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时间:2019-10-11
《基质金属蛋白酶MMP1及其抑制因子TIMP1在子宫内膜异位症中的表达及意义》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、基质金属蛋白酶MMP1及其抑制因子TIMP1在子宫内膜异位症中的表达及意义【摘要】目的研究基质金属蛋白酶1(MMP1)及其抑制因子TIMPImRNA和蛋白在子宫内膜异位症(EMs)异位和在位内膜组织中的表达,探讨其在子宫内膜异位症发生发展中的作用。方法应用反转录聚合酶链反应(RTPCR)和免疫组化SP法检测43例EMs的异位和在位内膜及20例正常子宫内膜中MMP1,TIMPImRNA及蛋白的表达水平。结果在EMs异位内膜屮MMPImRNA及蛋白均呈高表达,TIMPImRNA及蛋白均呈低表达与EMs在位内膜和正常内膜相比,差异有显著性,P<0.05
2、oW1/TIMP1比值在异位内膜和在位内膜分别为1.46±0.57,1・15±0・38,均显著高于正常内膜(PV0.05);帽异位内膜中比值>1的几率(33/39,846%)明显高于在位内膜(P<0.05),两者呈显著负相关。异位内膜组织中MMP1,TIMPImRNA及蛋白的表达无周期性变化,但与rAFS临床基质金属蛋白酶MMP1及其抑制因子TIMP1在子宫内膜异位症中的表达及意义【摘要】目的研究基质金属蛋白酶1(MMP1)及其抑制因子TIMPImRNA和蛋白在子宫内膜异位症(EMs)异位和在位内膜组织中的表达,探讨其在子宫内膜异位症发生发展中的
3、作用。方法应用反转录聚合酶链反应(RTPCR)和免疫组化SP法检测43例EMs的异位和在位内膜及20例正常子宫内膜中MMP1,TIMPImRNA及蛋白的表达水平。结果在EMs异位内膜屮MMPImRNA及蛋白均呈高表达,TIMPImRNA及蛋白均呈低表达与EMs在位内膜和正常内膜相比,差异有显著性,P<0.05oW1/TIMP1比值在异位内膜和在位内膜分别为1.46±0.57,1・15±0・38,均显著高于正常内膜(PV0.05);帽异位内膜中比值>1的几率(33/39,846%)明显高于在位内膜(P<0.05),两者呈显著负相关。异位内膜组织中M
4、MP1,TIMPImRNA及蛋白的表达无周期性变化,但与rAFS临床分期有相关性(P5、侵袭并种植于腹膜的关键因素[1]。基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinases,MMPs)是一组锌依赖性的、在结构上高度同源的蛋白水解酶,是降解ECM成分的最显要的一组酶类[2],其活性在体内受到天然组织抑制剂金属蛋白酶组织抑制因子(tissueinhibitorofmatrixmetalloproteinases,TIMPs)的特异性抑制。MMPs与TIMPs间的平衡调节对于协调ECM降解与重建、维持ECM内环境稳定和结构完整具有重要作用。目前研究表明EMs患者的在位及异位子宫内膜均可分泌MMPs及TIMPs,推测其在EMs6、的发牛发展中可能具有重要意义。本实验应用免疫组化SP法和RTPCR技术检测子宫内膜异位症异位和在位内膜中MMP1和TIMP1的表达,以探讨MMPs/TIMPs在EMs发生发展中的作用。1材料和方法1.1对象45例EMs异位内膜组织标本均来口本院2003年7月—2005年4月因EMs而行手术的患者,平均年龄(35.5±6.4)岁,其中增生期25例,分泌期20例。根据rAFS分期标准,广II期20例,III期16例,IV期9例。22例EMs在位内膜标本取自上述因EMs行子宫切除的患者,其屮增生期14例,分泌期8例。另取同期因子宫肌瘤而行子7、宫切除术患者正常子宫内膜20例为对照组,平均年龄(35.5±4.8)岁,其中增殖期子宫内膜12例,分泌期8例。所有患者术前3个月内均未接受任何激素治疗,术后均经病理学诊断证实。月经周期的划分根据末次月经及子宫内膜病理检查结果确定。1.2试剂MMP1,TIMP1鼠抗单克隆抗体、SP试剂盒均购口北京中山生物技术有限公司;反转录试剂盒、TRIzol试剂盒均为美国Promega公司产品。引物由上海生工生物工程公司合成。1.3检测方法及结果判定1.3.1免疫组化SP法试验步骤按说明书进行,DAB显色,PSB代替一抗作阴性对照,已知阳性染色的乳腺癌组织切片为8、阳性对照。阳性细胞为光镜下细胞浆或胞膜中出现明确的棕黄色颗粒,参照Shimizu等[3]方法,随机选取5个高倍视野,综合染色强度和阳性细
5、侵袭并种植于腹膜的关键因素[1]。基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinases,MMPs)是一组锌依赖性的、在结构上高度同源的蛋白水解酶,是降解ECM成分的最显要的一组酶类[2],其活性在体内受到天然组织抑制剂金属蛋白酶组织抑制因子(tissueinhibitorofmatrixmetalloproteinases,TIMPs)的特异性抑制。MMPs与TIMPs间的平衡调节对于协调ECM降解与重建、维持ECM内环境稳定和结构完整具有重要作用。目前研究表明EMs患者的在位及异位子宫内膜均可分泌MMPs及TIMPs,推测其在EMs
6、的发牛发展中可能具有重要意义。本实验应用免疫组化SP法和RTPCR技术检测子宫内膜异位症异位和在位内膜中MMP1和TIMP1的表达,以探讨MMPs/TIMPs在EMs发生发展中的作用。1材料和方法1.1对象45例EMs异位内膜组织标本均来口本院2003年7月—2005年4月因EMs而行手术的患者,平均年龄(35.5±6.4)岁,其中增生期25例,分泌期20例。根据rAFS分期标准,广II期20例,III期16例,IV期9例。22例EMs在位内膜标本取自上述因EMs行子宫切除的患者,其屮增生期14例,分泌期8例。另取同期因子宫肌瘤而行子
7、宫切除术患者正常子宫内膜20例为对照组,平均年龄(35.5±4.8)岁,其中增殖期子宫内膜12例,分泌期8例。所有患者术前3个月内均未接受任何激素治疗,术后均经病理学诊断证实。月经周期的划分根据末次月经及子宫内膜病理检查结果确定。1.2试剂MMP1,TIMP1鼠抗单克隆抗体、SP试剂盒均购口北京中山生物技术有限公司;反转录试剂盒、TRIzol试剂盒均为美国Promega公司产品。引物由上海生工生物工程公司合成。1.3检测方法及结果判定1.3.1免疫组化SP法试验步骤按说明书进行,DAB显色,PSB代替一抗作阴性对照,已知阳性染色的乳腺癌组织切片为
8、阳性对照。阳性细胞为光镜下细胞浆或胞膜中出现明确的棕黄色颗粒,参照Shimizu等[3]方法,随机选取5个高倍视野,综合染色强度和阳性细
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