Tune软件操作说明-Q-Exactive series

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1、1打开Tune软件2界面及图标介绍（1）ON、Standby、Off，启动扫描时选择On，待机选择是Standby（2）打开tune方法（3）保存tune方法（4）六通阀的切换，只用a，1是waste，2是inject（5）质谱注射泵，可以更改流速（6）三个灯都为绿色是正常状态，第1灯：指示仪器通讯是否正常，第2个灯：指示仪器硬件状态是否正常，第3个灯：指示仪器的性能状态是否正常。典型的变黄原因有：校正过期。建议重新校正，校正完成之后可恢复绿色。将鼠标放在上述的灯上即可显示变黄的信息提示。3Instrumentcontrol各项参数3.1Scanpara

2、meters（1）Scantype：分为FullMS-SIM和AIF-MS/MS；FullMS：一级全扫，要求Lastmass≤15*firstmassSIM：当fullmass的扫描范围小于50个质量数时，自动变为SIM。AIF：所有的离子全部碎裂，没有母离子的选择性，现在软件无法识别二级子离子是由哪个母离子产生的，所以暂时不用这种方法。MS/MS：设定center/width，或者scanrange，这里设置的是母离子的质荷比；（2）Scanrange：参考scantype，scantype中设置的是fullscan时，这里设置全扫的质荷比范围，如果

3、scantype中选择的是MS/MS，此处应设置子离子的扫描范围。（3）Fragmentation：分为sourceCID和NCE，一般做fullscan时此项是关闭状态SourceCID：源内裂解，主要用于打开二聚体等非共价结合的键。NCE：归一化碰撞能量。仪器校正后，每个特定质荷比的离子都有一个对应将其打碎的能量值，做小分子设为35；（4）Resolution：分辨率代表仪器将不同质量数离子分开的能力，QE可以达到14万，最低分辨率为1750。QE中一级扫描的分辨率一般设为70,000，二级分辨率设为17,500。（5）Polarity：正负扫描模式

4、的选择。（6）Microscan：将几张质谱图叠加，一般用1。（7）Lockmass：内标校正时使用，常用m/z455.120025作为内标物。（8）AGCtarget：Orbitrap容纳的离子数量，因为进入Orbitrap中的离子都带电荷，进入之后会相互干扰（这种现象称之为空间电荷效应），离子数量过多，会影响质荷比准65确度，通常一级扫描设为1*10，二级设为1*10。（9）Maxinjectiontime：MS1：100ms，MS2：50ms。（10）Hotlink：选中之后，修改参数只需要点击enter键就可以，如果不选中，点击enter之后还要

5、再点击apply，才能使用修改后的参数。3.2HESIsource：源区参数决定数据好坏、质量，离子信号强度；（1）Sheathgasflowrate：帮助溶剂气化，校正时用5~15，做样品时设为35~45；（2）Auxgasflowrate：气帘气，校正一般为0，做样品时设为10~15；（3）Sweepgasflowrate：吹扫气，流动相中加入不挥发性盐时开启此路气体，设为1~2；（4）Sprayvoltage：正离子模式3.5~4.5KV、负离子模式2.5~3.5KV（5）Spraycurrent：ESI喷雾离子所形成的电流反馈值，不能设置；换AP

6、CI源后该处电会自动变为DischargeCurrent，可设置；（6）Capillarytemperature：流速越高，温度越高，校正时，设为275℃，当链接色谱柱时，设为320℃；（7）S-lensRFlevel：一般为50~60（8）Heatertemperature：离子源的加热温度，当链接色谱柱时，设为200~300℃，校正时设置为0。（9）SourceAutoDefaults：根据流速自动调节参数，自动调节的气体流速偏大，一般不建议使用。3.3实时采集数据Acquisition（1）Fileinuse：上一次采集的数据（2）Destinat

7、ionfile：这次采集的数据保存路径及名称（3）Acquisitiontime：连续采集（4）Onstart：两个选项，don`twait：点击start就开始记录；waitforcontactclosure：需要有触发开始的信号（比方液相色谱的自动进样器等）才开始数据采集；4Tune（1）TIC：对一级谱图中总离子流图进行调谐，得到最佳的tune参数。（（（2））））Mass：对某一特定质荷比的离子进行调谐。（（（3））））点击Tune，自动调节离子源参数，使质谱信号最强。（（（4））））HCDMode：开启HCD对二级碎片进行调谐优化。5MassT

8、races（1）ScanNCE和ScanCE一般是输入感兴趣的碎片离子的m/z，