分子诊断学笔记

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1、[1]原核生物基因组原核生物主要包括、细菌、支原体、立克次体、衣原体、螺旋体、放线菌、蓝绿藻等有关质粒按质粒的功能分类：致育质粒F质粒）编码性菌毛，介导细菌Z间的接合传递；耐药性质粒R质粒）编码细菌对抗菌药物或巫金属盐类的耐药性；毎力质粒Vi质粒）编码与该菌致病性有关的毎力因子；细菌素质粒编码细菌产生细菌素；代谢质粒编码产牛:相关的代谢酶。按复制机制分类：1、严紧控制型拷贝数少，一般〈10个，分子量大；调节因子是蛋白质，复制受限，受染色体IKA复制系统的控制；严谨控制机理（低拷贝原因），认为是该质粒可以产生阻遏蛋白

2、，反馈抑制£1身DNA合成。2、松弛控制型拷贝数多，10-200个，分子量小；调节因子是RNA,复制不受染色体DNA复制系统限制基因T程使用松弛型（高拷贝数）质粒，以获得较多的基因产物。性质：1、转移性：可以通过转化、转导或接合作用而由一个细菌细胞转移到另一个细菌细胞中，使两个细胞都成为带有质粒的细胞；质粒转移时，它可以单独转移，也可以携带着染色体（片段）一起进行转移，所以它可成为基因工程的载体。2、质粒具有选择性标记：质粒有抗药性基I人1、营养缺陷型基因、抗重金屈盐基因等多种选样性标记；3、质粒的不相容性：同一类

3、群的不同质粒-•般不能在同一菌株内稳圧共存；4、自主复制性：能独立于宿主染色体DNA外独立复制（但也必须在宿主细胞内才能复制）；质粒己成为分子克隆的有用工具，是目的DNA的载体。载体质粒人多是在天然质粒基础上经人工构建而成，质粒的一些特点：1、有限制性核酸内切酶单一切口，可用以重纽外源DNA；2、有筛选标记，如抗药基因等；3、插入外源DNA后，仍能转化宿主细胞，并能复制。质粒基因转移的方式：1、接合作用当细胞与细胞、或细菌通过菌毛相互接触时，质粒DA从一个细胞（细菌）转移至另一细胞（细菌）的DNA转移称为接合作用

4、2、转化作用通过自动获取或人为地供给外源DM,使细胞或培养的受体细胞获得新的遗传表型，称为转化作用3、转导作用当病毒从被感染的（供体）细胞释放出來、再次感染另一（受体）细胞时，发生在供体细胞与受体细胞Z间的DNA转移及基因重组即为转导作用4、转染作用通过感染方式将外來DNA引入宿主细胞，并导致宿主细胞遗传性状改变的过程称为转染（transfection）。转染是转化的一种特殊形式。完整的病毒颗粒包括：衣壳、基因组（DNA或RA）、被膜、病毒颗粒中的其他内容物病毒分段基因组：流感病毒属分段R7A病毒意义：a）降低包

5、装压力b）降低了造成断裂的可能性，提高编码能力c）有分段基因组的病毒一般感染效率较低，只有全部基因组核酸片段存在时，病毒才具有感染能力。植物病毒d）由于分段基因组易发生重组，故病莓容易变异。病毒基因纽•特点:1、5'的帽子和3，的poly（A）尾结构2、末端重复序列结果：粘性末段、止/反向互补序列、长末端重复序列；3、高效基因组：排列紧密很少间隔区，不仅非编码用列少，而且冇重蔭基因的存在;4、分段基因组:易重组,是病毒易变异的原因。真核生物基因组染色体的包装：（1）染色体的一级结构一核小体（2）染色体的二级结构一螺

6、线管（3）染色体的三级结构一超螺线管（4）染色体的四级结构一染色单体真核生物染色体基因组一般特征1、真核生物的基因组比饺庞大；2、线性双链DNA和二倍体；3、真核细胞基因转录产物为单顺反子。4、存在重复序列，觅复次数可达百万次以上5、基因是不连续的（断裂基因）重复序列：指多拷贝的相同或近似序列的DNA片段一、高度重复序列，按其结构特点分为三种：1、反向重复序列2、卫星DNA山于这类用列的碱基组成不同于具他部份，可用等密度梯度离心法将具巧主体DNA分开，I大I而称为卫星DMA（或随体DNA）3、较复杂的重复单位组成的

7、重复顺序二、中度重复顺序:依据重复顺序的长度，中度重复顺序可分为：短散布元件和氏散布元件Alu家族：是哺乳动物基因组屮含量最丰富的一种屮度重复顺序家族（短分散元件），Alu家族毎个成员的长度约300bp,每个单位长度屮有一个限制性内切酶AluI的切点（AGICT）,Alu可将其切成长130和170bp的两段，因而定名为Alu序列（或Alu家族）线粒体DNA的遗传特性：母系遗传、突变率高、异质性、阈值效应、半自助复制与协同效应阈值效应：mtDNA突变导致氧化磷酸化水平降低，半突变的mtDNA达到一定比例时，使得线粒体

8、总的能量供应降低到维持组织止常功能所需能量的最低值时，才可能引起某组织或器官的功能异常而出现临床症状。DNA分子多态性的主耍方式：微卫星DNA多态性（同一位点不同个体之间有不同长度的微卫星DNA,STR）、单个核昔酸的变界一单核昔酸多态性（SNP）等1、微卫星DNA乂称短串联觅复STR,指以1—6个碱皋为核心单位串联重复血成的一类序列。微卫星DNA结构用列山