禽病实验室诊断技术书稿

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1、—1—刖吞随着我国养禽业的迅速发展，新的疫病不断出现，发病儿率也逐年提高，并且混合感染和疾病的非典型化越来越多，随之禽病诊断遇到的新问题也越来越多，传统的模糊诊断已不能满足生产需要，疾病的确诊最后还要依靠实验室检验。为此，编者在多位专家的指导下，广泛听取基层工作者的意见，并参阅国内外相关材料，结合多年的经验总结，编写了这木《规模化禽场禽病实验室诊断技术》0全书共十一章。其中第一章至第六章，为禽病实验室诊断技术，包括实验室工作基本技术、培养基的制备技术、细菌的分离培养及鉴定技术、抗菌药物的敏感性及消毒药的筛选试验；第七章至第十章为家禽常

2、见病的实验室诊断，包括常见细菌性疾病的实验室诊断、病毒性疾病的实验室诊断、其他微生物性病的实验室诊断和寄牛虫病的实验室诊断；第十一章为饲料及饮水中微牛物的检测。编写本书旨在阐述诊断禽病的实验室基本操作技术，满足禽病工作者、实骑室检验工作者，尤其是现代化养禽场禽病实验室检验工作者的需要。由于时间仓促，编者水平有限，定有不足Z处，恳请批评指正，以便修订。第一章规模化禽场实验室的基本条件和工作技术第一节实验室的基本条件与结构一、基本条件禽病检验室通常包括实验室和无菌室（包括无菌室外的缓冲间）。这样划分并不是绝对的，可根据具体条件而定，但以下

3、几个方面的条件是不可缺少的。对各室的共同要求是高度的清洁卫生，也就是要尽可能地创造无菌条件。为了达到这个目的，房屋的墙壁和地板、使用的各种家具都要符合便于清洗的要求。另外，检验室必须具备保证显微镜工作、微生物分离培养工作及基本化学工作顺利进行的基本条件。如：(1)光线明亮,但避免阳光臣射室内;(2)洁净无菌,地面与四壁平滑，便于清洁和消毒;(3)空气清新,应有防风、防尘设备;(4)耍有安全、适宜的电源和充足的水源;（5）具备整洁、稳固、适用的实验台，台面最好冇耐酸碱、防腐蚀的黑胶板;（6）显微镜及实验室常用的工具、药品应设有相应的存放

4、橱柜。二、无菌室的结构与要求（一）无菌室的结构无菌室通常包括缓冲间和工作间两大部分。为了便于无菌处理，无菌室的面积和容积不宜过大，以适宜操作为准，一般可为9〜12n?。缓冲间与工作间二者的比例可为1：2.高度2.5m左右为适宜。工作间内设有固定的工作台、紫外线灯、空气过滤装置及通风装置；较为理想的应有空调设备、空气净化装置，以便在进行微生物操作时切实达到无尘无菌。工作间的内门与缓冲间的门力求迂回，避免直接相通，减少无菌室内的空气对流，以便保持工作间的无菌条件。窗户应装有两层玻璃，以防外界的微生物进入。（二）无菌室的要求（1）无菌室内墙

5、壁光滑，应尽量避免死角，以便于洗刷消毒。（2）应保持密封、防尘、清洁、干燥。（3）室内设备简单，禁止放置杂物。（4）工作台、地面和墙壁可用新洁尔灭或过氧乙酸溶液撩洗消毒。（5）杀菌前做好一切准备工作，然后用紫外线杀菌灯进行空气消毒。开灯照射30min后关灯，间隔30min后方可进入室内工作。（6）无菌室的大小，应按每个操作人员占用面积不少于3nF设置。（三）无菌室无菌程度的测定一般采用平板法：将己灭菌的营养琼脂培养基分别倒入己灭过菌的培养皿内，每皿约15mL培养基，启开皿盖暴露于无菌室内的不同地方，lOmin后，盖好皿盖。将培养皿倒置

6、于37°C培养箱内培养24h后，观察菌落情况，统计菌落数。如果每个皿内菌落不超过4个,则可以认为无菌程度良好，若菌落数很多，则应对无菌室进一步灭菌。第二节实验室的工作守则实验室检验是一项精确、细致、耐心的工作，作为禽病诊断检验室的工作人员，在工作过程屮既要遵守实验室的规则，防止污染，同时乂必须注意安全，防止被病原微生物感染。在开展检验工作时，应该注意下列事项：1.进入实验室应穿着工作服，进入无菌室应戴口罩、帽子，换专用鞋。2.实验室内要保持安静、有秩序，不要高声谈笑，影响实验。不准吸烟、饮食和会客。3.病料检验要体现快而准的原则，采集

7、或接到病料时应及时进行检查和病原分离培养。4.实验室应保持整洁和卫生。样品检验完毕后及时清理桌而，凡是要丢弃的培养物应经高压灭菌后处理，污染的玻璃仪器高压灭菌后再洗刷干净。器械使用后及时清洗干净并归纳整理，需要灭菌的器械应及时灭菌。药品和试剂使用后放冋原处，有毒和腐蚀性大的药剂残液应妥善处理，不得污染环境。5.实验室内应备有蹑子、剪刀、接种针、接种环等，每次使用前和使用后应在酒精灯火焰上烧灼灭菌。6.实验室内应备有盛放3%来苏尔或5%石炭酸溶液的玻璃缸，内浸纱布数块；备有75%酒精棉球，用于样品表面消毒及意外污染消毒，无菌室每次使用前

8、后，用紫外线灯照射。7.当致病性病原微生物材料污染台面、地面、衣着和器械时，应立即用3%的来苏尔或5%的石炭酸液消毒。如手指或皮肤被污染，应立即用0.1%的新洁尔灭或0.05%的百毒杀液洗涤，或用碘酒、酒精棉球搽拭。8.