临床免疫试验复习总结

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1、临床免疫常用实验操作步骤检测项目样本稀释比例加样孵育时间洗板酶反应洗板显色反应终止生物参考区间CCP(抗坏瓜氨酸肽抗体)1:100(稀释液)标准品(0,2,8,30,100,200U/ml)、质控、样本各100pl37°C1h5次酶结合物100pl,37°C,30min5次底物100pl,37°C,30min终止液100pl抗CCP<5U/mlPSA(总前列腺特异性抗原)—样本及4ng/ml标准品各100pl37°C30min5次酶结合物2滴,37°C,30min5次底物及显色剂各1滴,室温5-10min终止液1滴<4ng/mlHAV1:1000稀释后样本及质控

2、各加100卩1,阴性对照及阳性对照各1滴37°C20min5次HAVAg及酶结合物各1滴,37°C,20min5次显色剂A、B各1滴,37°C,10-15min终止液1滴抗HAV・IgM抗体1:1000阴性HCV阴性对照及阳性对照各100pl,其他各孔加入100pl样本稀释液后再分別加入lOpl样本或质控物37°C30min5次酶结合物每孔2滴,37°C,20min5次显色剂A、B各1滴,37°C,15min终止液1滴阴性HEV-lgM阴性对照及阳性对照各100pl,其他各孔加入100

3、41样本稀释液后再分别加入10pl样本或质控物37°C30min5次酶结合物

4、每孔2滴,37°C,30min5次显色剂A、B各1滴,37°C,15min终止液1滴阴性HEV-IgG阴性对照及阳性对照各100pl,其他各孔加入100卩1样本稀释液后再分别加入lOyl样本或质控物37°C20min5次酶结合物每孔2滴,37°C,20min5次显色剂A、B各1滴,37°C,10-15min终止液1滴阴性CEA(癌胚抗原)—样木及5ng/ml的标品50pl,加酶结合物1滴37°C1h机洗——底物及显色剂各1滴,室温,10min终止液1滴<5ng/mlAFP(甲胎蛋白)—样本及20ng/ml的标品50pl,加酶结合物1滴37°C15min机洗——底

5、物及显色剂各1滴,室温,10min终止液1滴<25ng/ml临床免疫常用实验注意事项项目检测方法及原理最低检测线质控品干扰反应复检结果处理备注HBsAgELISA双抗夹心法不高于0.5IU/ml1IU/ml1.溶血标本1(假阳性)2.类风湿因1.所有HBsAg阳性标本均用胶体金法复检;2.S/CO值在1.0-2.0之间1.检测采用双波长法,及450nm和630nm,用空白孔校零;2.S/CO值$1.0为阳性,S/CO值<1.0为阴1.HBV感染“窗口期”,HBsAg可以为阴性,而抗-HBc等其它HBV血清标志物则可为阳性;子2(假阳性)的标本;3.HBsAg与抗

6、・HBs同时阳性的样本;4.HbsAg单独阳性的样本;5.两对半结果模式比较特殊或结果有疑义时。性,S•样本OD值,CO二阴性对照OD值X2.1,注:阴性对照OD值20.05时以实际OD值计算,<0.05时以0.05计算。2.HBsAg阳性是HBV感染和携带的标志;3.急性肝炎HBsAg可在转氨酶升高前或症状出现前1-7周测出,发病3周时约有50%为阳性,高峰出现在感染后2-3个月,多数半年后消除,而后出现抗-HBs;4.HBsAg阳性时应检测ALT、AST、HBeAg和抗-HBc以判明传染性、活动性或HBV变异株感染。抗・HBsELISA双抗原夹心法20mIU

7、/ml30mIU/ml溶血标本(假阳性)1.HBsAg与抗-HBs同时阳性的样本;2.30mIU/ml质控品为阴性时,S/CO值在0.9-1.0的样本;3.两对半结果模式比较特殊或结果有疑义时。1.检测釆用双波长法,及450nm和630nm,用空白孔校零;2.S/C0值$1.0为阳性,S/CO值<1.0为阴性,s■样本OD值,CO二阴性对照OD值X2.1,注:阴性对照OD值20.05时以实际OD值计算,V0.05时以0.05计算。1.抗-HBs-般出现于乙肝患者恢复期,表明感染已终止;2.注射过乙肝疫苗的人抗・HBs也可为阳性。HBeAgELISA双抗夹心法2N

8、CU/ml1.溶血标本(假阳性)2.类风湿因子(假阳性)1.HBeAg单独阳性的样本;2.HBeAg与抗-HBc同时阳性的样本;3.两对半结果模式比较特殊或结果有疑义时。1.检测采用双波长法,及450nm和630nm,用空白孔校零;2$心3值上1.0为阳性,S/CO值<1.0为阴性,S-样本OD值,CO二阴性对照OD值X2.1,注:阴性对照OD值20.05时以实际OD值计算,<0.05时以0.05计算。1.HBeAg阳性为乙肝传染性标志,与HBV复制成正比,也与肝损害成正比;2.HBeAg检测有助于判断HBsAg携带者传染性的强弱,预测HbsAg携带者自然转阴的

9、可能性,判断母婴传播的危

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