液相色谱分析混合样品中的苯和甲苯

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1、液相色谱分析混合样品中的苯和甲苯一、实验题目：液相色谱分析混合样品中的苯和甲苯二、实验目的：1.掌握高效液相色谱仪的原理和仪器构成。2.了解样品处理、测定和数据处理的全过程，掌握标准曲线定量方法。三、实验原理：高效液相色谱和其化液相色谱技术一样，其基木原理：利用欲分离的诸组分在固定相和流动相间的分配有差异（即有不同的分配系数），当两相作相对运动时，这些组分在此两相中的分配反复进行，从几千次到百万次，即使组分的分配系数只有微小差异，随着液体流动相移动却可以有明显的差距，最后使这些组分都得到分离。高效液相色谱法是常用的分析方法，由于组分在固定相和流动相之间的分配系数不同，导致组分在固

2、定相上的保留程度不一样。按分离原理可将HPLC分为分配色谱、离子交换色谱、离子色谱、尺寸排阻色谱和亲和色谱等。本次实验是利用分配色谱原理，根据各待测物在互不相溶的两相中的溶液解度不同。因而具有不同的分配系数。在色谱柱中，随着流动相的移动，这种分配平衡需用进行多次，造成各待测物的迁移速率不同，从而实现分离的过程。四、仪器与试剂1.仪器高效液相色谱仪；微量注射器（1PL）；贮液胶管。2•试剂甲醇（分析纯）、苯（2uL/L）、甲苯（2uL/L）、苯与甲苯（2UL/L）、苯与甲苯（4UL/L）、苯与甲苯（lOuL/L）、样品。五、实验步骤与内容1.仪器操作：依次打开高压泵、检测器、工作站

3、。参考色谱条件：流动相、甲醇-水、等梯度洗脱、流速、柱温、进样量（10uL）、紫外检测波长。2.仪器达到稳定后，依次注射不同浓度的苯溶液、甲苯溶液、及苯与甲苯的混合溶液，根据计算机给出的数据，以溶液的浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标绘制标准曲线。同时根据样品的峰面积在曲线上查出样品屮苯与甲苯的浓度。3.实验完毕，清洗色谱系统后，关机。六、数据的记录及结果分析1751501007550250-25254nm.4nm(1.00)oIFTr90-80160r50r407030■20104：00：02：030苯(2uL/L)5.0minmAU甲苯(2uL/L)mAU450-54nm,4nf

4、n(1.00)400350-3«25020015010G500•50苯与甲苯(2uL/L)%-90-80-70-60-50-40-30-20-100.01.02.03.0苯与甲苯(4uL/L)4.0I5.0min苯与甲苯(10uL/L)90mAU5080706040302010样品结果分析：根据实验原理，各待测物在互不相溶的两相溶解度不同，具有不同的分配系数，在色谱柱中，随着流动相的移动，这种分配平衡需进行多次，造成各待测物的迁移速率不同。先用已经知浓度的甲苯、和苯分别通入色谱柱，得知苯在1.660min时流出,甲苯在4.711min时流出，因此可由此判断下面的图谱中3.660m

5、in附近的为苯,4.711min附近的为甲苯。根据不同浓度的苯与甲苯的混合溶液和峰面积作工作曲线：苯与甲苯的标准曲线如下条：10000000-

6、■9000000-■8000000-■7000000-■6000000-■5000000-■4000000-■3000000-■2000000-■1000000-■苯•甲苯LinearFitofData1BLinearFitofData1D246810浓度苯的曲线方程为：y二306378+556163.5*X相关系数r=0.99929甲苯的曲线方程为：y=376504.76923+862375.73077*X相关系数r=0.99957根据

7、标准曲线的方程，可求出样品中苯的含量为3.16UL/L,甲苯的含量为3.09uL/Lo