DB13_T2404-2016猪流行性腹泻病毒RT-PCR检测方法

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1、ICS65.020.20B05DB13河北省地方标准DB13/T2404—2016猪流行性腹泻病毒RT-PCR检测方法2016-09-30发布2016-12-01实施河北省质量技术监督局发布DB13/T2404—2016前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由河北省畜牧局提出。本标准起草单位：河北农业大学。本标准主要起草人：袁万哲、孙继国、宋勤叶、马增军、金东航、李丽敏、张磊、李睿文。IDB13/T2404—2016猪流行性腹泻病毒RT-PCR检测方法1范围本标准规定了猪流行性腹泻病毒RT-PCR检测方法的技术要求。本标准适用于检测猪粪便、腹泻猪胃肠及其内容物和这些采集样

2、品培养物中的猪流行性腹泻病毒。2缩略语下列缩略语适用于本文件。DEPC：焦碳酸二乙酯（diethypyrocarbonate）；dNTP：脱氧核苷酸三磷酸（deoxy-ribonucleosidetriphosphate）；EB：溴化乙锭（ethidiumbromide）；PCR：聚合酶链式反应（polymerasechainreaction）；RNA：核糖核酸（ribonucleicacid）；RT-PCR：反转录-聚合酶链式反应（reverse-transcriptionpolymerasechainreaction）；Vero细胞：非洲绿猴肾细胞；cDNA：互补脱氧核糖核酸。3主要仪器3

3、.1PCR仪。3.2凝胶成像系统。3.3台式低温高速离心机。3.4电泳仪。3.5电泳槽。3.6冰箱。3.7微量移液器。3.8水浴锅。4主要试剂4.1LSTRIzolRNA提取试剂或其他商品化的RNA提取试剂。4.2氯仿。4.31.0%琼脂糖凝胶：见附录A中A.1。4.450×TAE缓冲液：见附录A中A.2。1