《隐球菌临床推广》PPT课件

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1、天津市一瑞生物工程有限公司隐球菌抗原检测的临床意义一瑞生物隐球菌病感染诊断现状一产品介绍二适用科室及临床意义三相关标准四隐球菌为圆形菌体，外周有荚膜，内有反光孢子，但无菌丝。隐球菌属已知有37个不同的种，但具致病性的多为新型隐球菌，其特点是菌体由一层很厚的多糖荚膜所包被。新型隐球菌主要包括新生变种、格特变种等简介流行病学38个ICUsof27个意大利医院384例真菌感染(318例侵袭性念珠菌感染；63例霉菌感染；3例隐球菌感染)TortoranoAMetal.Mycoses.2011,55:73–79.HIV感染者器官移植患者接受大

2、剂量皮质类固醇或单克隆抗体（如阿仑单抗、英夫利昔单抗）和/或其他免疫抑制剂治疗的患者其他无基础疾病的患者JohnR.Perfect,etc.ClinicalInfectiousDiseases2010;50:291–322美国感染病学会的“隐球菌病治疗临床实践指南（2010年更新）”中指出，隐球菌病的易感人群主要包括：宿主因素流行病学随着AIDS患者的增多，各种机会性感染的发病率也随之上升，新型隐球菌成为继白色念珠菌之后最常见的机会性感染真菌，其在HIV中的感染率已达8.5%。隐球菌性脑膜炎发生率和死亡率在发达国家达到10-30%，

3、在发展中国家可达到50-100%。早期隐球菌感染临床表现缺乏特异性，脑脊液变化不典型，但是当发展为隐球菌性脑膜炎时，死亡率可达到20%。早期、快速、准确地诊断很有必要现有检测手段墨汁染色（菌体）真菌培养（活菌）ELISA（荚膜多糖抗原）乳胶凝集法（荚膜多糖抗原）胶体金法（荚膜多糖抗原）1.印度墨汁染色：敏感性差，阳性检出率很低2.脑脊液或血液培养（金标准）：阳性检出率低，培养（2-10天）及鉴定时间长，易误诊3.抗原检测试验：脑脊液和血清样本抗原检测的敏感性可达到97%和87%*，能实现早期快速诊断*TylerWarkentien,

4、MD.IntJSTDAIDS.2010October;21(10):679–684.现有检测手段隐球菌荚膜多糖抗原由3种不同的单糖聚合而成是引起病理变化的主要毒性因子在菌体生长和繁殖过程中，GXM不断分泌到胞外通过发挥免疫抑制作用和免疫调理作用影响宿主免疫系统OscarZaragoza,etc..AdvApplMicrobiol.2009,68:133–216隐球菌荚膜多糖抗原GXM(Glucuronoxylomannan,GXM)：荚膜多糖抗原是隐球菌特有的分泌物，可以作为隐球菌感染的诊断依据隐球菌病感染诊断现状一产品介绍二临床意

5、义及适用科室三相关标准四隐球菌抗原检测试剂盒（胶体金法）原理隐球菌抗原检测试剂盒（胶体金免疫层析法）试剂盒组成隐球菌抗原检测试纸条50条样本稀释液滴定液阳性对照稳定性/储存方法2年有效期室温储存特点无需样本预处理10分钟得到结果定性或半定量测定结果客观血清，脑脊液，血浆样本收集及制备按照无菌操作收集脑脊液、血浆和血清样本。样本最多可以在2-8℃放置72小时。不反复冻融的情况下，样本可以在-20℃以下保存更长时间。样本在运输过程中应保持在2-8℃或者-20℃以下。定性检测操作步骤简单5步，10分钟得到结果注意：若对照条带未出现，则说明

6、该检测无效，应重新检测。定性检测结果半定量检测操作步骤1、以1:5作为初始稀释浓度，依次1:2稀释至1:2560。分别放置于10个微离心管中并编号1-10。2、向1号试管中加入4滴样本稀释液。3、分别向标号2-10的试管中加入2滴滴定液。4、将40μL样本加入1号试管并混匀。5、从1号试管中吸取80μL样本混合液转移至2号试管并混匀，依次进行稀释直至10号试管。6、10号试管中吸取80μL样本混合液并丢弃以保证试管内最终体积为80μL。7、将试纸条的白端分别没入试管中。8、等待10分钟，读取并记录实验结果。半定量检测操作步骤半定量检

7、测操作步骤-2半定量检测(滴度)结果对于半定量滴定检测，患者的滴度应报告为产生阳性结果的最高稀释度。质量控制阳性对照：将1滴样本稀释液加入试管中，再加入1滴隐球菌抗原阳性对照。阴性对照为：将2滴样本稀释液加入试管中。分别插入试纸条，10分钟后读取结果。依据本地、国家的法规及认证机构的指导方针或要求，可能需要做额外的质控检测。胶体金法和培养/墨汁染色对比CrAgLFApackageinsert(IMMY)灵敏度特异性胶体金法试剂盒95.83%99.84%墨汁染色86.39%100.00%真菌培养60.72%100.00%胶体金法和EL

8、ISA/乳胶凝集法对比血清型灵敏度(ng隐球菌抗原/ml)A(新型隐球菌)B(哥特隐球菌)C(哥特隐球菌)D(新型隐球菌)IMMY胶体金法1198IMMY乳胶凝集法284738062ELISA2823>2,000770其他厂家乳胶凝集