植物组织培养培养基

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1、植物组织培养培养基植物组织培养是将植物器官，组织，细胞或原生质体等外植体材料无菌培养下在人工培养基上，在适当条件下诱发长成完整植株的一种技术。植物组织培养包括：非试管微组织快繁，试管组织培养2类方法。非试管微组织快繁将外植体（一般要求带一叶一•芽）放置在室内外普通沙质培养基上进行培养，利用植物腋芽自然倍增达到快速繁殖的目的。一般植物7-15天可以长出根系。此技术投资低，操作环节少试管组织培养将外植体放置在试管等器II1L中在无菌的条件卜•进行组织培养获得试管苗植物组织培养理论基础：细胞全能性。优点：1•周期短，便于人工控制培养条件。繁殖速度快，经济效益高。2•占用空间小，不受

2、地区，季节限制。3.繁殖珍稀。濒危苗木和突变体，是优良品种培育的有效途径。4•利于保持原来品种的特性。接种室及培养室：一.培养基的组成、配制与灭菌培养基（medium）是植物组织培养的重要材料，是外植体生长的营养物质，只有配制出适宜的培养基，才能使组织培养获得成功。通常植物组织培养所用培养基包括以下六大类成分，即矿质营养、有机成分、植物牛长调节剂、碳源、琼脂以及其他附加物等。培养基的主要指标是营养成分及植物生长调节物质的浓度。（一）矿质营养：矿质营养乂称无机营养，是指植物牛长发育所需要的各种化学元索。矿质元索的生理作用：（1）组成各种化合物，成为结构物质；（2）构成特殊物质，

3、参与代谢；（3）维持离子平衡、胶体稳定及电荷平衡等电化学作用；（4）影响形态发生和组织、器官的建成等根据植物对元素的吸收量，可以把植物必需元素分为大量元素和微量元素。国际植物生理学会建议将植物所需浓度人于0.5mmol/1的的元素称为人最元素。低于0.5mmol/1的元素称为微量元素。大量元素包括C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、So其中C、H、O为气体兀素，其余八种为矿质元素，分别占植物干重的百分数为18%、10%、70%、0.3%、0.07%、0.3%、0.3%、0.07%、0.05%。微里元素包括Fe、B、Mn、Zn>Mo、Cu、Co、Cl等。1、人量元索：组织培养中

4、，各种矿质营养主要从培养基中获得，N、P、K、Ca.Mg、S等6利［大量元素依靠各种无机盐提供。不同植物种类和不同试验目的对元素的使用最要求不同，需经试验确定。目前已选择岀多种培养基配方用于植物组织培养。英中以MS应用最广泛。以MS为例6中矿质元素分别由KNO3、NH4NO3、KH2PO4、MgSO4.7H2O、CaC12.2H2O提供。3ft3-2养基的大量元素成分序号汉悟名称化学氏用址（mg/1）123・4cf*确離二魁钾二氛化韬KN。八,NHKH：POgMgSOt•tH3OCnCh-

5、的形式被使用，但鞍态氮浓度过高会对有些植物培养物造成伤害，不适宜使用过高的浓度。而常用MS培养基中既有硝态氮乂有钱态氮。2、微竝元素：植物组织的对其盂要虽极少，过多会产生毒害，如造成蛋白质变性、酶系失活。代谢障碍等。各种微最元素均具冇特定的生理功能，如硼与蛋白质的合成及糖类的运输存关；铜能促进离体根的形成；镒参与植物的光合作用和呼吸作用；钳为氮素代谢的重要元素。微量元素中，铁的用量较大，它对叶绿素的合成起重要作川，由于在较高pH下，FeC13极易形成Fe(OH)3沉淀，难以被吸收，所以多用乙二胺四乙酸二钠盐与硫酸亚铁形成的螯合物，并几单独配制。衷3—3MS培养基的微畳元素成分

6、用号汉悟名称化学武Jflft.e碘化钾KIii110.83・7确般HiBOaJ8MnSO<•1H1O,eZnSOi*tH2O8.3IQ,NajMoOi•2H：O0,2511CuSO<*sHsO0.(125121魚化姑CoCli*cH2O0.0-S—一(二)有机成分：主要包括各种维生素和氨基酸,如硫胺素(VB1)、烟酸(VB3)、毗哆醇(VB6)、泛酸钙(VB5)、牛物素、钻胺素(VB12)、叶酸等以及甘氨酸、谷氨酸、谷氨酰氨、精氨酸、天冬氨酸、天冬酰氨、丙氨酸等。有时添加水解乳蛋白或水解酪蛋白，为牛乳经酶法加工的水解产物，含有20种氨基酸的混合物，用量10-1000mg/L,

7、通常用于原生质体等培养。此外肌醇是另外一种重要的有机成分，又叫环己六醇，在糖类的转化中起重要作用，此外还参与磷脂代谢及维持离子平衡等牛理作用。363—5NIS珞养基的有机成分号汉iS名称化学氏RlUt15«环己六EDCtH.sOt•2H3O10016廿妹SB乙威〉NH>•CH3•COOH217盐腹雀枝秦(维生索BQCnHuClNtOS-HC110.118IfcftQ毗少87(檢生素BQC.HnOjN•HC110.510W®(Mt生JfiB,衣维生44PP》JNCtHiCOOHI0.9(三)植物生长调节物