欢迎来到天天文库
浏览记录
ID:43745167
大小:1.22 MB
页数:94页
时间:2019-10-13
《【精品】补充网络材料》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、第二章基I大I和基因衣达5一、染色体外的遗传物质——质粒51.质粒的概念与遗传控制52.质粒的类型53.质粒的遗传控制5二、转位基因61.插入序列62.转座子73.可转座的噬菌体7第三章核酸的分离与分析7一、核酸探针的制备7(一)探针的种类及其选择8(二)各种标记物及其选择81.放射性核素82.非放射性标记物9(三)探针的标记方法101.切口平移法(nicktranslation)102.随机引物法(randompriming)113.末端标记法114.生物素探针的化学标记方法12(四)非放射性标记探针的检出121.杂交体与检
2、出系统专一性的偶联122.显色13二、核酸杂交种类与方法13(一)膜上印迹杂交131.固相支持物的选择132.硝酸纤维素滤膜(nitrocellulosefiltermembrane)143.尼龙膜(nylonmembrane)144.化学活化膜(chemicalactivatedpaper)155.滤纸15(一)SouthernC卩迹杂交流程151、Southern印迹杂交分析主要包括以下主要步骤:152、具体操作方法与步骤15第四章核酸分子的酶切、连接和修饰19一、DNA聚合酶191、大肠杆菌DNA聚合酶1202>大肠杆菌
3、DNA聚合fWIKlenow片段(Klenow酶)203、T4DNA聚合酶204、TaqDNA聚合酶215、肌DNA聚合酶216、逆转录酶21二、核酸外切酶22三、其他类型核酸内切酶231.S1核酸酶232.绿豆核酸酚233.Ba/3123四、琼脂糖酶23第五章基因工程载体24一、质粒的牛物学特性241.质粒的转移性242.质粒的不相容性24二、pSClOl质粒载体25三、M13噬菌体载体251.M13噬菌体的生物学特性252.M13噬菌体载体的构建263.常用的M13噬菌体载体274.M13噬菌体载体优缺点275.M13噬菌
4、体载体的应用27四、噬菌粒载体28五、代表性的原核表达载体301.非融合型表达蛋白载体pKK223-3302.分泌型克隆表达载体pinlll系统313.融合型蛋白表达载体pGEX系统314.包涵体表达载体31六、人工染色体载体321.噬菌体P1衍生的人工染色休(PAC)322.哺乳动物人工染色体(MAC)32第六章口的基因克隆33一、DNA合成的原理33(一)发展历史331.早期研究与H-亚磷酸酯(H-phosphonalc)的合成332.磷酸二酯合成343.磷酸三酯合成344.亚磷酸三酯合成35(二)核序亚磷酰胺构件35(三
5、)固相合成支持物35(四)固相合成循环36(五)合成后处理37二、cDNA文库的种类371.标准化cDNA文库372.差减cDNA文库383.固相cDNA文库384.微最RNA的cDNAPCR文库395.酵母双杂交文库396.RACEcDNA文库397.限制性cDNA文库391.mRNA差异显示文库39三、DDRT-PCR技术的改进39四、随机突变41(一)紫外线诱变41(二)X射线的诱变42(三)热的作用机理42(四)化学诱变剂的作用42(五)使用致病菌株43(六)PCR介导的随机突变43(七)DNA改组44第七章原核基因工
6、程45一、相关发酵的反应器451.机械搅拌发酵罐46二、发酵条件与控制491.培养基的影响502.接种量的影响503.温度的影响514.溶解氧的影响511.pH的影响522.诱导时机的影响523.发酵过程最优化控制52第十章植物基凶工程53一、tDNA转移53二、一元载体和双元载体551.一元载体系统552.双元载体系统56三、转基因植物筛选与鉴定——gus基因的检测561.X-Gluc的组织化学染色定位法572.4-甲基伞形酮酰-卜葡萄糖醛酸昔的荧光法测定GUS活性573.对硝基苯-卩-匍萄糖酸昔的分光光度法58四、植物基因
7、工程应用举例581.控制果实成熟的转基因植物582.抗病毒植物育种583.转基因花卉植物594.利用转基因植物牛产有重要价值的药用蛋白60笫十一章基因工程相关新技术61一、基因组61二、基因组结构611•人类基因组612.原核生物基因组特点623.真核生物基因组特点63三、基因组功能651.DNA结合蛋白的功能651.转录起始是基因表达的第一步662.RNA和蛋白质组的合成与加工663.基因纽活性的调节66四、基因组进化的分子基础67五、基因组与生物迓化67第十二章重组DNA技术的应用68一、基因治疗的常用载体系统68(一)逆
8、转录病毒载体681.逆转录病毒载体的构建682.逆转录病毒载体的优缺点69(二)其他病毒载体691.腺病毒692.腺相关病毒703.其他70(三)脂质体70(四)裸DNA71二、蛋白质定向改造的方法711.M13DNA介导的寡核甘酸定点诱变712.PCR扩增技术介导的寡核苛酸
此文档下载收益归作者所有