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1、学时分配：6学时实验目的和要求1.掌握竣基葱酿昔类及游离竣基葱酿的性质；2.通过本次实验了解人黄类药材中有效成分的含量测定方法。实验原理有色物质的溶液对不同波长的入射光线有不同程度的吸收，这是物质的性质。溶液颜色的深浅往往是溶液浓度高低的标志，而颜色的深浅与对一定波长的吸收度有关。因此，可以通过比较溶液对被吸收光的吸收度来测定溶液中物质的含量。实验条件1.仪器：分光光度计，移液管，容量瓶，锥形瓶，量筒。2.试剂:NaHCO3,10%FeCl3,浓盐酸，氯仿，0.5%醋酸镁甲醇溶液。实验内容1.对照品溶液及标准Illi线：精密称取1,8-二疑基恿酿2.5mg于25ml
2、容量瓶中，加氯仿溶解并加至刻度，精密吸取对照品溶液0.5,1,2,3,4ml,分别置于25ml容量瓶中，蒸去氯仿，加0.5%醴酸镁甲醇溶液至刻度，摇匀。以甲醇为空白，在515nm处测定，以吸收度为纵坐标，浓度（ug/ml）为横坐标,绘制标准曲线。2•定量分析精密称取药材粉O.lg,置100ml烧瓶中，精密加入水25ml,称定重量。直火加热15分钟，放冷，称定重量，用水补足至原重量，加碳酸氢钠50mg,摇匀，静置后用T燥滤纸滤过，弃去初滤液，精密吸取续滤液10ml,置100ml具塞烧瓶中，加10%FeCl3溶液20ml,回流20分钟，加HCllml,继续回流30分钟，
3、放冷，加入氯仿25ml,盖好瓶盖，用力振摇，转移至125ml分液漏斗中，使分层，分取氯仿层，再用20nil氯仿（洗涤烧瓶后）萃取一次，分取氯仿层与上次合并，并用水洗涤二次，每次用水15ml,将氯仿层用干燥滤纸滤过于50ml容量瓶屮，用氯仿洗涤滤纸，洗液合并于容量瓶屮，用氯仿稀释至刻度，摇匀。精密吸取5ml氯仿提取液，置25ml具塞烧瓶中，蒸去氯仿,放冷，精密加入0.5%醋酸镁甲醇溶液10mlo摇匀，以甲醇为空白，在515nm处测定吸收值，由标准曲线计算含量。实验记录1•绘标准曲线图。1.计算大黄屮结合蔥幅和游离大黄酸的总含量。思考题1.加水提取的是何类成分，加入10
4、%FeCl3的H的是什么？2.加入浓盐酸的目的是什么？3.用比色法测定蔥醜类成分应注意什么？Experiment1DeterminationoftheTotalContentofEffectiveComponentsinRadixetRhizomaRheibyColorimetricMethodClasshour:6Objectives1.Masterthepropertiesofcarboxylicanthraquinoneglycosidesandfreecarboxylicanthraquinones.2.Comprehandtheassaymethodofe
5、ffectivecomponentsinRadixetRhizomaRheithroughtheexperiment.PrincipleSolutionofcoloredsubstancecanabsorbbeamofdifferentwavelengthindifferentdegree,whichisoneofthepropertiesofsubstance.Thesolution'scoloralwaysindicatestheconcentration,whilethecolorisrelevanttotheabsorbanceatadefinitewave
6、length.Thus,wecandeterminatethecontentofsubstanceinsolutionbythemeansofcomparingtheabsorbanceofthelightabsorbedbythesolution.Conditions1.Apparatus:spectrophotometer,pipette,volumetricflask,conicalflask,graduatedcylinder.2.Reagents:NaHCC)3，10%FeC13,concentratedhydrochloricacid,chlorofor
7、m,0.5%magnesiumactateinmethanol.Procedure1.Preparationofreferencesolutionandstandardcurve:2.5mgof1,S-dihydroxy-anthi^aquinoneisaccuratelyweighedintoa25mLvolumetricflask,dissolvedinchloroformanddilutedtothevolume.Transfer0.5,1，2,3.4mLofthereferencesolutionaccuratelyinto25mLvolumetricf
