铁皮石斛检测

《铁皮石斛检测》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、铁皮石斛多糖与甘露糖检测规程铁皮石斛TiepishihuDENDROBIIOFFICMALISCAULIS本品为兰科植物铁皮石斛DendrobiumofficinaleKimu-raetM1go的干燥茎。11月至翌年3月采收，除去杂质，剪去部分须根，边加热边扭成螺旋形或弹簧状，烘干；或切成段，干燥或低温烘干，前者习称“铁皮枫斗”(耳环石斛)；后者习称“铁皮石斛”。【性状】铁皮枫斗本品呈螺旋形或弹簧状.通常为2～6个旋纹，茎拉直后长3.5～8cm，直径O.2～O.4cm。表面黄绿色或略带金黄色，有细纵皱纹，节明显，节上有时可见

2、残留的灰白色叶鞘；一端可见茎基部留下的短须根。质坚实，易折断，断面平坦，灰白色至灰绿色，略角质状。气微，味淡，嚼之有黏性。铁皮石斛本品呈圆柱形的段，长短不等。【鉴别】(1)本品横切面：表皮细胞1列，扁平，外壁及侧壁稍增厚、微木化，外被黄色角质层，有的外层可见无色的薄壁细胞组成的叶鞘层。基本薄壁组织细胞多角形，大小相似，其问散在多数维管束，略排成4～5圈，维管束外韧型，外围排列有厚壁的纤维束，有的外侧小型薄壁细胞中含有硅质块。含草酸钙针晶束的黏液细胞多见于近表皮处。(2)取本品粉末1g，加甲醇50m1，超声处理30分钟，滤过，

3、滤液蒸干，残渣加水15ml使溶解，用石油醚(60～90℃)洗涤2次，每次20ml，弃去石油醚液，水液用乙酸乙酯洗涤2次，每次20ml，弃去洗液，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取铁皮石斛对照药材1g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(附录ⅥB)试验，吸取上述两种溶液各2～5μl，分别点于同一聚酰胺薄膜上，使成条状，以乙醇-丁酮-乙酰丙酮-水(15：15：5：85)为展开剂，展开，取出，烘干，喷以三氯化铝试液，在105℃烘约3分钟，置紫外光灯(365n

4、m)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。【检查】甘露糖与葡萄糖峰面积比取葡萄糖对照品适量，精密称定，加水制成每1ml含50pg的溶液，作为对照品溶液。精密吸取O.4m1，按[含量测定]甘露糖项下方法依法测定。供试品色谱中，甘露糖与葡萄糖的峰面积比应为2.4～8.0。水分不得过12.O％(附录ⅨH第一法)。总灰分不得过6.O％(附录ⅨK)。【浸出物】照醇溶性浸出物测定法(附录XA)项下的热浸法测定，用乙醇作溶剂，不得少于6.5％。【含量测定】（一）多糖1.1试剂1.1.16%苯酚：先配置8

5、0%苯酚：80g苯酚（分析纯重蒸馏试剂）加20g水使之溶解，可置冰箱中避光长期储存。 再配置5%苯酚：取73ml80%苯酚于容量瓶中，加水至48g（每次测定均需现配），测定的时候就用5%的苯酚来测！ 1.1.2无水乙醇1.1.380%乙醇1.1.4浓硫酸1.2设备：1.2.110ml具塞试管，试验前检查塞子的密封性，不得有泄漏，1.2.210至15ml离心管，使管口离离心液液面1cm以上，以防离心液甩出。1.2.3紫外一可见分光光度计1.2.4冰箱与冰块1.2.5粉碎机，耐酸薄手套。2.2对照品溶液的制备2.2.1)取无水葡

6、萄糖对照品0.1g，精密称定，加水制成每1m1含100μg的溶液，即得。标准曲线的制备精密量取对照品溶液0ml、0.1ml、O.2ml、O.4ml、O.6m1、O.8ml，分别置10ml具塞试管中（用前注意检查塞子的密封性），各加水补至1.0ml，精密加入5％苯酚溶液1ml(临用配制)，摇匀，再精密加硫酸5ml，摇匀，置沸水浴中加热20分钟，取出，置冰浴中冷却5分钟，以相应试剂为空白，照紫外一可见分光光度法(附录VA)，在488nm的波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。20130723曲线y=0.

7、0088x+0.1128，y为浓度.ug；x为吸光度。备注：1.检测液位浓稠硫酸样液，腐蚀性很强倒皿时一定小心不要弄到手上，最好带上合适的手套。2．检测液为浓稠硫酸样液，且总体积只有7ml（共2皿），连续检测多个样品时，比色皿用水洗净，尽量甩干，再用少量待测液润洗，待测样品放在冰水浴中，测一个拿一个。3.试剂添加顺序：样品-5%苯酚-浓硫酸，不可颠倒；样品加浓硫酸前要摇匀，加之后也要摇匀，注意塞子密封，小心漏液。4，用过的浓硫酸中会有炭丝，若检测液中黑炭丝的颜色有扩散的话，OD值会升高，需重处理复测。2.2.2供试品溶液的制

8、备鲜茎100g以上，剪成2-3mm段，105℃鼓风烘干，过40目筛分别装入样品袋（鲜茎少的话，烘干后用锤子锤碎）称重，按筛上下重量比例取本品共约O.3g，精密称定，加水200ml，加热回流2小时，放冷，转移至250ml量瓶中，用少量水分次洗涤容器，洗液并入同一量瓶中，加水至刻度，摇匀，滤过