凝胶渗透色谱仪操作规程.doc

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1、凝胶渗透色谱仪操作规程（1）仪器与电脑开机顺序并无先后，但是只有等仪器初始化好后，才能启动装在电脑上的CLASS-VP软件。（2）双击图标，进入操作界面。此时会出现一个ShimadzuCLASS-VP窗口，双击Instrument1图标，仪器会发出蜂鸣声，以表示建立了与计算机的连接。随即出现如下主操作界面：（3）点击图标、和，打开instrument、pump和oven。②RIDR.FlowOn/Off工具栏：⑥RinseAutosample⑩LCSetupAssistant④ZeroRID⑧TurnpumpsOn/off⑨LCD⑦InstrumentOn/off⑤Purg

2、eAutosample③BalanceRID①OvenOn/Off按下①⑦⑧⑨按钮，完成仪器初始化，此时这些按钮呈高亮状态，如上图所示。②③④为走基线时调整基线所用，②为冲洗参比池，③平衡参比池与样品池，④基线归零。⑥为排赶进样针气泡，⑤为清洗进样针外壁⑩为返回主操作界面(4)点击图标，冲洗进样针25分钟。点击图标，冲洗autosampler3次。（5）按主界面中的任何实物图标（溶剂瓶、进样架、泵、检测器）进入InstrumentSetup中，进行主要参数设置：Pumps：mode选择LowPressureGradient，自定义流量T.Flow及洗脱液的配比。一般T.Fl

3、ow是0.8mL/min。CTO-10Avp：一般柱温40℃，最高不超过85℃。RID-10A(DetA)SCL-10Avp注意：参数设置完毕后，要按下Download键，所有设置方可生效。在主菜单上选择File>Method>Save或Saveas保存方法文件。（6）走基线与进样PreviewSingleRunSequenceRunStop点击Preview预览基线，基线走平后，方可进样。走完第一遍基线（需47分钟）后，点击图标，冲洗参比池，必须冲洗3次，每次3~4分钟，然后点击图标平衡参比池和样品池（观察示差检测器，±25以内视为正常）。然后走第二遍基线，基线走平后，点

4、击图标调零。单个进样：点击SingleRun键，此时出现一对话框，在Vial中输入样品所在位置编号，自动进样架上有。在Injectionvolume中输入所需的进样量，单位：µL，点击“Start”开始测试。连续进样：在主菜单上选择Sequence>Edit，出现以下界面:输入样品所在的位置编号、重复次数、进样量、方法文件等。编辑完毕，选择File→Sequence→Saveas保存。点击SequenceRun键，开始分析。(7)测试结束后，点击图标，冲洗进样针5分钟，再次点击此图标停止Purge。依次点击、和，关闭oven、pump和instrument。关闭软件，然后关

5、闭各仪器开关。(8)取出样品瓶。下图为色谱窗口：（9）分子量分析:在ShimadzuCLASS-VP窗口，双击“OfflineProcessing”图标，进入离线分析界面。选择File→Data→Open，打开所要分析的文件，设定分析条件，点击“Analyze”图标，这时软件自动产生一个数据文件。双击进入主界面：双击Mol.Weight，进入分子量计算界面：单击出现如下对话框，分别选择对应的刚产生的上述数据文件及最新的标准曲线LCCalc.Data：待分析数据GPCMethod：标准曲线然后按Calculation计算，得到分析曲线：点击，出现分析后得到的数据注意事项1.样

6、品的制备：将待测样品溶解在HPLC级的溶剂后，用有机过滤膜（0.45μm以下）滤去固体小颗粒后收集在专用的样品瓶中，方可进入柱子，溶解过程中，不得使用超声波、不得加热，如有必要可以放置过夜。2.GPC的样品是要经过干燥过的。样品纯度也必须有保障。3.不得使用流动相以外的溶剂溶解样品。4.检查废液瓶，注意及时更换，勿让废液溢出。5.表征结束后，应及时取出样品瓶，请勿留在仪器内。凝胶渗透色谱（GPC）保养与维护1.确保GPC所处室内环境的干净整洁，房间温度应恒温在20℃。2.GPC使用溶剂为HPLC级THF。请在使用前先查看并保证装流动相的瓶子是满的，若液面很低，请先加满流动相

7、；同时检查废液瓶，注意及时更换，勿让废液溢出。3.装流动相的瓶子应保持良好的密封性，防止水气的进入。4.若所用溶剂非同一批次溶剂，请重新标定标样，再做样品。而且应每两月走一次标样，检查柱效是否降低。5.样品的制备：将待测样品溶解在HPLC级的溶剂后，用有机过滤膜（0.2μm）滤去固体小颗粒后收集在专用的样品瓶中，方可进入柱子。GPC的样品是要经过干燥过的。样品纯度也必须有保障。表征结束后，应及时取出样品瓶，请勿留在仪器内。