毕业设计论文：烟色曲霉原生质体制备与紫外诱变论文

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3、•riff^^3?fJi・tii・斗'■”j^・・UJ人J—・~L_・XX7——A丄丄“丄匕―wxD"—•学士学位论文烟色曲霉原生质体制备与紫外诱变题目类别毕业论文系别生物工程系专业班级08014101学生姓名指导老师辅导老师起止时间2011年10月至2012年5月论文提交时间2012年5月二零一二年五月论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本

4、论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做岀重要贡献的个人和集体，均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本声明的法律结果由木人承担。学位论文作者签名：年月H目录摘要IV关键词IVAbstractVKeywordsVnus11.1材料41.1.1样品41.1.2实验试剂41.1.3酶4L1.4仪器与设备41.1.5培养基41.2实验方法51.2.1筛选育种过程51.2.2出发菌株烟色曲霉分解壳聚糖能力检测51.2.3液的配制51.2.4他了悬液的制备51.2.5制备原生质体51.2.6原生质体的紫外诱变及再生51.2.7高产菌

5、株的检出52结果和分析62.1烟色曲霉原生质体制备培养条件优化62.1」菌龄对原生质体产率的彫响62.1.2酶液pH对原生质体产率的影响62.1.3IW作用温度对原生质体产率的影响72.1.4酶作用时间对原生质体产率的影响82.2原生质体紫外照射剂量的确定92.3紫外诱变结果93结论10参考文献11致谢12烟色曲霉原生质体制备与紫外诱变本实验以烟色

6、11

7、霉（Monacusfulginosus）为出发菌株JIJ混合酶制取原主质体并对原牛质体形成条件进行探讨，并进行紫外诱变选育。采用18h菌龄的菌丝体，使用pH为5.0的蜗牛酶（5mg/ml）+纤维素酶（

8、5mg/ml）复合酶液，30°C下酶解2.5h,在该条件下原生质体浓度可达6.5xlO6个/niL,再生率为6.3%。在最佳紫外线照射吋间90s下,突变株经筛选，得到一，株降解壳聚糖的酶活显著提高、遗传性能稳定的诱变株。其酶活比出发菌株捉高了1.23倍。关键词烟色曲霉：壳聚糖卿；原生质体；紫外诱变ProtoplastPreparationandBreedingofHigherEsterifyingEnzymeActivitMutantsbyProtoplastMutagenesisofUltravioletIrradiationofMonacusfii

9、lginosusAbstractUsingMonacusfulginosusastheoriginalstrain,Studiedonthepreparationandregenerationconditionsofprotoplastsbymutagenesisofultravioletirradiation□Theresultsshowedthattreated18hcultureofMonascusruberwith5mg/mlsnailenzymeand5mg/mlCelluloseenzymewhosepHis5.0，theenzymolys

10、istimewas2.5hours,theenzymolysistemperaturewas30°C,theprotoplastscouldreach6.5><106unit/mL,andtheregenerationratereachedupto6.3%。UnderUVirradiationtimeinthebestcaseforthe90s,Afterinitiallysievingandduplicatesieves,themutagenesisstrainwhichownincreasingenzymeactivityandtransmissi

11、bilitywasobtained□Itsesterifyingenzymecontentis1.23timeshigherthantheoriginalstrainoKeywordsMonacusfulginosus;Chitosanenzymes;protoplast;ultravioletmutagenesis刖B原牛.质体是指细胞壁被酶水解剥离后，剩下山原牛质膜包围的原牛.质部分原牛质体通常是由对数生长期的细胞制备而来的，代谢旺盛复制频繁生活力强对诱变剂的皱感性也强,诱变示易于形成单菌落而便于筛选；同时，原生质体还具有细胞壁再生能力，保持了细胞

12、的全能性，可以按照常规的细胞诱变方式对其进行诱变，从而提高突变株的变异幅度，诱变效果更为理想⑴