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时间:2019-10-18
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1、黄鳝的人工繁殖实验设计方案一、实验时间有实验结果表明,雌黄鳝的卵粒直径、卵巢重量和成熟系数为6-7月达到最大值(图1),这是黄鳝卵巢发育的最佳时期;而精巢系数的变化不大,在0.16—0.44之间(图2),同样为6—7月达到最大值。因此黄鳝的人工繁殖时间选在6、7两个月份进行。二、实验计划1、前期准备鳝种选择:(体长、体重、种属…)雌性:体长35cm以下(最好26-30cm),腹部臌胀、透明,有明显的卵巢轮廓,体质健壮,无明显伤病。体重在90~150g之间。雄性:体长40cm以上,腹部不透明,体质健壮,活动能力强,无明显伤病
2、。体重在160~280g之间。从绝对繁殖力、相对繁殖力以及成熟系数来看,黄斑鳝的繁殖力最强,青黄斑鳝次之,青斑鳝最弱。所以亲鳝采用黄斑鳝。亲本雌鳝应选择26—30cm体长段的黄鳝,才能在整体上获得较高的怀卵量和仔鳝数。外观上雌鳝头较小、不隆起,体背青褐色、无斑点,性温和游态稳重,而且,成熟的雌亲鳝下腹部应膨大柔软,卵巢轮廓明显,腹部呈桔红色,稍透明,透过腹壁可见卵粒排列整齐,用手抚摩腹部则感觉柔软而有弹性,生殖孔微红肿。外观上雄鳝头较大、隆起明显,体背有色斑,活动能力强,腹部不膨大、有网状血丝纹,生殖孔红肿较突出。雄亲鳝选
3、择个体大些的,这些精巢内精子活动激烈。实验器材:(培养器材、观察器材、分析器材、预防器材…)解剖刀,小剪刀,5ml注射器和5号或6号针头,水葫芦若干,烧杯,量筒,玻璃棒,电子天平,研钵,胶头滴管,毛巾或着纱布,羽毛,温度计,pH试纸,恒温培养箱、显微镜。……实验药品:鱼用任氏液配方:NaCI0.78克CaCl20.021克NaHCo30.0021克蒸馏水100毫升KCI0.02克。催熟素:促黄体生成激素(LRH-A5)……催产素:促黄体生成激素(LRH-A5)、促黄体生成素释放激素类似物(LRH-A)、绒毛膜促性腺
4、激素(HCG),鲤、鲫脑垂体(PG),马来地欧酮(DOM)助产剂2#(HWHO-2)。催产药物的配制:LRH-A和HCG按产品包装标明的剂量换算,用生理盐水稀释溶解,达所需浓度。PG按所需剂量称出,放入干燥洁净的研钵中,干研成粉末。再加人几滴生理盐水研成糊状,充分研碎后加入相应的生理盐水,配成所需浓度的悬浮液。……消毒杀菌:对亲鳝、培养器皿、实验用具进行杀菌消毒,创造一个良好的环境,一提高实验的成功率。…….1、亲鳝处理催熟:(药品、用法、时间、判断…)催熟注射最佳时间在5月25日上午9时左右,水温260C。注射催熟针,旨
5、在提高黄鳝的性成熟度,每尾注射LRH-A512.5ug、药液量0.5mI,注射部位与方法:将黄鳝用千毛巾或纱布包好,防止其滑动,然后在腹腔注射,注射深度不超过0.5cm,注射后的黄鳝放回培养箱继续暂养。催产:(1)催产药物的种类及其剂量 黄鳝的催产药物可采用促黄体生成素释放激素类似物(LRH-A),绒毛膜促性腺激素(HCG),鲤、鲫脑垂体(PG)。注射剂量须根据水温、亲鱼的成熟度和亲鱼大小等情况灵活掌握。但诱导排卵效果以LRH-A5+DOM和LRH-A5+HWHO-2组合为最佳,HCG为最差。(2)催产时间根据卵细胞的形态
6、、大小和卵黄的分布,黄鳝的卵细胞可以分为五期:第I期为染色质核仁期;第II期为周边核仁期;第III期为初级卵黄期;第4期为次级和三级卵黄期;第5期为成熟期。其中第4期又可分为早、中、晚三期,在晚期的催产可达理想的效果。催产注射最佳时间在5月31日上午9时,水温250C。注射催产针,进行催产实验。黄鳝注射催产剂后48小时还没有开始达到效应时间,催产后72小时即己经逐步达到效应时间,而大部分在90小时开始排卵。(3)催产方法将选好的亲鳝用干毛巾或纱布包好,防止其滑动,然后在胸腔进行注射。针头先刺进胸部皮肤及肌肉,在肌肉内平行前
7、移约0.5厘米,然后插入胸腔注射,注射垂直深度不超过0.5厘米,注射药液量不超过1毫升。注射后的亲鳝放在培养箱中暂养,水深控制在20一30厘米,每天换水一次,大约换1/2水量。 由于亲鳝的大小和成熟度不一致,同批注射的亲鳝,其效应时间长短差别很大,因此要持续不断检查,在水温25℃左右时,注射40小时后每隔3小时检查一次。要检查到注射后80小时左右。检查的方法是:捉住亲鳝,用手触摸其腹部,并由前向后移动,如感到鳝卵已经游离,则表明开始排卵,应立即进行人工授精。(4)最佳催产剂量探索因催产剂量为80ug/g体重的DOM或0
8、.08ug/g体重+50ug/g体重的LRH-AS+DOM催产效果相对最好。所以设计实验(1)将黄鳝平均分成四组,第一组对照,催熟后,第二组注入70ug/g体重的DOM,第三组注入80ug/g体重的DOM,第四组注入90ug/g体重的DOM。(2)将黄鳝平均分成五组,第一组对照,催熟后,第二组注入0.0
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