2019高考生物二轮复习 专题七 选考 基因工程与克隆技术

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1、专题七选考基因工程与克隆技术1．(2018·天津高考节选)甲型流感病毒为RNA病毒，易引起流感大规模流行。我国科学家在2017年发明了一种制备该病毒活疫苗的新方法，主要环节如下。(1)改造病毒的部分基因，使其失去在正常宿主细胞内的增殖能力。以病毒RNA为模板，逆转录成对应DNA后，利用________技术扩增，并将其中某些基因(不包括表面抗原基因)内个别编码氨基酸的序列替换成编码终止密码子的序列。与改造前的基因相比，改造后的基因表达时不能合成完整长度的________，因此不能产生子代病毒。将该改造基因、表面抗原等其他基因分别构建重组质粒，并保存。(2)构建

2、适合改造病毒增殖的转基因宿主细胞。设计合成一种特殊tRNA的基因，其产物的反密码子能与(1)中的终止密码子配对结合，并可携带一个非天然氨基酸(Uaa)。将该基因与________连接后导入宿主细胞。提取宿主细胞的________进行分子杂交鉴定，筛选获得成功表达上述tRNA的转基因宿主细胞。(3)利用转基因宿主细胞制备疫苗。将(1)中的重组质粒导入(2)中的转基因宿主细胞，并在补加__________的培养基中进行培养，则该宿主细胞能利用上述特殊tRNA，翻译出改造病毒基因的完整蛋白，产生大量子代病毒，用于制备疫苗。特殊tRNA基因转录时，识别其启动子的酶是

3、________(单选)。A．病毒的DNA聚合酶　　　B．宿主的DNA聚合酶C．病毒的RNA聚合酶D．宿主的RNA聚合酶解析：(1)体外进行DNA扩增采用的技术手段是多聚酶链式反应(PCR技术)。将基因内个别编码氨基酸的序列改造成编码终止密码子的序列后，在翻译时终止密码子提前出现，不能合成完整长度的多肽(或蛋白质)。(2)为了使目的基因能够在受体细胞中稳定存在并正常表达，需要将目的基因与载体连接后导入宿主细胞。利用分子杂交技术，鉴定筛选获得成功表达目的RNA的细胞时，需提取宿主细胞的总RNA。(3)将(1)中的重组质粒导入(2)中的转基因宿主细胞，宿主细胞内

4、由于没有Uaa，翻译将会在终止密码子处停止，将不能翻译出改造病毒基因的完整蛋白，所以要想翻译出完整蛋白，需要在培养基中加入Uaa。转录时，识别启动子的酶为RNA聚合酶，因为转录在宿主细胞中进行，所以转录用的酶为宿主细胞的RNA聚合酶。答案：(1)PCR　多肽(或蛋白质)　(2)载体　总RNA　(3)非天然氨基酸(Uaa)　D　2．如图表示科学家培育耐寒生物的过程，请回答下列问题：(1)从cDNA文库中获取的目的基因________(填“有”或“无”)启动子。实现①过程常用________技术，该技术的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便合成_____

5、___。(2)②表示___________________________________________，其中标记基因的作用是________________________________________________________________________。(3)转基因技术是否成功，需要对受体细胞进行分子水平的检测，首先是用DNA分子杂交技术检测受体细胞染色体的DNA上是否插入目的基因，这种方法需要遵循___________________________________________原则。(4)若要培育抗冻能力强的转基因羊，可将鱼的抗冻蛋

6、白基因导入羊的________中，培育该转基因羊的最后一道“工序”是胚胎工程的________________________________技术。解析：(1)用某种生物发育的某个时期的mRNA反转录产生的多种互补的DNA片段，与载体连接后储存在一个受体菌群中，这个受体菌群就叫这种生物的cDNA文库，cDNA文库中没有基因的启动子，获得更多目的基因的方法是PCR技术。该技术的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便合成引物。(2)②表示基因表达载体，其中标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因。(3)DNA分子杂交技术遵循碱基互补配对原则。(4

7、)目的基因导入受体细胞，若受体细胞为动物细胞受精卵，则培育该动物的最后一道“工序”是胚胎移植。答案：(1)无　PCR　引物　(2)基因表达载体　鉴别受体细胞中是否含有目的基因　(3)碱基互补配对　(4)受精卵　胚胎移植3．紫杉醇是最有效的抗癌制剂之一。生产紫杉醇的主要原料是天然生长的红豆杉树皮，而大量剥取树皮会造成树木死亡和资源破坏。请回答下列问题：(1)科研人员尝试从红豆杉的愈伤组织中提取紫杉醇，可采用________________技术来获得红豆杉的愈伤组织。由红豆杉叶肉细胞得到愈伤组织的过程叫______________________________

8、__________________________