凝胶色谱LC-20AD操作步骤

《凝胶色谱LC-20AD操作步骤》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、凝胶色谱LC-20AD操作步骤使用前缓慢水平摇动样品瓶，使样品浓度均匀，且瓶壁无气泡。使用色谱纯级溶剂和超纯水来配制流动相，超声脱气。提示：超声15min，恢复到室温后才可使用。1.分析操作步骤1.1.开机及平衡过程1.1.1.打开空调，使室内温度保持在25℃左右。1.1.2.打开电脑及仪器（包括输液泵LC-20AD、自动进样器SIL-20A、检测器、柱温箱CTO-20A），打开氮气钢瓶解压阀，调节压力使蒸发光散射检测器压力维持在350kPa。提示：在打开仪器的时候，通常控制器最后开。1.1.3

2、.运行LCsolution。双击电脑桌面，打开LCsolution程序，点击第一个图标。Login窗口点击OK，无密码。1.1.4.仪器自动加载方法参数。²流动相流速（pumpaflow）：0.5ml/min²柱温（oventemperature）：40℃（与检测器温度相同）²分析时间：30min1.1.1.输液泵排气：逆时针拧开LC-20AD排液阀，按purge按钮，3min后自动结束，顺时针拧紧排气阀。提示：排液阀拧开不要超过180度，否则反而容易在purge时引入气泡。1.1.2.进样器冲

3、洗：按自动进样器上purge按钮，25min后自动结束；1.1.3.平衡GPC柱：待1.1.5结束后，按（InstrumentOn/Off）使仪器按照方法参数开始运转，一般60min左右基线可以走平。提示：可以与1.1.6步同时进行。1.2.分析操作过程1.2.1.放入样品瓶，记录放置孔号。提示：样品架应推倒底，瓶垫应该白色朝上。1.2.2.编辑批处理表1.2.2.1.右侧助手烂点击“Batchprocessing”1.2.2.2.New；1.2.2.3.输入第一个样品进样器孔号（Vial#），

4、右键filldetail；1.2.2.4.跳出窗口中依次填入行数（由第1行到第6行）、第一个样品孔号（2）与重复次数（1次）；点击“OK”；1.2.2.5.依次输入samplename（样品名）、sampleID（样品编号）；1.2.2.6.methodfile列中输入方法文件（*.lcm文件），左键选定列，右键单击，选择filldown向下填充；1.2.2.7.确定数据文件保存地址及名称；1.2.2.8.输入进样体积：50μl-8μl（标样浓度高则进样量少，低则进样量多；所有的标准品和代测样品

5、应该采用相同的进样体积）；1.2.2.9.保存批处理文件。1.2.3.运行批处理表。点击Batchstart按钮，开始进样。1.3.分析完冲洗及关机过程1.3.1栏图标，停止温控。1.3.2mL/min流速流入填充柱，直至柱温冷却至室温；1.3.3rumenton/off”1.3.4依次关闭程序、电脑、仪器及氮气1.分子量计算过程以sample目录下的演示文件为例介绍分子量校正曲线制作及操作过程。1.1.样品平均分子量计算1．双击打开未知品数据文件GPC_Data-005。单击Method标签。

6、将标准曲线方法拖到右边的色谱图窗口中，加载方法参数。出现选择方法参数对话框，直接单击OK。1．单击工具栏MolecularWeightDistribution按钮。查看分子量计算结果。