高二生物选考辅导---专题--基因工程

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1、高二生物选考辅导专题基因工程核心知识点归纳：1.掌握基因工程的主干知识（1）目的基因的获収：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成（2）形成重组DNA分子：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等（3）将重组DNA分子导入受体细胞（4）筛选含有目的基因的受体细胞利用质粒上的抗性基因进行筛选（5）目的基因的表达：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入冃的基因一DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRA—分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质一抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等

2、。2.形成重组DNA分子过程我体（质粒）DZA分子（含日的基因）I同一种限制性核一

3、

4、酸内切酶切割n一个切口阿个切口两个粘性末靖获得目的基因IIjDNA连接酶•TtfllDNA（坏状讹纽质粒）精讲精练：题组一：1.不同生物的基因可以拼接的结构基础是；将人的胰岛素基因导入大肠杆菌细胞，如果大肠杆菌体内产生了人的胰岛素，这是因为人和大肠杆菌L限制酶在原核生物中的作用是2.（温州一模卷）下表为5种限制性核酸内切酶（以下简称''限制酶”）的识别序列和切割位点（箭头位置），BglUBbvC1Sau3AIBamH1B$t1识别序列和切割位点A1GATCTTCTAGTACC1TCAGCGGAGTICG1

5、GATCCTAG：GiGATCCCCTAG1GGiGATCCCCTAGJG某线性DNA分子含有4个BamHT的识别序列、4个BstI的识别序列，3个BgTII的识别序列；据此判断下列叙述中，正确的是（）A.该DNA分子能被Sau3AI切成12个片段B.一种特定序列只能被一种限制酶识别并在特定位点被切割C.两个能够互补配对的DNA片段所具有的粘性末端一定相同D.用BglTRBamHI两种限制酶和DNA连接酶对该DNA分子进行反复切割、连接操作,若干循坏后，BamHT的识别序列将少于4个3.用DNA连接酶把被限制性核酸内切酶I（识别序列和切点是一/GATC-）切割过的载体和被限制性核酸内切酶I

6、I（识别序列和切点是一GIGATCC-）切割过的目的基因连接起来后,该重组DNA分子能够再被限制性核酸内切酶II切割开的概率是（）A.1/2B.7/16C.1/16D.1/44.一环状DNA分子，设其长度为1,已知某种限制性核酸内切酶在该分子上有3个酶切点，如右图中A、B、C三处。如果该DNA分子在3个酶切点上都被该酶切断，则会产生0.2、0.3、0、5三种不同长度的DAN片段。现有多个上述DNA分子，如在每个分子上至少有1个酶切点被该酶切断；则从理论上讲，经该酶切后，这些DNA分子最多能产生长度不同的线状DNA的种类数是（）AA.5B.6C.7D.81.若要利用某目的基因(图甲)和Pi噬

7、菌体载体(图乙)构建重组DNA(图丙)，限制酶的酶切位点分别是ZfeVII(AGATCT)、Ec(^I(GAATTC)和I(GATC)。下列分析合理的)A.B.C.D.用屁oRI切割目的基因和P)噬菌体载体用Bgl\和EcoRI切割冃的基因和R噬菌体载体用加II和Sau3AI切割目的基因和Pi噬菌体载体用EcoRI和S加3AI切割目的基因和P：噬菌体载体2.GDNF是一种神经营养因子，对损伤的神经细胞具有营养和保护作用。研究人员构建了含血护基因的表达载体(如图1所示)，并导入到大鼠神经干细胞中，用于干细胞基因治疗的研究。请回答：反向连接注:bp虫示减歴刈我体和歴因斤段上的力、筋号禺1(

8、1)构建含基因的表达载体时，需选择图1中的限制性核酸内切酶进行酶切。(2)经酶切后的载体和00悄基因进行连接，连接产物经筛选得到的载体主要有3种：单个载体自连、弘*尸基因与载体正向连接、基因与载体反向连接(如图1所示)。为鉴定这3种连接方式，选择酚和BamHI酶对筛选得到的载体进行双酶切，并对酶切后的DNA片段进行电泳分析，结果如图2所示。图屮第泳道显示所鉴定的载体是正向连接的。切。(2)经酶切后的载体和00悄基因进行连接，连接产物经筛选得到的载体主要有3种：单个载体自连、弘*尸基因与载体正向连接、基因与载体反向连接(如图1所示)。为鉴定这3种连接方式，选择酚和BamHI酶对筛选得到的载体

9、进行双酶切，并对酶切后的DNA片段进行电泳分析，结果如图2所示。图屮第泳道显示所鉴定的载体是正向连接的。题组二：1•下列关于基因工程的载体的说法错误的是（多选）（）A.化学本质是D5IAB.质粒，噬菌体，动植物病毒可将外源基因载入到大肠杆菌等宿主细胞屮C.载体上的标记基因是一种抗性基因，有利于筛选含重组DNA的细胞D.载体至少含有一个限制酶的切点，便于外源基因的插入2.下图表示用化学方法合成目的基因I的过程。据图分析，下