，培养基pH5.6〜6.0（下同）。培养条件为：温度25°C±2°C,光照度2000〜3000l