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时间:2019-10-18
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1、临床免疫复习临床免疫学简答:1、免疫器官的组成及主耍功能免疫器官是免疫细胞牛成、成熟或集中分布的场所,由骨髓、胸腺、脾、淋巴结、扁桃体组成:骨髓的功能:造血器官及各种免疫细胞的发源地;B细胞发育、分化、成熟的场所;再次免疫应答产生抗体的场所Z-;胸腺的功能:a・T细胞分化发育的场所经过发育形成合格的表达TCR、MHC限制性,自身耐受的单阳性T・C(CD4+或CD8+)输送到外周淋巴器官;b.分泌胸腺激素和细胞因子促进T细胞发育成熟,并分化为亚群;c.免疫调节功能通过TH与TS亚群进行免疫应答正负调节;通过分泌细胞因子和基质
2、细胞表达MHC分子,促进T分细胞分化成熟。d.建立自身耐受(屮枢耐受)和维持免疫自稳功能淋巴结的功能:a.过滤作用b.LC居留增殖场所c.产生特异性免疫应答:T细胞介导细胞免疫应答;B细胞介导体液免疫应答。d.:LC再循环是LC在血液和淋巴组织间反复的循环。深皮质区中的高内皮静脉(HEV)在淋巴细胞再循环起重要作用。脾脏的功能:a.过滤作用1b.LC居留增殖场所c.产生特异性免疫应答d.扁桃体的功能:可产牛淋巴细胞和抗体,具有抗细菌抗病毒的防御功能。2.机体免疫系统的三大功能及其异常表现免疫防御(Immunologicde
3、fence):是机体针对外來病原体的抗感染功能。正常时可防御病原体的感染;防御功能过强可产生超敏反应,过弱则表现为免疫缺陷或易受感染。免疫自稳(immunologichomeostasis):是免疫系统维持机体内环境相对稳定的生理功能。正常:可及时清除体内损伤、衰老、变性的血细胞和抗原一抗体复合物,而对自身成份保持免疫耐受;异常:可发生生理功能紊乱、自身免疫病等。免疫监^(immunologicsurveillance):是机体免疫系统识别、清除体内突变、畸变细胞以及被病毒感染细胞的牛理性保护作用。丧失:机体突变细胞失控,
4、可能导致肿瘤发生或出现病毒的持续感染。2.体液免疫与细胞免疫的关系4.IF、westernblot、ELISA的在应用中的区别2IF(免疫荧光Immunofluorescenee)是融合了免疫学原理(抗原抗体特异性结合)和荧光标记技术,通过荧光激发,来对组织(细胞)内抗原进行定位、定性及定量的研究(主要是定位)。样本是细胞或组织,要在显微镜下观察结果,可能出现膜阳性、质阳性和核阳性。ELISA(酶联免疫吸附试验)用到了免疫学原理和化学反应显色,待测的样品多是血清、血浆、尿液、细胞或组织培养上清液,因而没有用到组织包埋、切片
5、等技术,这是与免疫组化的主要区别,操作上开始需要将抗原或抗体结合到固相载体表血,从而使后来形成的抗原■抗体■酶■底物复合物粘附在载体上,这就是“吸附”的含义。免疫组化和elisa所用到的原理大致相同,只是因为所检测的样品不同,从而在操作方法上有所不同。ELISA多用于定量分析,其灵敏度非常高。westernbolt先要进行SDS-PAGE,然后将分离开的蛋白质样品用电转仪转移到固相载体上,而后利用抗原■抗体■标记物显色来检测样品,可以用于定性和半定量。•westernblotting可以看到特异性的条带,但是定量比较麻烦•
6、ELISA可以直接读出浓度,但是如果抗体有非特异性结合,那得到的数值就不可信;•WB只能半定量/旦是可以检测细胞膜蛋包这点ELISA做不到;•WB所检测的一般是抗原,而ELISA抗原抗体都可以检测;•WB所检测的抗原可以知道其分子量的大小,或是否是多聚体、降解产物等,一句话,WB可以确定所用抗体是与那种蛋白起作用的;而ELISA无能为力;•WB—次处理量就是一块胶版,10・20个样品最多了。ELISA—块96孔板一次可以处理96个样本,可以设置多个复孔、对照、梯度样等来提高检测的可信度;35.比较单抗与多抗6.免疫球蛋白的
7、结构与功能具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白称为免疫球蛋白。免疫球蛋白lg的基本结构:1)组成:lg是由两条相同的重链和两条相同的轻链借链间二硫键连接组成的四肽链结构2)可变区:①近氨基端(N端)L链的1/2(VL)和H链的1/4或1/5(VH)②超变区(HVR):在V区内氨基酸组成及序列变化最为剧烈的特定部位。③骨架区:lg超变区之外的部位,其氨基酸序列、组成相对保守,称为骨架区。稳定CDR结构,以利IgCDR与抗原决定簇精细特异地结合。3)恒定区:近竣基端(C端)L链的1/2(CL)和H链的3/4或4/5(CH)
8、1)较链区:位于CH1与CH2之间,富含脯氨酸,不易形成螺旋,易伸展弯曲,对蛋白水解酶敏感免疫球蛋白lg的生物学功能:1)抗体的屮和作用:①抗毒素与相应外毒素结合可发挥中和作用。②病毒中和抗体能阻止病毒吸附和穿入易感细胞。2)激活补体产生细胞溶解作用:①IgM、lgGl>lgG2、lgG3与病原体或靶细
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