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时间:2019-10-11
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1、产抗菌物质芽砲杆菌在农业生物防治中的应用与研究摘要:芽抱杆菌能分泌多种具有抗菌活性的次级代谢产物,主要包括抗牛索、细菌索、抗菌蛋口、水解酶类以及挥发性物质等。木文主要介绍产抗菌蛋白芽抱杆菌在农业生物防治屮的丿应用研究,并对其产抗菌物质类型、抗菌作用机理做简要论述。关键词:芽他杆菌;抗菌蛋白;农业生物防治芽砲杆菌(Bacillusspp.)在防治植物病害中的研究应用非常广泛,从土壤传播病害到气流传播病害,从粮食作物病害到水果、蔬菜、花卉等经济作物病害都有涉及。这类生防细菌可以产生内生芽抱,抗逆能力强,繁殖速度快,营养要求简单,易定殖在梢物表面。冃前用于病害生防的芽
2、抱杆菌种类有:枯草芽他杆菌(B.subtilis)^多粘芽抱杆菌(B.polymyxa)、蜡•状芽他杆菌(B.cereus)>地衣芽他杆菌(B.licheniformis)^巨人芽他杆菌(B.megaterium)>短小芽砲杆菌(B.pumilis)和蕈状菌变种(B.cereusvar.lmycoides)等。1•芽抱杆菌分泌的主要抗菌物质1.1抗生素(antibiotic)是一类微生物产生的对其他微生物具抑制或杀死作用的非蛋白质的小分了化合物。抗生索一般在低浓度(小于lOppm)下就能起抗生作用。蜡状芽抱杆菌(B.cereus)菌株UW85产生两种抗生素即zw
3、ittermicinA和kanosamine,其中zwittermicinA抑制苜蓿猝倒病菌(Phytophthoramcdicaginis)芽管的伸长,kanosaminc引起砲子囊膨胀“。1.2细菌索是一•种细菌产生的对亲缘关系较近的种或种以下不同菌株有抑制作用的抗菌物质,大多含冇一些稀冇氨基酸分了结构,而R—般是环肽。细菌索可分为低分了量多肽类、核昔酸类似物细菌素,与分高分子量蛋口质颗粒细菌素两人类,蛋口质颗粒细菌素有球形、椭圆形、棒形与带棒状尾部多而体等多种结构。枯草菌索(Subtilin)是迄今为止研究较深入的细菌索么一。它的前体是56个Aa小肽,其中
4、24个Aa为信号肽,经信号肽酶切除和一系列修饰如Thr脱水和Ser与Cys硫酯化可以形成32个Aa的活性小肽,具有抗酸和抗热的特性。Zheng等⑵从枯草芽抱杆菌小分离出一-种分子量为3.4kD细菌索,其对引致食品变质的细菌B.aureus和Salmonellatyphimuritum冇抑制作用,它可以作为一种抗菌物质应用于食品保鲜。1-3抗菌蛋白芽抱杆菌生长代谢过程中能分泌-些抑制植物病原菌的活性蛋白,这些蛋白在生防屮的作用显著。芽砲杆菌产生的抗菌蛋白中包括多肽、脂蛋白和糖蛋白,结构冇环状、线状和分支环状等。枯草芽砲杆菌BS-98菌株产生的蛋白能强烈抑制苹果轮纹
5、病菌(Physalosporapiricola)等植物病原真菌。其氨基酸组分分析表明,该蛋口含11种不同的氨基酸,尤其富含谷氨酸和半胱氨酸等,此外,还有一些未知蛋口在抑制植物病原菌方面也表现出强烈的作用⑶。枯草芽抱杆菌JM4菌株能够产牛JM4-A和JM4-B两种新型抗菌肽,分子量分别为1422.71D和1422.65D,这两种抗菌肽除了3个未知序列外,7个氨基酸序列组成相同,有很强的同源性⑷。BS-2菌株分泌的抗菌多肽分子量<2884.39Da,该多肽对热稳定并能抗紫外线照射,对炭疽病菌和番茄青枯病菌等多种植物病原真菌和细菌有强烈的抑制作川,对辣椒果实炭疽病具有
6、69.79%(9d后)的防病效果⑸。刘永锋等⑹分离的枯草芽泡杆菌Bs-916对多种病菌具抑制活性,他们分别采用丙酮沉淀、PEG沉淀、等电点沉淀和超微浓缩等方法从Bs-916代谢液屮获得的胞外抗菌物质具有蛋口质的性质。蜡状芽紀杆菌(B.cereus)S・1菌株的发酵液,经过酸沉淀和有机溶剂抽提,SephadexG-100与DEAE-52柱层析等步骤示,分离得到一种环状多肽APS-1,同时进行了氨基酸组分分析匚铁平板抑菌试验结果表明,APS-1对9种真菌的抱子萌发有抑制作川。李伟光等筛选出了拮抗菌B.cereusG35,具拮抗物具蛋口性质,部分纯化物对蛋白酶敏感。还
7、有一些对未鉴定种的芽抱杆菌抗菌蛋片研究与报道。刘晓妹等⑼发现芽他杆菌B1和B2的培养滤液对蜿豆尖镰抱具有抑制作用,在两个菌株的培养滤液小分别检测出一种抗菌蛋口。辛玉成等加苹果得心病的生防菌株枯草芽他杆菌XM16培养液中分离纯化得到一种抗菌蛋白。芽他杆菌BS・98和B130菌株的抗菌蛋白对热稳定,对蛋白酶部分頌感。1•生防菌的主要作用机制生防菌的生防机制是多种多样的,如产生抗菌素、重寄生、溶菌作用、竞争作用和诱导抗性等。由于人多数据是在试验条件下获得的,而田间条件要复杂的多,所以实际上可能两种或三种机制同时起作用,也可能是在植物不同部位或不同发育时期某一机制在起主
8、要作用,目前已明确的主要
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