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1、同工酶在疾病诊断中的应用1342905徐俊超摘要：同工酶是指能催化相同的化学反应、但酶蛋口的分子组成、分子结构和理化性质乃至免疫学性质和电泳行为都不相同的一-组酶，是牛:命在长期进化过程中基因分化的产物。本文主耍分析同工酶在骨骼、肿瘤、心血管疾病等方而的诊断作用,并阐述其医学意义。Abstract:Isozymereferstoasetofenzymecatalyzingthesamechemicalreaction,whosecompositionofzymoproteinmolecule,molecularstruct
2、ureandphysicochcmicalpropertiesandimmunologicalpropertiesandelectrophoreticbehaviorarenotthesame,whichisaproductduringthelongevolutionintheprocessofgeneticdifferentiationoflife>Thispapermainlyanalyzestheisozymeinsuchaspectsasbone,tumor,cardiovasculardiseasediagnos
3、is,andexplainsitsmedicalsignificance.1•同工酶在骨骼疾病诊断中的应用1.1同工酶在骨质毓松诊断中的应用1.1.1代表同工酶：骨碱性磷酸同工酶(BAP)1.1.2诊断方法及原理：先通过亲和层析法将BAP分离出來，再通过显色反应测定。骨质疏松患者由于骨量缺矢成骨细胞活性代偿性升高，而BAP是山成骨细胞分泌的酶，因此患者的BPA活性会相应地增高,能反应成骨细胞的活性，即BAP对骨质疏松的诊断阳性率最鬲，从而帮助诊断骨质疏松症。1.1.3医学意义:①骨密度测最在疾病阶段上侑局限性且花费昂贵。②
4、骨活检对人体有肓接损伤。③BAP的检测相比所受影响因素较多的钙、磷更能有效及时且稳定地反应骨形成率。④与广泛寻在于人体各组织器官中的ALP相比,BAP更貝有特界性。⑤BAP对■长吋间的冰冻储存和反复冻融的活性丢失少，在4°C、37°C和・40°C能分別保存16天、1天和10个月。⑴1.2同工酶在佝偻病诊断屮的应用1.2.1代表同工酶：骨碱性磷酸同工酶(BALP)1.2.2诊断方法及原理：取患儿末梢循环全血一滴，约30M进行BALP检测採用骨碱性磷酸酶(BALP)试剂盒，依据标准色板检验结果。正常参考值为<200U/L,20
5、0〜250U/L为可疑病例?>250U/L为诊断佝偻病的临界值。佝偻病患者体内缺乏维生素D,造成骨样骨细胞钙盐沉积不足，骨矿化减弱，使BALP异常升高。1.2.3医学意义：①佝偻病早期症状体征多缺乏特界性，易造成漏诊。②X射线摄片在激期之后才比较有意义,即在骨矿含量降至30%〜40%以下时才能发现界常，且X射线对婴幼儿伤害较大，家长较为抗拒。③BALP检测操作简便快捷、特异性高、町减少漏诊率，是临床一个准确口J靠的生化指标，对佝偻病早期诊断具有重要的指导价值，值得基层医院推广。⑵2•同工酶在肿瘤、癌症诊断中的应用2.1同工
6、酶在肿瘤诊断中的应用2.1.1代表同工酶：碱性磷酸酶(ALP)同工酣2.1.2诊断方法及原理：收集患者血清，先经ALP活性测定以及热失活的初步处理，然后用神经氨酸廿酶处理标本,最后用琼脂糖等电聚焦法进行各区带等电点的测定。神经氨酸井酶可切割ALP侧链的II垂液酸残基，使分子所带负电荷减少，从而使区带向阳极泳动速度减慢，用神经氨酸昔酶处理血清以后，再进行琼脂糖等电聚焦，能将混在一起的肝和骨ALP同工酶分成等电点不同的区带。2.1.3医学意义：①琼脂糖等电聚焦可以提高了灵敏度和分辨率，优化了分离，解除了早先琼脂糖电泳法、琼脂电
7、泳法等难以分离月T和骨同工酶等限制。②肿瘤患者的血清中存在有特殊区带，等电点为6.2的区带对诊断肿瘤具有参考价值。[3]2.2同工酶在肝癌和肝癌骨转移诊断中的应用2.2.1代表同工酶：碱性磷酸酶(ALP)同工酶2.2.2诊断方法及原理：采集患者的非抗凝空腹血3ML,分离血清,用神经氨酸首酶处理标本，再进行热失活,接着等电聚焦法(IEF)检测,测定肝脏疾病患者血清中的ALP同工酶，在肝癌患者中PI6.5的检出率明显较高，在肝癌骨转移者屮PI6.1的检出率也有显著增高。2.2.3医学意义：©ALP总活性升高无法判断其来源是肝还
8、是骨ALP』ljIEF可分离出4种亚型。②经改良的琼脂糖等电聚焦法相对现有分离ALP同工酶的方法操作更简便，价格更低廉，灵敏度更高,无需特殊的仪器设备，尤其适合于实验室诊断。③PI6.5亚型对作为肝癌鉴别诊断指标,P16.1亚型町作为肝癌骨转移鉴别诊断的指标。[4]3•同工酶在心血管系统疾病中的应用3.
