猪链球菌研究进展

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1、猪链球菌主要毒力因子研究摘要：猪链球菌(Streptococcussuistype)是一种重要的人畜共患病病原，在界范I洞内广泛流行，可以引起猪或人的败血症、脑膜炎、心内膜炎、关节炎等。其中，毒力因子在致病过程中扮演着重要的作用，木文就近年来有关猪链球菌毒力因子的研究进展作一综述。关键词：猪链球菌；毒力因了；人畜共虑病猪链球菌是链球菌的一•种，可引起人兽共患传染病。该菌按荚膜多糖抗原共分为35个血清型,猪链球菌2型(Streptococcussuistype2,SS2)又称荚膜2型猪链球菌,是其中致病力最强的一种，为苹兰阳性球菌，菌体肓径约

2、lum,固体培养物以双球菌居多，部分呈3〜5个排列，液体培养物以链状为主，无芽愆能形成荚膜。该菌不但能引起猪的急性败血症、脑膜炎、关节炎其至死亡，同时也可导致养猪从业人员感染和死亡，因此对其进行研究十分必要。木文就近年来有关SS2主要毒力因了的研究进展作一综述。1SS2的毒力因子『研究发现的SS2毒力因子主耍有溶菌酶释放蛋白(Muramidasereleasedprotein,MRP)>胞外蛋白因了(Extracellularproteinfactor,EF)>荚膜多糖(Capsularpolysaccharide,CPS)和溶血索(Sui

3、lysin),以及近年来相继发现的纤维索结合蛋白、DNase>IgG结合蛋白、Sno蛋白、谷氨酸脱氢酶、毒力岛、38kd蛋白、44kd蛋白、54kd蛋白、78kd蛋白、86kd蛋白等!o1・1溶菌酶释放蛋白(MRP)目前对MRP的研究比较深入，致病性较高的SS2基木上都有MRP。2()(X)年，何孔旺等2在检测从我国江苏病猪体内分离的菌株吋发现，当地的SS2也是MRPoMRP通常存在于原生质体或培养基的上清液中，III1208个氨基酸组成，相对•分子质量约为136000,MRP能抵抗巨噬细胞的吞噬，并且能黏附上皮细胞。对其基因序列的分析发现

4、，锚定序列询有一高度重复区，其中包括与纤维素结合所需的氨基酸序列，但不与人的纤维素结合。重复区询是一•段富含脯氨酸的序列，可能与胞壁肽聚糖的结合有关。细菌的黏附是决定病原菌能否感染的关键一步。除了标准的MRP蛋白外，述有两种与其类似的蛋白MRPS(相对分子质量小于136000)和MRP*(相对分子质量大于136000)研究发现，MRP可黏附上皮细胞，并可诱导上皮细胞凋亡，证实了MRP是SS2的毒力因子，将基因工程蛋白MRP免疫猪，可以获得抵抗SS2感染的保护力1・2胞外蛋白因子(EF)目询对EF的研究也比较多，高致病性SS2基木上也都有

5、EF,EF通常存在于培养基的上清液屮，相对分了质蜃为11()()()()。在一些不含有EF因了的SS2屮，还可能含有另一种蛋AEF*,M可以产生与EF类似的免疫效果ISmith等“克隆并表达了EF和EF*,结果发现EF和EF*蛋白N-末端的前833个氨基酸儿乎完全相同，而C-末端则不同，EF*比EF蛋白多了几个重复的氨基酸，且这种重复序列在不同的EF中有所不同。不过，MRP和EF并不是保守的毒力因子，即并不是所有的强毒株均带有这两个毒力因子，并且其存在许多亚型。1.3溶血素(Suilysin)溶血素是一种分泌性蛋白，作用于红细胞膜上胆固醇而

6、溶解细胞，相对分了质量约为54000-65000,属硫醇激活的毒素家族，对热敏感-Norton等'报道，猪链球菌溶血索在猪链球菌黏附和裂解Hep-2细胞的过程小发挥了重要作用，且产生溶血索的SS2活菌和培养上清及纯化的溶血素均能导致人脑微血管内皮单层细胞产生病变，而所产生的病变可被猪链球菌溶血索抗体和胆固醇所抑制。不产溶血索的菌株及其培养上清均不能引起细胞病变。杜华茂等&在这方而通过实验也得出了类似的结论，证明溶血素与猪链球菌2型的毒力有关。溶血素是一个良好的交义保护因子，含有纯化溶血素的疫苗可保护小鼠免受感染，也可部分保护猪。不同血清型的

7、菌种所分泌的溶血素的生化特性和免疫特性几乎和同，基因型也无明显差异。国内分离的SS2强毒株儿乎均能产牛溶血素，且均具有良好的免疫原性。1・4荚膜多糖(CPS)Elliott等了用Sepharose6B层析后经乙醇沉淀得到型特异性的荚膜多糖，和对分了质量至少为100000000,山鼠李糖、半乳糖、N-乙酰葡萄糖胺组成，摩尔比为1.07：3.17：1.00。Wibawan等8的研究表明，荚膜的存在降低了SS2被吞噬的程度。Segura等9的研究同样显示，有荚膜的SS2不易被吞噬，而无荚膜的突变株则很容易被吞噬。另外他们还发现，荚膜多糖抵抗吞噬细

8、胞的吞噬作用，是通过抑制其拮号传导路径实现的。山此可见，CPS是SS2的一个重要毒力因子，是使其避免被吞噬的主要因子。但CPS在许多非致病菌株中也存在，表明其并非必须的毒力因了。