资源描述：
《新课标高中生物选修3》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、选修3复习学案本模块知识内容的构建顺序:-、基因工程（一）基因工程的概念概念：基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外时重组和转基因技术，赋了牛•物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DbA分子水平上进行设计和施工的，乂叫做Dig重组技术。原理：基因重组（二）基因工程的基本工具1•“分子手术刀”——限制性核酸内切酶C限制酶》（1）來源：主要是从原核生物中分离纯化出來的。（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种贷定的核苻酸序列，并11使何:一条链中賛定部位的两个核苜酸Z间的磷酸二酯键断开，因此具冇专一性。（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末
2、端通常有两种形式：黏性末端和平末端,2.“分了缝合针”——Z连接酶（1）两种DNA连接酶（大肠杆菌、T4噬菌体）的比较:①相同点：都缝合磷酸二酯键。②区别：E・coliDNA连接酶來源于大肠杆菌,只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T』NA连接酶能缝合两种末端,但连接平末端的之间的效率较低。（2）与DNA聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只能将单个核苔酸加到已有的核昔酸片段的末端,形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个DtS片段的末端,形成磷酸二酯键。3.“分子运输车”一（运》载体（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存,②具有一至多个限制酶切点，供外源DT4
3、片段插入。③具有标记基因，供重组臥的鉴定和选择°④对受体细胞无害。（2）最常用的载体是质粒，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状DT4分子。（3）其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒（三）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1.忖的基因是指：编码蛋白质的结构基因，探原核细胞的基因结构与真核细胞的基因结构的异同点真核细胞基因结构要比原核细胞的基因结构复杂，编码区间隔的、不连续，能够编码蛋□质的序列被不能够编码蛋白质的序列分隔开来，成为一种断裂的形式，分为：外显了：能够编码蛋口质的序列；内含子：不能够编码蛋口质的序列一、煤核细胞的茶因结构■-非编玛
4、区-.ztiry——-齐编码区f-anmiA.■编码区上游编码区下游调抉遗传佰息的表达RNA聚合瞬结合仗点♦编码资白质二、其核细鬼的基因结构调控遗传住息的表达—非编加区一
5、編碣区上游外显子内含子RNA聚合聲给合位点2.目的基因的获取方法：从基因文库中获取（基因组文库、CDNA文库）用化学方法直接人工合成用PCR技术扩增目的基因3.PCR技术扩增目的某因（1）原理：DbA双链复制（2）过程：人工合成目的基因：當用的方法有化学合成法和反转录法。化学合成法I：蛋白质分析》氨基酸序列°>RNA喊基序列O）>DNA碱基序列一用4种脱氧核昔酸人工合成目的基因阪转录漓:分离出供体细胞H1RNA逆转录酿》单链
6、DMA——缪透込Lt合成目的基因第一步变性：加热至90〜95°CDNA解链；第二步退火：冷却到55〜60°C,引物结合到互补DT3链；第三步延伸：加热至70〜75°C,热稳定DhA聚合酶从引物起始互补链的合成。第二步：基因表达载体的构建C目的基因与运载体结合》1.hl的：使H的基因在受体细胞中稳定存在,并H可以遗传至下一代,使目的基因能够表达和发挥作用°2.组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因+复制原点(1)启动了：是一段冇特殊结构的轉片段,位于基因的首端,是RNA聚合酶识别和结合的部位,能驱动基因转录出嘶,最终获得所需的蛋白质n(2)终止了：也是一段冇特殊结构的DT4片段，位于慕因的屋端
7、。99—10丧达ft体慣戒圈(3)标记卑因的作用:是为了鉴左受体细胞中是否含有I的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选岀来。常用的标记基因是抗生素基因。第三步：将目的基因导入受体细胞1・转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。2.常用的转化方法:将忖的基因导入植物细胞：采用最多的方法是-农杆菌转化法,萇次还冇一基因枪法和花粉通道法等。将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术。此方法的受体细胞多是受精卵。将目的基因导入微牛物细胞：Cad2处理使细菌成为感受态细胞3.重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。第四步：目
8、的基因的检测和鉴定1.检测首先要检测转基因生物的染色体DhA上是否插入了目的基因，方法是采用MA分子杂交技术。其次还要检测目的基因是否转录出了nW3,方法是采用用标记的目的基因单链作探针与嘶进行核酸分子杂交，最后检测目的基因是否i译成蛋白质,方法是从转基因牛•物屮提取蛋白质,用相应的抗体进行抗原•抗体杂交。2.鉴定:有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等思考：頁•核牛物
