温度、盐度、PH对三株鳖源性致病嗜水气单胞菌生长的影响【开题报告】

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1、毕业设计开题报告海洋渔业科学与技术温度、盐度、PH对三株鳖源性致病嗜水气单胞菌生长的影响一、综述本课题国内外研究动态，说明选题的依据和意义嗜水气单胞菌(Aeromonashydrophila)属气单胞菌目（Aeromonadales）、气单胞菌科（Aeromonadaceae）、气单胞菌属（Aeromonas）在自然界中广泛分布，普遍存在于淡水、污水、淤泥、土壤和人类粪便中，有有致病菌与非致病菌之分。致病性菌株可感染鱼类、两栖类、爬行类、鸟类和哺乳类等动物，临床上以急性出血性败血症为主要特征。慢性感染则主要表现为皮肤溃疡或肠炎。人亦可因致病性嗜水气单胞菌感

2、染而发生腹泻及食物中毒，是一种典型人-兽-鱼共患病病原菌，给人类的健康带来了威胁同时也给养殖业造成惨重的经济损失，危害性极大，而近些年又陆续有学者发现此细菌感染鸭子，鸡也是携带者。已引起国内外水产界、兽医学界和医学界学者的高度重视。欧美等西方国家对人源气单胞菌的研究较多，而中国、东南亚诸国等传统的水产养殖大国则更注重该菌对养殖鱼类的危害，目前国内外学者对嗜水气单胞菌的研究已有了很大进展。中华鳖的疖疮、红脖子、赤斑病并发症,是一种严重危害成鳖和亲鳖的暴发性传染病,死亡率可达20%~30%以上。其外部主要症状为背腹甲及四肢基部出现疖疮,内有米状物,严重者疖疮溃

3、烂成洞穴;颈脖红肿充血,伸缩困难;腹甲出现多个大小不一的红斑,并逐渐溃烂。孙其焕和肖克宇[1988],杨臣和曹生福[1988],肖克宇等[1991],孙佩芳等[1996],杨广等[1998]分别对鳖的赤斑病、红脖子病、疖疮病、穿孔病和红底板病的病原进行了初步研究,其病原均为嗜水气单胞菌。近年来由致病性嗜水气单胞菌引发的各种养殖经济动物疾病频发，其中中华鳖所涉疾病达15种之多。目前国内外对该菌的研究主要集中在毒力因子、致病力、致病特征、药敏特性等方面，而对该菌对理化因子的耐受情况鲜有报道，周光剑等研究了从患疖疮、红脖子、赤斑病并发症的病鳖肝脏中分离得到的一株

4、嗜水气单胞菌对温度、盐度、pH的耐受情况。通过对嗜水气单胞菌的耐受性研究，可以了解这种病菌在什么环境下容易爆发可能性大，从而作出对应的措施，控制温度，盐度，PH来减少其对养殖品种的影响,有效的预防和抑制疾病的发生和大规模爆发，造成不必要的损失。所以本研究以四株分离自患白底板病中华鳖体内的致病性嗜水气单胞菌为研究对象，连续监测实验菌24h生长周期内对所设温度、盐度、pH的耐受情况，旨在为致病性嗜水气单胞菌的研究提供基础资料，为中华鳖疾病的防控提供理论参考。二、研究的基本内容，拟解决的主要问题：本研究以3株分离自患白底板病中华鳖体内的致病性嗜水气单胞菌为研究对

5、象，连续监测实验菌24h生长周期内对所设温度、盐度、pH的耐受情况，得出该菌的各种适应理化因子的状况和不适合生长的状况，以及控制该病菌的最有效因子与不适合生长点，旨在为致病性嗜水气单胞菌的研究提供基础资料，为中华鳖疾病的防控提供理论参考。三、研究步骤、方法及措施：1、种子液的培养将活化后的实验菌接种于普通营养肉汤培养基，30℃恒温培养18h，备用。2、实验菌不同培养条件的设置温度的设置：4℃、10℃、20℃、30℃、35℃、40℃；盐度的设置：5，15，25，35，45，50；PH值的设置：4、5、6、7、8、9、10。3、培养条件的控制温度的控制：恒温培

6、养箱温度设置为30℃，冰箱温度设置为4℃，其他温度由不同温度的水浴锅控制；盐度控制通过调整培养基中Nacl的含量来控制，细菌培养温度均为30℃；PH值的控制通过向培养基中滴加1%的盐酸溶液或1%NaOH实现，并用PH计测定，实验培养温度为30℃。4、实验菌接种分别取培养好的种子液0.1ml依次注入各培养管，每个梯度设置三个平行，并用普通营养肉汤培养基做对照。5、实验菌生长曲线的绘制测定不同时间阶段各实验菌在OD600nm处的吸光度，以时间为横坐标，吸光度值为纵坐标，利用EXCEL数据分析软件绘制实验菌的生长曲线，探讨各种培养条件下细菌的生长情况。四、参考文

7、献周剑光、杨先乐、艾晓辉.对中华鳖疖疮、红脖子、赤斑病并发症的病原研究.水产学报，1999，23（3）：271-277；何鸣筱、叶巧真、陈诚、谢俊锋、何建国.嗜水气单胞菌外毒素和外膜蛋白双基因融合表达载体的构建和高效表达.水生生物学报，2004，28（2）：169-173；吴倩、闫芳、刘风波。嗜水气单胞菌的研究进展.兽医研究，2010，250：28-31；