细胞工程简介d

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1、细胞工程简介一、细胞工程概念应用细胞生物学和的原理和方法，通过某种工程学手段，在整体水平或水平上，按照人们的意愿来改变细胞内的或获得产品的一门综合科学技术。分子生物学细胞细胞器遗传物质细胞二、细胞工程分类分为工程和工程。植物细胞动物细胞植物细胞工程常用技术手段和等，其理论基础是。动物细胞工程常采用技术手段、、、和。其中是基础。植物组织培养植物体细胞杂交细胞的全能性动物细胞培养动物细胞融合单克隆抗体胚胎移植核移植动物细胞培养三、比较（一）植物组织培养与动物细胞培养1、过程（1）植物组织培养再分化激素、需光脱分化激素、不需光离体的植物器官、组织或细胞愈伤组织根、芽胚状体

2、植物体↘↗回答：脱分化?再分化？愈伤组织？光？激素？（2）动物细胞培养动物胚胎或幼龄动物的组织、器官剪碎胰蛋白酶细胞悬浮液10代细胞40~50代细胞无限传代原代培养传代培养细胞株细胞系回答：原代培养、传代培养？细胞株、细胞系？2、原理（1）植物组织培养（2）动物细胞培养细胞全能性细胞增殖3、培养基（性质/特有成分）（1）植物组织培养（2）动物细胞培养固体/蔗糖、植物激素液体/葡萄糖、动物血清成分：矿质元素、维生素、蔗糖、植物激素和有机添加剂成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。4、取材（1）植物组织培养（2）动物细胞培养较幼嫩部位（无性生殖）/花药（有性生殖）

3、动物胚胎或幼龄动物的组织、器官分裂增生能力强5、培养结果（1）植物组织培养（2）动物细胞培养植物体（试管苗）/愈伤组织/胚状体细胞株/细胞系6、应用（1）植物组织培养（2）动物细胞培养①快速繁殖、培育无病毒植株（根尖、茎尖部位的细胞）②利用愈伤组织生产药物、食品添加剂、香料、色素、杀虫剂等③制造人工种子，解决有些植物结子困难、发芽率低、繁殖困难等问题④培养转基因植物此外还有单倍体育种过程中花药离体培养过程①生产蛋白质生物制品②培养皮肤细胞，为烧伤病人植皮③检测有毒物质（根据变异（染色体结构和数目变异）细胞占全部培养细胞的百分数，可以判断某种物质的毒性）④用于科学研究（生理

4、、病理、药理），为治疗、预防疾病提供理论依据7、相同点：适宜的外界条件（温度、pH、无菌等），营养物质、激素、离体等三、比较（二）植物体细胞杂交和动物细胞融合1、过程（1）植物体细胞杂交（2）动物细胞融合原生质体融合植物组织培养杂种细胞愈伤组织杂种植株酶解去壁促融脱分化再分化植物细胞A植物细胞B原生质体A原生质体BAB形成细胞壁细胞A细胞B促融AA、BB、AB筛选AB2、融合方法（1）植物体细胞杂交（2）动物细胞融合①融合前操作：②诱导融合：酶解法去除细胞壁（纤维素酶、果胶酶）物理方法：离心、振动、电刺激化学方法：诱导剂PEG①融合前操作：②诱导融合：胰蛋白酶处理获得单个

5、细胞物理方法：离心、振动、电刺激化学方法：诱导剂PEG生物方法：灭活病毒做诱导剂3、原理（1）植物体细胞杂交（2）动物细胞融合细胞膜的流动性、细胞全能性细胞膜的流动性4、结果（1）植物体细胞杂交（2）动物细胞融合经原生质体融合获得杂种细胞，组培后获得杂种植株获得杂种细胞5、应用（1）植物体细胞杂交（2）动物细胞融合育种（克服远缘杂交不亲和的障碍,扩大了可用于杂交的亲本组合范围）制备单克隆抗体2、特点：强，高。特异性灵敏度四、单克隆抗体3、制备过程1、概念：单个B淋巴细胞通过无性繁殖产生化学性质单一，特异性强的抗体。（理解：这种单一类型的只针对某一特定抗原决定簇的抗体分子

6、）抗原小鼠骨髓瘤细胞B淋巴细胞融合筛选杂交瘤细胞培养筛选产生特定抗体的细胞群扩大培养体外培养体内培养提取单克隆抗体培养液中提取腹水中提取（1）基础研究（2）诊断、治疗、预防疾病。例如：单抗诊断盒、“生物导弹”治疗癌症4、应用五、胚胎移植、核移植、胚胎分割移植体外受精早期胚胎培养移植新个体发育1、试管牛和试管婴儿（1）简要过程（2）生殖方式有性生殖（3）应用的技术手段动物细胞培养、胚胎移植（4）意义：试管牛：优良种牛的繁殖；试管婴儿：不孕不育2、克隆羊（1）简要过程（2）生殖方式（3）应用的技术手段无性生殖核移植、动物细胞培养、胚胎移植3、胚胎分割移植无性生殖植物体细胞杂交

7、单克隆抗体制备原理细胞膜的流动性、细胞的全能性细胞膜的流动性、细胞增殖融合前处理酶解法去除细胞壁（纤维素酶、果胶酶）注射特定抗原，免疫处理正常小鼠促融方法物理法：离心、振动、电刺激化学法：聚乙二醇物化法：同植物细胞生物法：灭活的病毒植物体细胞杂交和单克隆抗体制备过程第一步原生质体的制备(酶解法)正常小鼠免疫处理第二步原生质体的融合（物、化法）动物细胞融合（物、化、生法）第三步杂种细胞的筛选和培养杂交瘤细胞的筛选与培养第四步杂种植株的诱导与鉴定单克隆抗体的提纯意义和用途（1）克服远缘杂交不亲和的障碍，大大扩展杂交亲本的组合范围